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自动讲解器相关的资讯

  • 超声波自动气象站有哪些-天合厂家来一一讲解#2022已更新
    超声波自动气象站有哪些-天合厂家来一一讲解#2022已更新بالموجاتفوقالصوتيةالتلقائيمحطةالطقسالتي-مصنعتيانخه【型号介绍:TH-CQX8】风和雨一样具有“净化空气”的特性,它有助于分散污染物,阻止它们集中在我们的市中心。当空气停滞时,污染物和灰尘颗粒会聚集在一起,形成低空气质量区域。风有助于吹走污染物,清除PM2.5和PM10颗粒,改善一些地区的空气质量。但是空气质量的好坏我们肉眼是看不出来的,气象站的出现,让我们对各项气象要素的变化都有了实质性的了解。气象站的种类也有很多:超声波气象站、小型气象站、校园气象站、农业气象站等,根据需求种类的不用,应用也不同。一、产品简介TH-CQX8超声波自动气象站是一款高度集成、低功耗、可快速安装、便于野外监测使用的高精度自动气象观测设备。该设备免调试,可快速布置,广泛运用于气象、农业、林业、环保、海洋、机场、港口、科学考察、校园教育等领域。与传统的超声波气象站相比,我司产品克服了对高精度计时器的需求,避免了因传感器启动延时、解调电路延时、温度变化而造成的测量不准问题。该设备创新性的采用八要素一体式传感器,可对风速、风向、温度、湿度、气压、pm2.5、pm10、噪声等气象要素进行实时观测,可实现户外气象参数24小时连续在线监测,通过数字量通讯接口将八项参数一次性输出给用户。二、产品特点1、顶盖隐藏式超声波探头,避免雨雪堆积的干扰,避免自然风遮挡2、原理为发射连续变频超声波信号,通过测量相对相位来检测风速风向3、风速、风向、温度、湿度、气压、pm2.5、pm10、噪声八要素一体式传感器4、标配GPRS、蓝牙、485转USB三种传输方式5、两米碳钢支架,顶部无需法兰盘可直接套接传感器6、传感器外壳采用进口ASA材质,更有效对抗盐雾等环境,防护等级达到IP65以上三、技术参数1、风速:测量原理超声波,0~60m/s(±0.1m/s)分辨率0.01m/s;2、风向:测量原理超声波,0~360°(±2°);分辨率:1°;3、空气温度:测量原理二极管结电压法,-40-60℃(±0.3℃),分辨率0.01°;4、空气湿度:测量原理电容式,0-100%RH(±0.3%RH),分辨率:0.1%RH;5、大气压力:测量原理压阻式,30-110Kpa(±0.25%),分辨率0.1hpa;6、PM2.5:测量原理光散射,0-1000ug/m3(±10%)7、PM10:测量原理光散射,0-1000ug/m3(±10%)8、噪声:测量原理电容式,30-120dB(±1.5dB)9、采集器供电接口:GX-12-3P插头,输入电压5V,带RS232输出Json数据格式,采集器供电:DC5V±0.5V峰值电流1A,10、传感器modbus、485接口:GX-12-4P插头,输出供电电压12V/1A,设备配置接口:GX-12-4P插头,输入电压5V11、太阳能供电、配置铅酸电池,可选配30W 20AH/50W 40AH/100W 100AH.充电控制器:150W,MPPT自动功率点跟踪,效率提高20%12、数据上传间隔:60s-65535s可调13、7寸安卓触屏,屏幕尺寸:1024*600 RGB LCD14、整机取得国家气象计量站校准证书15、整机取得实用新型专利,专利号ZL 2020 2 3208599.816、生产企业具有ISO质量管理体系、环境管理体系和职业健康管理体系认证17、生产企业具有知识产权管理体系认证证书和计算机软件注册证书上位机软件介绍1、PC单机版数据接收、存储、查看、分析软件2、支持串口数据接收、处理、展示3、支持json字符串、modbus485等通信方式4、可自设置存储时间,modbus485采集模式下可自设置采集时间5、支持自助增加、删除、修改监测参数的协议、名称、图标等6、支持数据后处理功能7、支持外置运行javascript脚本
  • 【云唐仪器知识科普】农残快速检测设备具备的功能和技术支持讲解
    【云唐仪器知识科普】农残快速检测设备具备的功能和技术支持讲解农药残留快速检测设备具备以下功能和技术支持:快速检测:能够快速检测出农产品中的农药残留,通常可在几分钟或几小时内完成检测。准确度高:采用先进的检测技术,如酶抑制法、荧光光谱法等,能够准确检测出农药残留的种类和浓度。自动化程度高:设备通常具备自动进样、自动检测、自动清洗等功能,可减少人为操作误差,提高检测精度和效率。多种农药残留检测:能够检测多种农药残留,包括有机磷、氨基甲酸酯类等不同种类的农药。便携式设计:设备采用便携式设计,方便携带和移动,可以随时随地开展农药残留检测工作。数据管理:设备具备数据存储和管理功能,可以记录检测结果并生成报告,方便对农药残留进行追溯和监管。智能化程度高:具备开机自检和调零功能,能够自动识别、自动校准等智能化操作,提高设备的稳定性和可靠性。人性化操作界面:设备通常具备人性化中文操作界面,操作简便易懂,方便用户进行操作和使用。高效能:可在短时间内对大量样本进行初筛,三分钟即可得出检测结果。安全可靠:设备符合国家相关标准和规范,能够保障检测过程的安全可靠。综上所述,农药残留快速检测设备具备多种功能和技术支持,能够快速、准确、高效地检测农产品中的农药残留,为保障食品安全提供有力的技术支持。
  • 多参数水质测定仪-一款可实现户外快速检测的仪器2024仪器讲解
    型号推荐:多参数水质测定仪-一款可实现户外快速检测的仪器2024仪器讲解,在环境保护与水资源管理的严峻挑战下,精准、高效的水质监测成为保障水质安全的关键。多参数水质测定仪应运而生,以其全面的检测能力与智能化的操作体验,为水质监测领域带来了革新。这款仪器不仅集成了对COD、氨氮、总磷、总氮等关键水质指标的快速检测能力,还融入了智能数据分析与可视化展示技术,让水质监测工作更加便捷、直观。 一、快速检测 它能够迅速测定水体中多达几十种的浓度指标,包括但不限于COD(化学需氧量)、氨氮、总磷、总氮等关键污染物,为水质评估提供了全面而准确的数据支持。这一特性使得监测工作更加全面,有助于及时发现并应对潜在的水质问题。 二、智能数据分析功能 通过图表、列表等多种形式展示数据,分析结果一目了然,极大地提高了数据处理的效率与准确性。用户无需复杂的操作,即可快速掌握水质状况,为决策提供有力依据。 三、满足不同需求 在硬件配置方面,该仪器同样表现出色。10.1英寸高清晰度彩色液晶触摸显示屏,搭配Android智能操作系统,不仅操作界面友好,还支持中英文切换,满足了不同用户的需求。此外,24孔智能双温区消解仪的加入,使得户外快速检测成为可能,进一步拓宽了仪器的应用范围。 四、功能特点 1、采用全新安卓7.1.1智能系统,人性化中文操作界面,运转速度更快速,稳定性更强。 2、10.1英寸液晶触摸屏显示,人性化中文操作界面,读数直观、简单。 3、采用精密比色池设计,使用光源一致,可以解决由于光源误差带来的检测结果误差问题,检测结果更加精准。 4、光源采用进口超高亮发光二极管,光源亮度可以自动调节与校准。 5、支持10mm、30mm、50mm皿比色和φ16mm管比色等比色方式,多元选择,确保测量的准确性; 综上所述,多参数水质测定仪以其全面的检测能力、智能化的数据分析与操作体验,以及便携的户外检测功能,成为了水质监测领域的得力助手。它不仅提升了水质监测的精度与效率,更为环境保护与水资源管理提供了强有力的技术支持。在未来的发展中,我们有理由相信这款仪器将发挥更加重要的作用。
  • 可自然降解传感器问世
    p style="text-indent: 2em "在英国《自然· 电子学》杂志14日在线发表的一篇动物研究论文中,美国科学家介绍了一种可移植、可伸展的应变及压力传感器,可以在有效使用期结束后自然降解。该装置将用于实时监测受损软组织所受的微弱应力和压力变化,有助于为患者设计个性化的康复方案。/pp style="text-indent: 2em "传感器技术早已“轻松”应用于多种不同的环境,它们能集成到小型化的发射器或接收器系统中,也能与人体直接接触服务于医疗应用。这其中,可降解传感器是一种新兴技术,它们在预定的使用期限结束后会自然降解,因此不需要通过二次手术取出来。/pp style="text-indent: 2em "但是,生物相容性微传感器的生产目前还是一个非常耗时和昂贵的过程,现有的这类传感器的感应性能十分有限,或是其生物相容性还未经证明。/pp style="text-indent: 2em "此次,美国退伍军人事务部研究人员佩吉· 福克斯、斯坦福大学鲍哲南及他们的同事,报告了一种由完全生物可相容材料构成的、可伸展、可生物降解的应变及压力传感器。这一可移植传感器具有高灵敏度,能够区分小到0.4%的应变和12Pa的压力(一粒盐产生的压力)变化。/pp style="text-indent: 2em "为了测试该传感器的生物相容性,研究团队将其移植进一只大鼠的背部。在移植手术8周后,未观察到负面炎症反应(除了第1周出现初期炎症反应)。/pp style="text-indent: 2em "研究人员表示,他们能够控制传感器的降解,使其寿命与组织愈合所需的时长一致。此外,经过一定的设计,在降解过程中,该传感器的灵敏度也不会有明显下降。/pp style="text-indent: 2em "针管有一次性的,医疗电子仪器也可以有一次性的。可降解的生物传感器一旦进入实用,我们就可以将很多临床定性描述转为量化指标,病人的恢复快慢可显示在屏幕上,痛觉程度也不再模糊。医生的工作将因此大大便利。/p
