卡流动定仪

作者：李昂; 胡翮; 郭丙炎;（湖南省湘潭市药品检验所;）摘要：目的用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定盐酸丁卡因的含量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为水-甲醇-乙腈(45∶45∶10,v/v,含0.02%庚烷磺酸钠,0.34%磷酸二氢钾,三乙胺调pH至7.0),流速为1.0mL/min,检测波长为314nm,柱温为室温。结果盐酸丁卡因质量浓度在5.034～161.1μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=5.6572×105X-9.2039×105(r=0.9999),平均回收率为100.76%,RSD为0.41%(n=6)。结论RP-HPLC法简便、可靠、准确,可作为盐酸丁卡因注射液的含量测定方法。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271103_386360_1606903_3.jpg

总硬度是指钙、镁浓度的总和。水中的钙、镁离子主要来源于土壤和岩石中的钙镁盐类的溶解。一般认为，水中的硬度在维持机体的钙、镁平衡上具有良好作用，但硬度过高对机体也有不利的影响。因此，各国对生活饮用水水质总硬度都有控制标准，我国的控制标准为450mg/L。在以往的检测中，大多采用Na2EDTA滴定法、原子吸收法以及等离子发射光谱法。但是，前面所述方法要不就是操作繁琐，要么仪器没有普及，导致应用受到限制。利用连续流动分析仪进行检测的方法，在整个检测过程中，不需要添加任何的有机溶剂，同时检测周期短、用量少，而且相比于手工检测而言，结果更加精准，对于大批量对水中总硬度的检测有着十分显著的效果。1.实验部分1.1仪器与原理仪器 SKALARSAN++连续流动分析仪-总硬度分析模块。原理：乙二胺四乙酸二钾镁渗透到缓冲溶液中，乙二胺四乙酸二钾镁中的镁与任何钙或其他阳离子发生交换，形成更稳定的EDTA螯合物。自由的镁离子与铬黑D指示剂在pH=10时发生反应，形成天蓝色配合物，在波长490nm处检测。1.2试剂和标准的配置试剂配置：30%聚氧乙烯月桂醚（Brij35）溶液：称取Brij35 30g，用水定容至100mL；乙二胺四乙酸二钠镁溶液：称取1.0g乙二胺四乙酸二钠镁溶于水，定容到1000mL并加入3.0mL Brij35；pH=10的缓冲液：称取3.1g硼酸和3.8g氯化钾溶于水，然后用1mol/L NaOH调pH到10.0，定容至1000mL，加入3mLBrij35混匀；铬黑T指示剂溶液：将"0.25g铬黑T指示剂溶于5mL无水乙醇中，加入200mL水，于70-80℃加热搅拌，直到乙醇全部挥发，冷却后用水稀释至1000mL，使用前抽滤。标准曲线浓度：45ppm，90ppm，135ppm，180ppm，225ppm[/f