  • 包装袋吸吸袋牛奶袋包装耐压试验机的压板尺寸、量程的技术讲解
    包装袋,特别是用于液体食品如牛奶的吸吸袋包装,需要具备一定的耐压性能以保证在运输和储存过程中的完整性。耐压试验机是用来测试这类包装材料耐压强度的设备,其压板尺寸和量程是影响测试结果准确性的重要因素。压板尺寸压板尺寸指的是耐压试验机上用于施加压力的平板的面积大小。压板尺寸的选择应基于以下几个考虑:样品尺寸:压板尺寸应足够大,以覆盖整个包装袋样品,确保均匀施加压力。测试标准:不同的测试标准可能对压板尺寸有具体要求,应遵循相应的行业标准或国家标准。压力分布:较大的压板可以更均匀地分布压力,减少测试过程中的局部应力集中。量程量程指的是耐压试验机能够施加的压力范围。选择合适的量程对于确保测试的准确性和有效性至关重要:最大压力:量程的最大值应高于预期的包装材料耐压强度,以确保可以测试到材料的极限。压力分辨率:量程的分辨率决定了压力测量的精度,高分辨率有助于获取更精确的测试数据。测试需求:不同的包装材料可能有不同的耐压要求,选择的量程应满足这些需求。技术讲解均匀压力分布:耐压试验机的压板设计应确保在测试过程中压力均匀分布,避免因压力不均导致的测试误差。压板材质:压板的材质需要坚硬且均匀,以保证在施加压力时不会发生形变,影响测试结果。传感器精度:试验机中的压力传感器需要具有高精度和高稳定性,以确保测量结果的准确性。测试速度控制:耐压试验机应能够控制施加压力的速度,以模拟实际使用中可能遇到的不同条件。数据记录与分析:现代耐压试验机通常配备有数据记录和分析软件,可以自动记录测试过程中的压力变化,并分析得出耐压强度。结论选择合适的耐压试验机,特别是压板尺寸和量程,对于准确地评估包装袋如牛奶吸吸袋的耐压性能至关重要。通过精确控制测试条件和详细记录测试数据,可以有效确保包装材料的质量和安全性,满足消费者和法规的要求。随着技术的发展,耐压试验机也在不断升级,以适应更广泛的测试需求和提供更精确的测试结果。
  • 塑料生物降解测试用样品该如何制备
    在塑料生物降解测试中,对于塑料材料原料或制品的前处理制样是一个非常重要的步骤,但也一直是广大测试人员最头疼的问题之一。由于塑料材料普遍具有较低的软化温度、较高的粘度,对于样品的研磨、剪切都造成了极大的障碍。塑料材料原料或制品通常主要以粉末、颗粒、薄膜、片材、空心管状、块状等几种形态呈现。在降解测试中,为了确保样品能够以最大的接触面积充分接触接种物底物,使微生物和所分泌的各种不同解聚酶容易进攻塑料材料,我们一般都会将塑料样品处理成更细小的颗粒或更薄的片材。常见生物降解标准所要求样品形态(参考GB/T 38787-2020《塑料 材料生物分解试验用样品制备方法》)其中:(1)对于吸管类制品,一般需将其剖开,并剪成不大于2 cm的片状材料。(2)对于非薄膜、非粉末状样品,一般参考GB/T 38787-2020《塑料 材料生物分解试验用样品制备方法》,采用干冰或液氮冷却并机械研磨制成粉料。(3)对于要求采用薄膜样品的方法,需采用平板硫化机将塑料颗粒热压成约几十μm的薄膜,再按照要求进行裁片。湖北洛克泰克是国内少有的通过完全自主研发,提供材料生物降解测试仪器和服务全解决方案的供应商。我们为广大不同需求的客户提供RTK PBDA塑料生物降解分析仪、RTK PBD 全自动塑料崩解分析仪、RTK CRM密闭呼吸计、RTK BMP全自动甲烷潜力测试系统、RTK-BRE微生物降解呼吸仪等产品,可适用于各类塑料生物降解性能评估标准方法的测试。湖北洛克泰克仪器股份有限公司成立于2013年,是国家级高新技术企业(证书编号GR202042003741),拥有包括生物降解领域的近30余项专利证书(含发明专利)。为中国农业大学厌氧发酵联合实验室、华中农业大学产学研合作基地。作为中国科学测试仪器研究型制造商,洛克泰克努力为全球客户提供专业的科学测试仪器、测试方法、培训及技术服务。洛克泰克秉承“技术推动科学进步”的使命,致力于我国的“碳达峰、碳中和”目标,为政府、大学、研究机构及企业提供服务,实现更健康、更安全、更环保的高质量发展。欢迎垂询!
  • 线上课堂:二次供水相关方案讲解
    线上课堂:二次供水相关方案讲解哈希公司夏日炎炎,少年们在高考考场上奋笔疾书,奔向大好前程;而哈希线上课堂也将知识带到您的身边,足不出户就能学习。 本期,哈希专家将为各位讲解二次供水的相关方案,并与大家分享自己的技术经验与心得体会。想要多多了解最新干货,就快戳最后的阅读原文,报名上课吧!天堂伞、蓝牙音箱、乐扣保温杯无限光电鼠标、胸包/斜挎包等直播抽奖主题:二次供水相关方案讲解参加费用: 免费参加方法: 文章底部点击阅读原文报名开始时间: 2020年7月15日星期三 下午14:00 报名成功后,我们将在会议开始前发给您参会链接,电脑、手机均可在线观看。不要犹豫,点击下方阅读原文,报名参与吧。END
  • 浅谈限塑令下的生物降解标准和仪器设备
    一、政策背景2020年1月16日,《国家发展改革委、生态环境部关于进一步加强塑料污染治理的意见》正式公布,塑料是重要的基础材料,在社会生产和居民生活中应用广泛。不规范生产、使用、处置塑料会造成资源能源浪费,带来生态环境污染,甚至会影响群众健康安全。中国党中央、国务院高度重视塑料污染问题,将塑料污染治理作为生态文明建设和实现高质量发展的重要内容加以推动;中央全面深化改革委员会将制定“白色污染”综合治理方案列为重点改革任务。随后,北京、上海、浙江、海南、广东、山东等各省市都出台了相关的政策法规,进一步加强塑料污染治理的意见。 二、塑料降解的标准:塑料的降解,一般从4个方面进行评估:(1)分解能力:最终的碎片化堆肥-这是通过以下方式进行的试验堆肥测试(EN 14045标准):测试材料的标本与生物废物堆肥了3个月。 在这段时间之后,测试材料残留物的质量必须小于原始质量的10%。(2)生物降解性:即可堆肥材料的能力在微生物的作用下被转化为二氧化碳。该标准包含必须在不到6个月时间内达到至少90%的生物降解的强制性阈值(实验室测试方法EN14046)。(3)生物相容性:堆肥残留物不能对生物成长过程造成负面影响。(4)重金属含量:在规定范围内,且不得对生物产生毒理作用。 三、生物降解性标准:围绕塑料降解的第2个要点,也就是生物降解性,目前常用于塑料生物降解的相关标准有:(1) GB/T 19277.1-2011(等同ISO 14855-1:2005)受控堆肥条件下材料最终需氧生物分解和崩解能力的测定 采用测定释放的二氧化碳的方法 第1部分 通用方法(2) GB/T 19277.2-2013(等同ISO 14855-2:2007)受控堆肥条件下材料最终需氧生物分解能力的测定 采用测定释放的二氧化碳的方法 第2部分:用重量分析法测定实验室条件下二氧化碳的释放量 通用方法(3) ASTM D 5338 堆肥条件下塑料材料的好氧性生物降解试验方法(4) EN 13432 包装.通过合成及生物降解评定包装可回收性的要求 四、RTK-PBD塑料生物降解仪RTK公司推出满足GB/T 19277.1-2011和GB/T 19277.2-2013标准的塑料生物降解仪,二者区别如下:标准GB/T 19277.1(2011)GB/T 19277.2(2013)反应器数目每组3个每组2个反应器容积至少2 L,建议3 L500 mLCO2测量原理气相色谱或气体分析仪连续测量;碱液吸收固定后,手动滴定或者TOC测定天平称重 RTK公司是国家高新技术企业。RTK公司自主研发生产RTK-PBD塑料生物降解仪可用于塑料的生物降解性评估,另提供各类实验室生物发酵反应器(如CSTR反应器、UASB反应器、IC反应器、干法车库式反应器等)及其它定制服务。欢迎大家垂询!
  • 【云唐仪器知识讲解】农药残留快速检测仪如何修改数据以及放置比色皿
    【云唐仪器知识讲解】农药残留快速检测仪如何修改数据以及放置比色皿农药残留快速检测仪的数据修改方法可能因仪器品牌和型号而有所不同,但通常可以按照以下步骤进行:进入设置页面:找到仪器上的菜单键或设置选项,点击进入设置页面。选择数据修改选项:在设置页面中,寻找并选择数据修改选项。修改数据:在数据修改选项中,选择需要修改的数据项,并进行修改。修改时需注意区分大小写,并确保数据的真实性和准确性。保存修改:完成数据修改后,点击保存选项以保存修改结果。退出设置:退出设置页面,回到主界面或正常使用状态。至于如何放置比色皿,以下提供一种通用方法供参考:准备比色皿:选择适当规格的比色皿,确保其干净、无划痕、无残留物。放置比色皿:将比色皿放置在仪器的比色皿槽中,确保其平稳、无倾斜。调整位置:根据仪器说明说调整比色皿的位置,确保其与检测光路对齐。关闭盖子:如有盖子,关闭仪器盖子,确保其紧固、无漏光。【云唐提醒】请注意,具体操作步骤可能会因仪器品牌和型号的不同而有所差异。建议在使用农药残留快速检测仪时,仔细阅读仪器说明书,了解正确的操作步骤和注意事项,以确保数据的准确性和可靠性。
  • 睿科仪器2013年全自动固相萃取仪用户培训班顺利结束
    2013年9月26日至27日,睿科仪器在其培训中心举办了Auto SPE系列全自动固相萃取仪用户培训班。培训的目的在于让用户熟熟悉并掌握全自动固相萃取仪的使用及维护保养,了解水质分析中数据质量控制的关键点,让大家在工作中更加得心应手。 培训期间,睿科仪器的产品经理、应用经理、售后经理等分别向参加培训班的各位用户做了固相萃取基础知识,Auto SPE全自动固相萃取仪的硬件和软件,固相萃取技术在水质分析中的应用(介绍GB5749-2006 和GB3838-2002 所涉及的检测方法及其注意事项),水质分析中数据的质量控制(仪器质控、前处理数据质控),硬件的基本维护等各类课程的讲解。 除去常规讲解课程,还有现场的互动环节,如SOVC的演示(包括软件使用的参数设定注意事项、仪器特殊功能的实现、仪器的操作注意事项等),用户亲手对现场一台演示仪器进行简单的检查及维护。 通过此次培训,用户对Auto SPE系列全自动固相萃取仪有了更加深入的了解及认识,解决了用户在实际操作过程中可能碰到的实际情况,睿科仪器也了解了用户宝贵的意见和建议,为打造更加满足用户需求的产品奠定了坚实的基础。 至此,睿科仪器2013年全自动固相萃取仪用户培训班已顺利全部结束。通过今年共4期的培训,用户对培训的效果深感满意,纷纷表示愿意继续参加此类培训,这也是对睿科仪器的肯定与鼓励。我们深知,睿科仪器的产品能够迅速占领市场,离不开广大用户对我们的支持与信任,我们将一如既往地以先进的科技、优良的性价比以及完善的售后服务竭诚为广大用户服务。
  • 核酸降解知多少
    导语在实验过程中,最心累的莫过于好不容易提取的核酸却降解了。那么核酸为什么会发生降解呢,我们又该如何预防呢?关于核酸降解,你了解多少呢?让我们一起对核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸 核酸是一种高分子化合物,核苷酸是构成核酸的基本单位。核酸水解后得到许多核苷酸,核苷酸是组成核酸的基本单位,即组成核酸分子的单体。一个核苷酸分子是由一分子含氮的碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸组成的。根据五碳糖的不同可以将核苷酸分为脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。如果5-碳糖是核糖,则形成的聚合物是RNA;如果5-碳糖是脱氧核糖,则形成的聚合物是DNA。 核酸降解本质 核酸降解是DNA/RNA分子中的碱基和戊糖间的氮糖苷键,或磷酸二酯键在物理因素、化学因素和生物因素等作用下发生水解,使DNA/RNA链发生断裂。核苷磷酸化酶:能分解核苷生成含氨碱基和戊糖的磷酸酯酶。广泛存在于生物体内,催化的反应可逆。可在核苷水解酶作用下继续分解核苷成嘌呤碱、嘧啶碱和戊糖。核苷水解酶:主要存在于植物和微生物体内,只水解核糖核苷。 核酸降解原因 DNA降解的因素很多,主要分为物理因素,化学因素和生物因素。一、物理因素:温度,机械剪切力、核酸的反复冻融、高温煮沸及辐射等。二、化学因素:PH值,水解反应,氧化反应等。三、生物因素:酶解及微生物侵染等作用。一、物理因素的影响★ 温度:高温条件下,RNA不稳定,易加速磷酸二酯键的水解,使核酸降解;★ 机械剪切力:包括剧烈震荡、搅拌、细胞突然至于低渗溶液中,以及让溶液快速通过狭长的孔道;★ 核酸的反复冻融、高温煮沸及辐射等,均会导致核酸的降解。二、化学因素影响水解★ PH值:氢离子参与催化磷酸二酯键、糖苷键的水解,但糖苷键比磷酸二酯键更易被酸水解。过高或过低的PH值都易破坏复键。核酸(特别是RNA)在碱性溶液中十分容易降解;★ 氧化反应:会氧化碱基中的含氨杂环,使其变性,从而改变一级与二级的核酸构象;★ 苯酚在空气中被氧化生成醌,它能够产生自由基,直接用于DNA的分离,会使磷酸酯键断裂,造成DNA的降解。三、生物因素影响★ 酶解:核酸酶可以催化水解多聚核苷酸链中的磷酸二酯键,直接破坏核酸的一级结构,使其降解。1.核酸酶(磷酸二酯酶)核酸内切酶:在环境或生物体内具有识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链的核酸内切酶统称为限制性核酸内切酶。作用方式从多聚核苷酸链中间开始,在某一个位点切断磷酸二酯键。如DNase,RNase等。核酸外切酶:核酸外切酶的作用方式是从多聚核苷酸链的一端(3' -端或5' -端)开始,逐个水解切除核苷酸。如蛇毒磷酸二酯酶,牛脾磷酸二酯酶等。2.核苷酸酶(磷酸单酯酶)专一性的磷酸单酯酶:3' -核苷酸酶,5' -核苷酸酶非专一性磷酸单酯酶。★ 微生物侵染:微生物会将DNA作为营养物质或是其分泌的化学物质含酶。 预防降解的方法 预防RNA降解的方法:★ 去除环境中RNase酶的污染或强有力地抑制其活性。★ 获取样品后最好立即提取RNA,若无条件立即实验,应于-80℃液氮中保存样品,提取时取出样品后立即在低温下研磨裂解细胞,以防RNA降解。★ 在总RNA提取分离的最初阶段,联合使用Rnase的特异抑制剂,尽可能的灭活胞内的Rnase的活性。★ 避免样品的反复冻融。★ 保证裂解液的质量,裂解液的用量不足,也会导致RNA降解。★ RNA提取后,放入-80℃保存,防止降解。预防DNA降解的方法:★ 简化操作步骤,缩短提取过程,以减少各种有害因素对核酸的破坏;★ 减少化学物质对DNA的降解,为避免过酸、过碱对DNA双链中磷酸二酯键的破坏;★ 防止基因组DNA的生物降解,主要是DNase降解基因组DNA,Dnase需要二价金属阳离子Mg2+等的激活,可用EDTA等金属离子整合剂整合Mg2+以抑制Dnase的活性;★ 减少物理因素对DNA的降解,物理降解因素主要包括机械剪切力(如剧烈震荡、搅拌等);★ 避免样品的反复冻融,可将DNA分装保存于缓存液中;★ 所有试剂应用无菌水配制,耗材经高温灭菌;★ 避免DNA的过高温处理等。
  • 专家讲解:“双碳”对石化行业产生了怎样的影响?