因为在一起工作相处的时间比较久了，所以偶尔就有同仁问到让我很难解释清楚的问题，针对HPLC方面的比较多的是：你为什么用这个流动相，你怎么知道就一定要调节pH到3.5或2.5，诸如此类的问题，一句话两句话还真的难以解释清楚，想解释，但难于表达，还是以文字的形式表述更清晰。在药物分析这一块，化学药，平时接触到的绝大部分是弱酸性或弱碱性的药物。路易斯酸碱理论，大家都懂，Herderson-Halselbalch公式也许并不陌生，本人习惯称之为“H-H公式“，表述为：[img=,266,67]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708011314_01_2700892_3.png[/img]先撇开化学方面的因素，从数学方面入手，对于一个弱酸，当pH高于或低于pKa两个单位时，化合物99%以一种形式存在。反相色谱，简言之即流动相极性大于固定相极性的色谱，对于可电离的化合物，要想获得强的反相保留，尽可能不电离，因为化合物一旦电子，极性会变大，不电离时极性最小，极性小，在反相色谱柱上保留就强。对于HPLC分析方法开发，对反相色谱而言，化合物有保留是前提。比如，一个弱酸性化合物，pKa为5.0，那么，当流动相（缓冲液）pH调节为3.0时，99%的化合物是以弱酸形式存在的，即HA形式，此时，化合物极性相对较小，保留较强；另一方面，对于HPLC来讲，以一种形式存在的化合物，可以获得较好的尖锐的峰。对于为什么选择某一种缓冲体系，其实还是根据化合物本身的pKa而定。缓冲体系，简单分，三类：弱碱及其对应的盐，如NH3-NH4CL 弱酸及其对应的盐，如HAc-NaAc；多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐，如K2HPO3-K3PO3。工作中，常用的缓冲盐，绝大部分为磷酸盐或醋酸盐，这就限定了流动相的组成。举例，一个弱酸性化合物，pKa为5.0，可以选择磷酸盐体系，然后用磷酸调节pH至3.0即可，大局就定了。说了这么一大串，最关键的参数依然是pKa,这个参数在HPLC分析方法开发中有着举足轻重的地位。以上仅为个人总结观点，愿对各位坛友有所帮助。

[b]Q：反相高效液相色谱法测定乐卡地平片的含量，流动相是？A：乙腈-0.01mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%三乙胺,pH4.5,体积比65:35)===============================================================【活动内容】1、每个工作日上午10：00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖：抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；中奖名单：莫名其妙(注册ID：moyueqiu)lijing320323(注册ID：lijing320323）大川之子,纵横四海(注册ID：chuangu120)捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）999youran（注册ID：999youran）[img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812131602322146_8508_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812131602349366_7616_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励：所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color]（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法：HPLC基质：药品应用编号：102060化合物：乐卡地平色谱柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-227.html]Diamonsil C18 5μm 150 x 4.6mm[/url]色谱条件：色谱柱:Diamonsil C18 150×4.6 mm, 5μm (Cat#:99901)流动相:乙腈-0.01mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%三乙胺,pH4.5,体积比65:35)流速:1.0mL/min进样量:20μL检测器:G1315B 二极管阵列检测器(DAD),356nm文章出处：天津药学 2006,,5(18):16-18关键字：高效液相色谱法,乐卡地平片,含量测定,HPLC,Diamonsil C18,钻石一代图谱：[b]摘要[/b]:目的:建立用高效液相色谱法测定乐卡地平片含量的方法.方法:采用色谱柱DismonsilTM钻石C18(150 mm×4.6 mm,5μm) 流动相为乙腈-0.01 mol/L乙酸铵溶液(含0.1%三乙胺,pH 4.5,体积比65∶35) 流速1.0 ml/min 检测波长为356 nm.结果:乐卡地平质量浓度在20~200μg/ml内,线性关系良好.结论:本方法快速灵敏、重现性好,测定结果准确可靠,可用于乐卡地平片的含量测定.[img=,319,504]http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/5-4(2).jpg[/img][img=,319,504]http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/5-4(1)(1).jpg[/img][url=http://www.dikma.com.cn/Doc/read/id/44]全文下载：反相高效液相色谱法测定乐卡地平片的含量[/url]