    “双碳”概念的提出,对石化行业产生了哪些影响,又将如何发展?炼化行业何去何从?数字化、智能化层出不穷,具体发展到了何种阶段?仪器信息网邀请了行业内多位专家讲解“双碳”目标下石化行业的新发展。5月31日上午8:30,不见不散!(点击图片即可直达报名链接)以下为报告简介:报告题目:“双碳”目标下化工行业高质量发展路径(点击报名)报告摘要:通过对我国能源消费与碳排放,特别是化工行业能源消费与碳排放特征及驱动因素的分析,揭示化工行业碳排放的主要问题与成因;基于“双碳”目标的要求及技术创新方向,提出化工行业高质量发展的路径。报告题目:“双碳”背景下的炼化行业发展路径探析(点击报名)报告摘要:基于石化行业碳排放现状,对行业碳减排面临的压力进行分析。在深入分析炼厂碳排放源及排放量的基础上,提出炼油行业分阶段的碳减排路径策略。报告题目:浅析石化化工行业高质量发展之数字化转型(点击报名)报告摘要:《“十四五”原材料工业发展规划》、《石油和化工行业“十四五”科技发展指南》和《关于“十四五”推动石化化工行业高质量发展的指导意见》等,都为石化化工行业的数字化转型提出了具体了要求,结合行业数字化发展的现状,本报告将重点介绍行业数字化转型的方向,重点任务等,共同推进行业数字化转型良好生态的建设。报告题目:石化企业低碳转型路径与措施浅析(点击报名)报告摘要:报告将从国家有关政策要求和国际碳税、碳关税相关情况;石化企业碳排放的构成和主要核算方法;以及石化企业减少碳排放路径及主要措施三个方面分开进行介绍!
  • 鲜少人知!岛津自动进样器清洗液还能这么用!
    背景介绍各位朋友看到这个标题,可能不想再往下看具体内容了,请给我一首歌的时间,我们这一次展开讲解的不是清洗液的清洗功能,而是另一个功能,也可能是您平时没有了解过的。无论是岛津的分体机高效液相色谱仪,像LC-16、LC-20ADXR、LC-30AD、LC-40等,或者是一体机LC-2030 Plus、LC-2050等,其自动进样器都是配置了清洗液,它的储液瓶跟流动相的储液瓶都放在托盘上。图示:LC-2050储液托盘放置的5种液体功能一进样器清洗液的清洗自动进样器清洗液,液如其名,必然是清洗自动进样器的部件,具体是清洗它的进样针。当进样器利用进样针吸取样品瓶的(液体)样品时,进样针的外表面会有残留,而自动进样器内置了一个清洗池(在样品盘旁边),成为了以浸泡方式清洗进样针的场所。清洗池里面的液体,是从清洗液储液瓶上自动吸取的,当清洗完进样针外壁后,被污染的清洗池会进行自动更新液体,以保证下一次的清洗不被污染。如何选择清洗液,可以参考使用说明书,这里不展开说明。功能二充满计量流路清洗液充满计量流路有什么作用?保证了每一次的吸样体积准确性。当计量流路充满液体时:在吸样的过程,计量泵、高压阀、样品环、进样针、样品瓶液体是处于同一流路,样品在计量泵的抽吸下,进入进样针和样品环管路。吸样的体积与计量泵的冲程收缩的程度有关,仪器便是通过调整计量泵活塞的收缩距离去决定吸多大的样品体积。当清洗液跑空时:计量流路充满了空气,同样的计量泵活塞收缩距离下,产生的真空度偏低(与充满清洗液的情况相比),所以大气压把样品液体压到进样针、样品环的量比设定值减少,出现响应偏低的现象。值得注意的是,由于接下来的每一针计量流路里面空气的压力比上一针的空气压力不一致,导致了同样的计量泵活塞收缩距离下,产生的真空度偏也不一样,出现峰面积重现性差的现象。上述的现象类似于化工行业的“气缚”现象,当水泵充满气体时不能抽水。因此,在做进样分析前,必须确认清洗液的量充足。到这不得不提另个有关的现象:当脱气机不再正常工作时,进样峰面积重现性也变差了。为什么清洗液需要在线脱气?在吸样动作里计量泵活塞的收缩,会让计量泵短期内产生负压,溶解在清洗液里面的气体由于压强降低溶解度的降低而释放出来,存在于计量流路,有气体的存在导致吸样体积偏低,而且峰面积重现性不良。上述负压的存在,释放溶解了的气体,这种现象类似于化工行业的“气蚀”现象。当水泵抽水管偏小的时候,容易产生气泡。因此,在做进样分析前,必须确认脱气机正常启动,保证清洗液能被脱气机在线脱气。到这里,以上是今天的内容讲解内容,关注我们的微信公众号和小程序,欢迎提问及日常使用交流。
  • 固有生物降解仪OM3100A在上海交大顺利验收
    近日,托摩根工程师为上海交大的师生系统培训了OM3100A各项功能及操作流程、并进行了试样制作、安装培训,软件使用培训。OM3100在上海交大布局OM3100A是在世界范围内广泛使用的一款固有生物降解仪,满足国际标准OECD301C、OECD302C,以及国家标准GB/T21218-2008、GB/T21802-2008,具有绝对的权威性。本仪器主要用于固有生物降解试验、快速生物降解试验、模拟污水净化处理、能够自动化和定量化地测定有毒有害物质及化工、农业等环境污染物生化需氧量。 图为OM3100A工作状态托摩根为上海交大师生安排了基本理论、仪器介绍、试验演示及注意事项等一系列培训,保证了用户在较短时间内掌握设备的操作要领,尽快开展科研活动。 托摩根市场部 2014-01-02
  • 岛津提高电子电器安全与RoHS法规讲解研讨会
    欧盟于2009年提出对RoHS指令的修改草案。这一草案经过各成员国近三年的协商、讨论和修改,在2011年6月由欧洲议会、欧盟理事会、欧盟委员会共同批准发布。它要求欧盟各成员国必须在18个月内将RoHS指令转化成本国法律并实施。新版RoHS指令将在2013年1月正式生效。 2011年国家认监委、工业和信息化部共同确定并发布了《国家统一推行的电子信息污染控制自愿性认证实施规则》和《国家统一推行的电子信息产品污染控制自愿性认证目录(第一批)》。国家统一推行的电子信息污染控制自愿性认证已于2012年7月1日起正式实施。 岛津公司紧跟行业发展变化,从欧盟RoHS发布起就不断开发应对电子电气中有害物质测定技术。为支持西部电子产业的发展,岛津公司于2012年在成都成立了全国第五个分析中心,并于2013年5月8日四川成都举办了《提高电子电气安全与RoHS法规讲解研讨会》。本次会议主讲老师为岛津RoHS首席专家、中国SAC/TC297/SC3委员会委员于晓林老师;岛津大型分析仪器事业部小仓一郎事业部部长,NDI仪器部门八岛部长等出席会议。小仓事业部长向到会嘉宾致词。本次会议到会单位包括:富士康、四川质检、成都质检、成都海信,长虹电器,成都纬创资通等42家企事业单位,到会嘉宾70人。通过这次培训,参会嘉宾纷纷表示收获很大,对他们以后的工作起来了很大的帮助,更有嘉宾提出希望以后为他们做更多的类似的培训。 会议现场展示了岛津新品能量射散型X荧光光谱仪EDX-LE与X射线透视仪SMX-800,在互动环节中,现场嘉宾亲手操作感受了岛津仪器为用户带来的方便性与高效性。 会议现场 大型分析仪器事业部 小仓事业部长致辞
  • Easy选型直播节目|第41期:全自动凯氏定氮仪仪器选型
    仪器信息网讯 全自动凯氏定氮仪是一种根据凯氏定氮原理,自动分析样品中氮含量的仪器。它主要由消解、蒸馏和滴定装置组成,可以自动化完成样品消解、蒸馏分离、滴定计算、结果存储和打印等操作。全自动凯氏定氮仪的应用范围广泛,不仅可以用于食品、饲料、饮用水、农产品、肉类等食品领域的产品质量控制和产品检验,还可以用于环境、医药、化工、化妆品等领域。近年来,全自动凯氏定氮仪市场呈现出稳步增长的态势。技术发展趋势也涉及多个方面,包括高精度、高灵敏度、自动化、智能化、多功能化、绿色环保等。这些技术的发展将为全自动凯氏定氮仪的应用提供更广阔的前景和更高的效率。为帮助380万+用户解决选型的痛点和困惑,仪器信息网特开设“Easy选型”直播节目,从选型原则、技术进展、行业标准、市场表现、用户口碑、使用反馈、应用支持、售后服务、案例分享等多个维度,为用户了解技术采购带来一些实用经验。6月21日,仪器信息网将启动第41期“全自动凯氏定氮仪”选型直播, 届时将邀请领域专家与仪器厂商畅谈选型经验,与直播间网友进行互动,欢迎报名预约。扫码预约观看直播直播日程日期日程邀请嘉宾14:00-15:15专家对话和互动答疑1、凯氏定氮仪技术发展历程2、全自动凯氏定氮仪研发及应用趋势3、全自动凯氏定氮仪选型注意事项4、直播间互动答疑专家团队嘉宾1:汪洪 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所土壤肥料测试中心主任嘉宾2:王梦洁 海能技术有机元素产品经理主持人:康鹏程 仪器信息网编辑15:15--15:20直播间互动抽奖15:20--16:00凯氏定氮仪选型指南王梦洁 海能技术有机元素产品经理现场真机展示用户互动答疑16:00--16:10抽奖及结束语报告嘉宾简介汪洪 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所土壤肥料测试中心主任。担任中国植物营养与肥料学会测试技术专业委员会主任;农业农村部肥料登记评审委员会专家委员;全国肥料和土壤调理剂标准化技术委员会磷复肥分技术委员会专家委员;国家市场监督管理总局全国缺陷消费品召回专家;第三次全国土壤普查专家技术指导组内业技术组副组长;中国合格评定国家认可委员会(CNAS)实验室认可制度评审员。主持完成农业行业标准项目、国家重点研发计划项目课题、国家自然科学基金项目、北京市自然科学基金项目等;参加国家重点基础研究发展计划(973)课题、国家科技支撑计划课题、国家高技术研究发展计划(863)课题等。在国内外学术刊物上发表论文80多篇;主持和参与起草农业行业标准7项。王梦洁,海能技术有机元素产品经理,长期以来从事食品、环境、制药等领域中应用技术及方法开发,在日常工作中积累大量理化检测相关经验。6月21日下午2点,专家坐镇直播间,分享案例,讲解经验,还有多种精美礼品赠送。仪器信息网视频号,扫码一键预约
  • 【点滴缩影】睿科仪器成功举办2017年Fotector系列全自动固相萃取仪培训班
    暖冬的鹭岛,风和日丽,11月30日-12月1日,来自检验检测中心、公安刑侦、环境科学研究院、商检、疾控等领域的全国各地客户朋友们,汇聚一堂,参加睿科仪器举办的“2017年睿科仪器Fotector系列全自动固相萃取仪培训班”。此次培训为期2天,培训课程主要是由睿科仪器的应用工程师、售后工程师及产品经理们为大家讲授,培训内容包括Fotector系列固相萃取基础知识,介绍了固相萃取技术在食品分析中的应用,深入浅出的讲解了该仪器的原理、特点、优势,软硬件操作和在食品分析中数据的质量控制等,仔细地为在座的各位与会老师们答疑解惑。现场还展出有睿科仪器其他的产品线——全自动固相萃取仪、全自动均质器、全自动浓缩仪、全自动石墨消解仪、全自动液体样品处理工作站等,自动化前处理设备将大幅度减少样品前处理时间,降低实验人员的劳动强度,提高前处理效率,为大批量前处理实验带来福音。此次培训安排了仪器的维护保养实操演示课程,针对该仪器的使用、注意事项、维护及保养进行讲解,为期两天的内容充实饱满。在理论与实际的结合当中,掌握仪器维护保养要点,同时也提升了对睿科仪器及其产品的了解度。回顾培训期间的点点滴滴,大家收获的不只是专业知识和设备操作技能,更多的是来自五湖四海的深刻友谊。是各位客户朋友们的支持才有了睿科仪器如今的辉煌成绩,也是睿科仪器给客户之间搭建了一个良好的交流与沟通的平台。正因有他们的一路相陪,睿科仪器才能一路发展前行,睿科仪器客户培训班才能不断开拓创新,越办越好!
  • 睿科仪器成功举办2013年Fotector系列全自动固相萃取仪用户培训班
    2013年6月27日至28日,睿科仪器在其应用技术支持及培训中心举办了Fotector系列全自动固相萃取仪用户培训班。培训的目的在于让用户熟悉并掌握Fotector系列全自动固相萃取仪的使用及维护保养,了解食品分析中数据质量控制的关键点,让用户在工作中更加得心应手。 培训期间,睿科仪器的产品经理、应用经理、售后经理等分别向参加培训班的各位用户做了固相萃取基础知识,Fotector全自动固相萃取仪的硬件和软件,固相萃取技术在食品分析中的应用,实际数据分析结果,硬件的基本维护等各类课程的讲解。 除去常规讲解课程,还有现场的互动环节,如演示了食品分析方法(包括软件使用的参数设定注意事项、仪器特殊功能的实现、仪器的操作注意事项等),用户亲手对现场一台演示仪器进行简单的检查及维护,与研发及设计总监深入探讨仪器的使用体验等。 通过此次培训,用户对Fotector系列全自动固相萃取仪有了更加深入的了解及认识,解决了用户在实际操作过程中可能碰到的实际情况,睿科仪器也了解了用户宝贵的意见和建议,为打造更加满足用户需求的产品奠定了坚实的基础。 培训结束后,各位用户对此次培训的效果深感满意,纷纷表示愿意继续参加此类培训,这也是对睿科仪器的肯定与鼓励。我们深知,睿科仪器的产品能够迅速占领市场,离不开广大用户对我们的支持与信任,我们将一如既往地以先进的科技、优良的性价比以及完善的售后服务竭诚为广大用户服务。培训合影
  • 洛克泰克(RTK)推出密闭呼吸计用于塑料生物降解需氧量检测
    湖北洛克泰克仪器股份有限公司(RTK)又发布新产品啦!RTK CRM-18密闭呼吸计是一款专门针对密闭呼吸计相关测试标准的、多通道的材料生物降解性能测试设备。该设备广泛适用于以液态或固态培养基作为降解环境,采用超微量气体流量测定(GMC)专利技术,可在密闭试验系统中直接测定需氧量。本产品主要应用于材料降解标准测试,是国家标准认可和指定的标准测试装置:同时,本产品也广泛应用于其他降解环境以及微生物学、水质、环境保护领域的测试和研究。本产品具有产品特点:(1) 18通道高通量设计,适合多组平行试验,提高效率。(2) 全实验周期,软件WEB服务器跨平台操作,可实现远程控制。(3) 模块化设计,方便更换和升级不同模块,适应不同标准测试。(4) 可高达1.0 mL测量精度。(5) 软件自动化控制、采集数据、绘图等,省时省力。(6) 即可采用机械搅拌,也能采用磁力搅拌,方式灵活。(7) 断电数据保存,电源再次启动后自动测试。(8) 可适用不同试验或检测目的,也可用于多种科学研究领域测试。(9) 设置有尾气吸收装置,可以通过环评。 湖北洛克泰克仪器股份有限公司(RTK)是国家高新技术企业(证书编号GR202042003741)。我司自主研发生产的塑料崩解仪,严格按照国家标准,可用于在定义堆肥化中试条件下测试塑料材料崩解程度。另外,我司还自主研发生产RTK PBDA塑料生物降解分析仪、RTK PBD 全自动塑料崩解分析仪、RTK CRM密闭呼吸计、RTK BMP全自动甲烷潜力测试系统、RTK-BRE微生物降解呼吸仪等产品,可用于各类塑料生物降解性能评估标准方法,欢迎垂询!