蛋白质是生命的基础 , 人体的重要组成成分。它不仅是一种重要的供能物质 , 更主要的作用是促进生长发育和新陈代谢。但婴幼儿过量的摄入蛋白质会增加 肾脏的负担,因此蛋白质的摄入要根据营养状况、生长发育要求达到供求平衡 。乳及乳制品是婴幼儿摄取蛋白质的主要来源, 安徽阜阳 “毒奶粉 ”事件就是因为婴幼儿食用了蛋白质含量极低的劣质奶粉 ,所以对乳及乳制品中蛋白质含量的监控极为重要. 目前我国测定乳及乳制品中蛋白质的方法主要为凯氏定氮滴定法、凯氏定氮比色法, 但是这两种方法繁琐、费时。连续流动分析法测定乳及乳制品中蛋白质含量,对于批量样品,该方法具有很大的优势，不但简便快捷、而且准确度和灵敏度度也有很大的提高。1.实验部分1. 1 仪器与原理SAN+ +四通道连续流动分析仪 (荷兰SKALAR公司)蛋白质分析模块。原理：自 动测定蛋白质基于改良后的贝特勒反应即经过相互分离后对氨进行分析。消化后 的样品用酸式盐溶液稀释定容,铵盐通过与水杨酸钠反应氯化为一氯化胺, 通过氧化和氧化偶合后形成绿色配合物,反应是以硝普钠为催化剂,次氯酸钠溶液被用于提供氯, 在波长630 nm处检测。1. 2样品前处理准确吸取 液态奶 (或称取固 态奶 ), 同时准备空白样 分别置于 250 mlVELP消化管中 , 加入以1: 10混匀的 CuSO4和K2SO4混合催化剂, 再加入20 ml浓 H2SO4,于蛋白质自动消化仪中消化，最后消化至蓝绿色, 冷却至室温后用蒸馏水定容至100 ml。1.3试剂和标准的配置酸性氯化钠溶液: 称取100 g氯化钠用800 ml水溶解[

氰化物和挥发酚均是剧毒物质，水中一旦超标，会严重威胁人类的生命和健康，因此准确快速地检测环境水体中氰化物和挥发酚具有非常重要的意义。我国“生活饮用水卫生标准”，规定生活饮用水中挥发酚的含量不超过0.002mg/L，氰化物含量不得超过0.05mg/L。其中挥发酚是利用4- 氨基安替比林对其进行比色测定。水中氰化物的测定方法有硝酸银 滴定法、异烟酸-吡唑啉酮分光光度法、异烟酸-巴比妥酸分光光度法、吡啶-巴比妥酸分光光度法。这些方法测定水中挥发性酚和氰化物时，水样都需经蒸馏、富集处理过程，因此，要耗费较多的人工和时间，特别是在分析大批量水样时，这个缺点尤为明显，且试剂多为有毒或有恶臭的有机物，试剂消耗量大，有可能对环境造成危害。 连续流动分析具有在线蒸馏功能，它有分析速度快，试剂消耗少，自动化程度高的优点，避免了标准分析方法的测定结果与分析者个人的技术水平高低和工作态度的优劣所带来的人为误差。连续流动分析分析结果的准确性、精密度有了很大的提高。现代化的连续流动分析仪配备了计算机和相应的专用软件系统，使分析过程更为简单，操作更容易，并具有自动数据处理能力，使分析结果一目了然。基于上述原因，连续流动分析方法在饮用水及原水的水质分析方面得到越来越广泛的应用。1.实验部分1.1仪器与原理仪器 SKALARSAN++连续流动分析仪-氰化物和挥发酚分析模块。原理: 氰化物在 pH =5.2的缓冲溶液中通过125℃的在线蒸馏可得到HCN, 氰化物与氯胺T反应生成氯化氰，然后与异烟酸及巴比妥酸 反应生成红色配合物,在600nm 处检测其吸光度；挥发酚，酚类化合物在 PH=10±0.2 的介质中，在铁氰化钾存在下，与4- 氨基安替比林发生反应，生成橙红色的安替比林染料，在500-510nm 的波长下，可以被检测出来。1.2试剂和标准的配置氰化物：磷酸质量浓度1.69 g/mL，EDTA二钠溶液质量浓度为100 g/L，磷酸盐缓冲液（pH=7）、氯胺-T质量浓度为10 g/L 异烟酸-巴比妥酸显色剂。标准曲线浓度：0.0025ppm,0.0050ppm，0.0075ppm，0.010ppm，0.0125ppm。http://ng1.17img.