  • 使用ReacSight增强生物反应器阵列以实现自动测量和反应控制(下)
    本篇承接上文。《使用ReacSight增强生物反应器阵列以实现自动测量和反应控制(上)》(点击查看)。《使用ReacSight增强生物反应器阵列以实现自动测量和反应控制(中)》(点击查看)。2.4 探索营养缺乏对健康和细胞压力的影响荧光蛋白可以作为报告物来评估细胞的表型特征,也可以作为条形码来标记具有特定基因型的菌株。再加上生物反应器阵列的自动细胞仪,这种能力扩展了可能的实验范围:在动态控制环境中的多重菌株特性和竞争(图 4a)。事实上,一些荧光蛋白可用于基因分型,其他可用于表型分型。然后,自动细胞仪(包括原始数据分析)将提供关于不同菌株之间竞争动态和每个菌株的细胞状态分布动态的定量信息。根据实验的目标,这些丰富的信息可以反馈给实验控制,以适应每个反应器的环境参数。作为可以进行此类实验的概念的第一个证明,作者开始探索营养缺乏对健康和细胞压力的影响(图 4b,左上角)。微生物群落中的不同物种根据其代谢多样性或专业性有不同的营养需求,因此它们的适合性不仅取决于外部环境因素,还取决于群落本身通过营养物质消耗、代谢物释放和其他细胞间耦合。与分批竞争分析相反,连续培养允许控制这些因素。例如,在恒浊器培养基中,营养素的可用性取决于营养素供应(即输入介质中的营养素水平)和细胞的营养素消耗(主要取决于 OD 设定值)。作者使用组氨酸营养不良作为营养缺乏的模型:对于 his3 突变细胞,组氨酸是一种必需的营养素。通过将 his3 突变细胞与野生型细胞在不同 OD 设定值和喂养介质中不同组氨酸浓度下进行竞争,可以测量营养缺乏如何影响适应性(图 4b,右上角)。在这两个菌株中使用应激报告子也可以了解营养缺乏情况下适应性和细胞压力之间的关系。作者将重点放在未折叠蛋白反应 (UPR)应激上,以研究营养应激是否会导致其他事先无关的应激类型,这将表明细胞生理学中的全局耦合。组氨酸浓度为 4µM 时,在考虑的 OD 设定值(0.1-0.8)范围内,his3 突变细胞被野生型细胞强烈竞争(图 4b,左下角)。当浓度为 20µM 时,情况不再如此。在这种浓度下,野生型细胞的生长速度优势在 OD 设定值 0.6 以下接近零(剩余组氨酸足以使 his3 突变细胞正常生长),在最大 OD 设定点 0.8 时超过 0.2 h −1(剩余组胺过低,限制了 his3 突变体细胞的生长)。因此,对于这种营养供应水平,细胞的营养消耗水平对 his3 突变细胞的适应性有很大影响。4µM 到 20µM 之间 的这种定性变化与组氨酸的单个高亲和力转运体 HIP1 的 Km 常数报告值 17µM 高度一致。此外,因为组氨酸浓度为 4µM 的野生型和突变型细胞之间的生长速度差异接近甚至超过野生型细胞通常观察到的生长速度(在 0.3 到 0.45 h −1之间, 取决于 OD 设定值),作者得出结论,突变细胞在这些条件下完全生长。UPR 数据显示,在组氨酸浓度为 20µM 的所有 OD 设定点上,突变细胞和野生型细胞之间几乎没有差异,但在组氨酸含量为 4µM 时,突变细胞中的 UPR 反应明显激活 (图 4b,右下角)。因此,看似相似的生长表型(例如 4 和 20µM OD 为 0.8 的突 变细胞)可能对应于不同的生理状态(如不饱和蛋白反应应激水平的差异所揭示的)。此外,为了展示基于菌株丰度数据的环境反应控制,作者着手动态控制两个菌株的比率。控制微生物培养物的组成和异质性有望实现更有效的生物加工策略。作者推断,当两种菌株中的一种对组氨酸具有营养缺陷时,培养物的 OD 可以用作方向盘。事实上,组氨酸生物合成突变生长速率在 20µM 的中等组氨酸浓度下对 OD 的强烈依赖性(图 4b,左下角)意味着可以通过切换恒浊器培养物的 OD 设定值来动态控制其生长速率。此外,如果这种菌株与组氨酸原营养菌菌株共同培养,但以 OD 独立的方式生长较慢,则可以实现两种菌株比率的双向控制(图 4c,左)。作者利用繁重的异源蛋白分泌构建了这种菌株。然后,作者构建了一个简单的模型来预测组氨酸营养不良菌株的(稳态)生长速率差异。将此模型用于模型预测控制和 ReacSight 事件系统,作者可以以完全自动化的方式在平行生物反应器(图 4c,右)中保持两种菌株的不同比率。然而,作者注意到稳态误差的系统存在。这种行为可能是由于慢菌株的生长速度意外恢复所致。由于在特征化实验中未观察到这种行为,作者假设这种差异是由于特征化或对照实验中使用的氨基酸供应混合物的组成不同(除了组氨酸外,Sigma 的组氨酸缺失补充物比 Formedium 的完整补充物更丰富)。图 4 探索和利用适应性、营养缺乏和细胞应激之间的关系。a 由于共培养、自动细胞仪和反应性实验控制,结合单细胞基因分型和表型分型的实验得以实现,以实时适应环境条件。b 左上角:必需营养素的可用性(例如 his3 突变株的组氨酸)取决于环境供应,也取决于通过营养素消耗的细胞密度。营养素供应不足会阻碍生长速度,并可能引发细胞应激。右上角:实验设计。野生型细胞(标记为 mCerulean 组成表达)与 his3 突变细胞共同培养。这两个菌株都含有一个 UPR 应激报告基因 mScarlet-I 的驱动表达。自动细胞仪能够将单个细胞分配 给其基因型,并监测菌株特异性 UPR 激活。这两种菌株相对数量的动态可以 推断突变细胞和野生型细胞在每种情况下的生长速度差异。左下图:两种不同介质组氨酸浓 度下突变细胞适应度缺陷的细胞密度依赖性。虚线表示野生型增长率对 OD 设定值的近似依赖性。右下角:每种情况下的菌株特异性 UPR 激活。c 左:双应变联合体的原理,其组成可以通过 OD 控制来控制。右:实施和演示。异源难折叠蛋白的分泌被用作营养独立的慢生长表型。使用模型预测控制和 ReacSight 事件系统对 OD 设定值进行动态控制,类似于图 3b (参见方法)。在时间 0 时开始蓝光,并在整个实验期间保持亮起,以诱导慢 his+菌株的慢 生长表型。作者注意到系统存在稳态误差,测得的比率低于目标值。在补充注释 3 中,作者 研究了限制控制性能的机制(慢生长表型的不稳定性、菌株识别错误和模型中未考虑的延 迟),还提供了其他控制实验的结果。源数据作为源数据文件提供。2.5 ReacSight是一种通用策略:通过吸液功能增强平板阅读器为了说明 ReacSight 的通用性,将其作为通过连接实验室设备来生长细胞和 /或测量细胞读数以及吸管机器人来创建实验平台的策略,作者将 Tecan 平板阅读器与 Opentrons 吸管机器人连接起来(图 5a)。移液机器人和驱动读板器的计算机通过 Flask 连接。因为无法访问平板阅读器的 API,所以再次使用了基于 pyautogui 的“点击”控制策略。在第一个应用中,作者使用移液机器人在生长条件下长时间保持细菌细胞数量。更具体地说,大肠杆菌临床分离物在两种不同的培养基(M9 葡萄糖加或不加 casamino 酸)中生长,并存在不同浓度的头孢噻肟(CTX),一种β-内酰胺抗生素。由于β-内酰胺酶的表达,所选菌株对头孢噻肟处理具有耐药性。它对 CTX 的最低抑制浓度为 2 mg/L。当细胞群 OD 的中位数达到目标水平时,介质将按照补偿蒸发的策略更新(图 5b,左)。通过所选策略,作者能够在至少 15 代细胞中 保持 OD 中值接近所选目标(0.05 或 0.1)(图 5b 右图)。有趣的是,作者观察到,当用 1 mg/L 头孢噻肟处理时,细胞在葡萄糖+酪氨酸钠中的抵抗力比单独在葡萄糖中更好。这有些令人惊讶,因为β-内酰胺类抗生素通常对快速生长的细胞有更强的影响。在第二个应用中,作者使用该平台测试了在不同细胞密度下应用第二剂量头孢噻肟的效果。这些实验在概念上非常简单,但其结果很难预测。低浓度头孢噻肟抑制参与细胞分裂的 PBP3 蛋白,从而导致细丝形成,而高浓度头孢噻肟则抑制参与细胞壁维持的 PBP1 蛋白,并导致细菌溶解。由于成丝作用,即使没有细胞分裂,种群生物量在延长的时间内也可能继续呈指数增长。此外,死亡细胞释 放的β-内酰胺酶在环境中降解抗生素。这导致了细胞死亡和抗生素降解之间的时间赛跑,丝状物有助于延迟这一赛跑,同时增加生物量(图 5c 左)。因此,在不同细胞密度下应用第二剂量抗生素的实验有可能启发人们理解不同的作用(图 5c 中间)。当以 5 10−4 的光学密度开始时,单次处理的结果与分离物的 MIC 一 致,因为高于 MIC 的处理会导致生长明显停滞,而低于 MIC 的处理不会(图 5c, “培养基处理”)。还可以观察到,在前一种情况下,生长在数小时后恢复,这是酶介导的抗生素耐受的典型行为。这两个观察结果在使用 16 mg/L CTX 进行第二次处理的情况下仍然有效。有趣的是,当处理后生长停止时,OD 大约是处理时 OD 的 25 倍:12 10−3 ,6 10−2 和 12 10−2,处理时分别为 5 10−4 , 2.5 10−3 和 5 10−3。这表明,生长停止前活细胞对抗生素的降解是有限的,因此,生长停止之前只有有限数量的细胞死亡。因此,对抗生素处理的耐受性使细胞在死亡前的生物量增加了近 25 倍,然后由于酶介导的抗生素降解,使细胞在处理中存活下来,远远 超过其 MIC。还可以观察到,当初始处理为 4 mg/L 时,生长停止和再生之间的延迟相对恒定(~5 小时),与添加的抗生素总量无关(4 或 20 mg/L CTX)。这表明,生长停止后抗生素降解非常有效,延迟主要对应于无法检测到的再生所需的时间,此时活细胞的动态被死亡生物的光密度所掩盖。在作者的条件下,当第一次处理有效(4 或 16 mg/L)时,第二次处理似乎几乎没有效果。需要进行深入研究,以更量化的方式调查这些影响。图 5 基于 ReacSight 的自动化平台组装,实现反应控制和低容量细菌培养物的表征。a 平台 概述。Opentrons OT-2 移液机器人用于提高读板器(Spark、Tecan)的容量。机器人用于在预先定义的 OD 处处理平板读取器中的培养物。b 左:大肠杆菌临床分离物可以通过以 OD 控制的方式更新培养基来维持在生长条件下。必须注意补偿延长时间范围内的蒸发。右图:富培养基中的细胞(葡萄糖+casaminoacids vs 单独葡萄糖)生长更快,但抵抗更好的亚 MIC 抗生素处理。左:由于两种效应的结合,细菌种群可能表现出对处理的恢复力。在单细胞水 平上,细胞可能通过丝状化耐受超过其 MIC 的抗生素浓度。基于纤维的耐受性允许在细胞 死亡之前增加生物量。在种群水平上,抗生素被环境中细胞死亡时释放的酶降解。最终结果 取决于细胞死亡和抗生素降解之间的竞争。中间:这两种效应的各自作用可以通过反复抗生 素处理来研究。右图:大肠杆菌临床分离物在初始 OD 为 5 10−4 时用不同浓度的 CTX(图 例)处理,第二次使用 16 mg/L CTX(红色)或单独使用介质(蓝色),使用用户定义的 OD (2.5 10−3 或 5 10−3 ). 由于仪器限制,OD 读数低于 10−3 个可靠性较差。源数据作为源数据文 件提供。03 讨论作者报道了 ReacSight 的开发,这是一种通过自动测量和反应实验控制来增 强多生物反应器设置的策略。ReacSight 通过允许研究人员将低成本开放硬件仪器(如 eVOLVER、Chi.Bio)和多功能、模块化、可编程移液机器人(如 Opentrons OT-2)与敏感但通常昂贵的独立仪器相结合,构建全自动化平台,大大拓宽了可行实验的范围。作者还证明,ReacSight 可用于增强具有吸液能力的平板阅读器。ReacSight 是通用的,易于部署,应该广泛用于微生物系统生物学和合成生物学社区。正如 Wong 及其同事所指出的,将多生物反应器装置连接到细胞仪进行自动测量,可以实现微生物培养物的单细胞分辨特性。事实上,在微生物系统和合成生物学的背景下,自动化细胞术几年前已经被少数实验室证明,但低吞吐量或依赖昂贵的自动化设备可能会阻碍这项技术的广泛采用。来自连续培养物的自动细胞仪与最近开发的光遗传学系统相结合,变得特别强大,能够对细胞过程进行有针对性、快速和成本效益的控制。作者使用 ReacSight 将两种不同的生物反应器设置(预先存在的自定义设置和最近的 Chi.Bio-optogenetic-ready 生物反应器) 与细胞仪连接起来。这证明了 ReacSight 战略的模块化,而使用 Chi Bio 生物反应器的平台版本说明了其他缺乏现有生物反应器设置的实验室如何能够以较小的时间和财务成本(不包括细胞仪的成本,尽管其价格昂贵,但即使在缺乏自动化的情况下也已经在实验室中广泛使用)构建这样的平台。作者通过以全自动方式并在不同的反应器中并行执行(1)光驱动的基因表达实时控制,展示了该平台的关键能力;(2)在严格控制的环境条件下,基于细胞状态的竞争分析;动态 控制两个菌株之间的比值。然而,作者只触及了这些平台提供的巨大潜在应用空间的表面。最近通过核 糖体移码技术证明,菌株条形码可以扩展到 20 株带有两个荧光团的菌株,甚至可以扩展到 100 株带有三个荧光团。这种多路复用能力对于并行描述各种候选路径的输入-输出响应(或菌株背景库中路径行为的依赖性)特别有用(在反应器中 使用不同的光感应)。免疫珠可用于更多样化的基于细胞术的测量(机器人可实 现自动孵化和清洗,例如使用 Opentrons OT-2 磁性模块)。表面显示或 GPCR 信号等技术也可用于设计生物传感器菌株,用单细胞仪测量更多培养物尺寸,无需试剂成本。除了高性能的定量菌株表征外,此类平台还可用于生物技术应用。基于自动细胞仪的人工微生物联合体的组成,以及培养条件的动态控制(如本文所示,使用组氨酸营养不良和 OD),可以大大减少设计稳健共存机制的需要,因此可以使用更大多样性的联合体。未来,希望许多基于 ReacSight 的平台将被组装起来,它们的设计将被广泛的社区共享,以大幅扩展实验能力,从而解决微生物学的基本问题,并释放合成生物学在生物技术应用中的潜力。参考文献:Bertaux, F., Sosa-Carrillo, S., Gross, V. et al. Enhancing bioreactor arrays for automated measurements and reactive control with ReacSight. Nat Commun 13, 3363 (2022). https://doi.org/10.1038/s41467-022-31033-9 文章来源:本文由中科院上海生命科学信息中心与曼森生物合作供稿排版校对:刘娟娟编辑内容审核:郝玉有博士
  • 材料表征“一站式”课堂:近20类表征技术云端讲解,免费报名中
    材料表征与检测技术,是关于材料的成分、结构、微观形貌与缺陷等的分析、测试技术及其有关理论基础的科学。是材料科学与工程的重要组成部分,是材料科学研究、相关产品质量控制的重要基础。2020年12月15-16日,仪器信息网(instrument.com.cn)将线上举办“2020年材料表征与检测技术”主题网络研讨会,两天的会议将汇集9位材料表征技术领域知名专家和9位知名仪器企业资深应用专家,为大家详细讲解材料表征检测常用的近20类检测技术及应用。旨在为材料研究工作者提供广泛材料表征检测技术的“一站式”云端学习平台。两天的会议将分设成分分析、表面与界面分析、结构形貌分析、热性能分析等四个专场,,以线上报告分享、在线网友答疑互动形式,针对材料科学常用表征及分析检测技术进行探讨。会议时间:12月15-16日会议形式:线上直播,免费参会参会对象:材料学科研、材料领域研究开发、检测技术工作者等报名方式:报名链接https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/CLBZFX2020/扫码报名内容摘要专场设置讲解技术成分分析色谱、质谱、电子探针、X射线荧光光谱(XRF)、热脱附表面与界面分析拉曼光谱、光电子能谱(XPS)、扫描探针显微技术(SPM)结构形貌分析聚焦离子束-电子束双束电镜、电子背散射衍射(EBSD)、X射线衍射(XRD)热性能分析热重分析(TGA)、差热分析、差示扫描量热(DSC)、热分析联用技术报告嘉宾成分分析专场(12月15日上午)国家钢铁材料测试中心高级工程师孙晓飞分享题目:X射线荧光光谱在高温合金成分检测中的应用日本电子产品经理胡晋生分享题目:电子探针的分析特点和国内市场情况介绍赛默飞世尔科技(中国)有限公司应用工程师佘晓萌分享题目:X射线荧光光谱仪在镀层样品分析中的应用沃特世科技(上海)有限公司高级应用工程师李欣蔚分享题目:不同色谱、质谱手段应对成分解析挑战的思路分享---善用小工具、实现大效用玛珂思仪器技术支持经理张兵分享题目:热脱附在材料散发及异味物质监测中的应用与相关法规介绍表面与界面分析专场(12月15日下午)中山大学研究员陈建分享题目:电催化还原反应中的表面吸附调控及其原位拉曼研究中国科学院化学研究所副研究员刘芬分享题目:XPS技术及在材料表界面分析中的应用北京师范大学教授级高工吴正龙分享题目:光电子能谱(XPS)中复杂谱峰的解析岛津企业管理(中国)有限公司产品应用专家陈强分享题目:SPM——表面分析与界面观测布鲁克资深应用科学家孙万新分享题目:基于扫描探针技术在表面及界面进行纳米尺度物理性质定量表征结构形貌分析专场(12月16日上午)中国科学院上海硅酸盐研究所研究员曾毅分享题目:电子背散射衍射标定方法研究中国科学院上海硅酸盐研究所研究员程国峰分享题目:Rietveld结构精修原理与应用赛默飞世尔科技(中国)有限公司应用工程师居威材分享题目:赛默飞K-Alpha光学实时XRD技术及应用介绍日本电子应用工程师席得圣分享题目:聚焦离子束-电子束双束设备JIB-4700F介绍热性能分析专场(12月16日下午)中国科学技术大学高级工程师丁延伟分享题目:热分析技术在材料研究领域应用中的常见问题分析中国科学院上海硅酸盐研究所助理研究员陶冶分享题目:薄膜材料的热物性测量南京大学胡文兵教授课题组成员陈咏萱分享题目:示差扫描量热法DSC技术进展及其在高分子材料表征中的应用梅特勒-托利多技术专家陈成鑫分享题目:于细微处见学问-热分析坩埚的选择和应用
  • 第八届国际(深圳)仪器仪表与测控自动化高峰论坛会议总结
    2012年12月4-5日中国IMCA2012倡导智能自动化传感技术、第八届国际(深圳)仪器仪表与测控自动化高峰论坛会议在深圳大学科技楼一楼会堂召开。本届论坛由深圳市科学技术协会,深圳市仪器仪表学会,广东省仪器仪表学会联合主办。由深圳市仪器仪表学会,深圳市传感器技术重点实验室,深圳大学光电工程学院,中国仪器仪表学会深圳联络处联合承办。   会议由深圳市仪器仪表学会饶陆华会长宣布大会开会并致祝辞,广东省仪器仪表学会理事长中国工程院刘人怀院士,深圳市科学技术协会孙楠处长,深圳大学科研处处长李学金教授,英国测量控制学会香港分部司库马锦汉博士致辞。大会由广东省仪器仪表学会副理事长及秘书长袁鸿教授及深圳市仪器仪表学会秘书长邵火主持。  本届会议盛邀到会嘉宾有:广东省仪器仪表学会理事长中国工程院刘人怀院士,深圳市科学技术协会孙楠处长,深圳市传感器技术重点实验室主任李学金处长,广东省仪器仪表学会副理事长及秘书长袁鸿教授,中国元器件协会传感器分会副理事长谷荣祥高级工程师,深圳市仪器仪表学会饶陆华会长,深圳大学光电工程学院副院长田劲东教授,中国元器件协会传感器分会副理事长陕西省物联网产业联盟秘书长谷荣祥高级工程师,香港工程师学会司库马锦汉先生,深圳市仪器仪表与自动化协会常务副会长钱宗春高级工程师,深圳高职院自动化学院副院长吴志敏教授,以及学会的会员与应用工程师共276多人出席了会议!  会议上深圳市传感器技术重点实验室主任李学金处长对光纤传感技术及其发展趋势做了报告,中国元器件协会传感器分会副理事长谷荣祥高级工程师主要讲解了多姿多彩的传感应用,还有精量电子(深圳)有限公司总监陈振,深圳市华旭科技开发有限公司研发中心副总工程师王炎喜,深圳达实智能股份有限公司市场部经理陈麟围绕会议的主题做了精彩的报告。  企业参观考察  12月4号下午学会邀请广东省仪器仪表学会理事长中国工程院刘人怀院士、广东省仪器仪表学会副理事长及秘书长袁鸿教授、深圳市仪器仪表与自动化协会党英杰副秘书长在深圳市仪器仪表学会培训部王连桂部长陪同下到蓍名会员企业深圳市科陆电子科技股份有限公司、深圳达实智能股份有限公司、深圳市华旭科技开发有限公司参观。12月5日(星期三)深圳仪器仪表著名企业参观考察,美特斯工业系统(中国)有限公司、深圳市科陆电子科技股份有限公司、深圳达实智能股份有限公司参观人数30人。
  • 海南持续提升全生物降解材料及制品检测能力 推动降解产业高质量发展
    全生物降解塑料制品到底能否降解?在海南,只需7天就能揭晓答案。“可在过去,通常需要3到6个月。”近日,省市场监管局相关负责人在接受海南日报记者采访时透露,目前我省全生物降解材料及制品检测能力在全国处于领先地位,为海南禁塑工作提供了有力技术支撑。在海南大胜达纸浆模塑环保餐具智能研发生产基地,工作人员正在检查环保餐具质量。海南日报记者 袁琛 摄让这一检测时间实现大提速的,是海南省产品质量监督检验所(以下简称省质监所)联合中国科学院理化技术研究所打造的国家市场监管重点实验室(降解材料质量安全评价与研究)。成立仅两年,该重点实验室便在技术攻关等方面取得多项突破。目前,该重点实验室已开发堆肥生物降解专用材料5种,设计和合成海水降解材料2种,研制降解制品3种,开发生物降解塑料制品检测新方法6项,获CMA(检验检测机构资质认定)或CNAS(中国合格评定国家认可委员会)检验参数578项,获CNAS认可的国际标准33项。全生物降解材料及制品检测能力的提升,一方面助力“禁塑”监管执法,一方面也正通过科技成果转化服务企业发展,推动海南降解塑料制品产业高质量发展。“随着我省‘禁塑’工作的开展,降解塑料制品企业逐渐增多,急需检验检测机构提供技术帮扶。”省质监所相关负责人介绍,目前该所已为我省一批降解塑料生产企业提供准确、高效的检测服务,帮助企业打通从生产到销售的产品质量关。为服务海南降解材料产业发展,我省还成立了降解材料产业质量基础设施一站式服务平台,通过有机融合计量、标准、认证认可、检验监测、质量管理等要素资源,持续满足降解材料产业高质量发展需求。“近年来,海南生物降解产业发展迅猛,全省降解材料生产能力年产量达2.5万吨。”该负责人表示,今后,该所将依托不断提升的检验、科研、技术实力,进一步帮助降解材料企业引进技术、改进工艺、提高质量、开发新品,打造一批拥有自主知识产权的高新技术产品、绿色环保产品。
  • 顶空-气相色谱法检测三卤甲烷和四氯化碳全流程讲解
    上海市供水调度中心夏鑫工程师紧扣有机物检测标准、方法及质量控制等要求,从样品采集、色谱柱选型、标准曲线配制、谱图解析等多方面,详细讲解了水中三卤甲烷和四氯化碳的检测全流程操作及检测流程中的关键环节。
  • Digital Western Blot在领先靶向蛋白降解药物公司研发中应用
    靶向蛋白质降解 蛋白表达和功能异常调控可极大地改变细胞生理学并导致许多病理生理状况如癌症、炎症性疾病和神经退行性疾病等。内源性蛋白质的稳态表达由从头合成和降解速率的平衡来控制。靶向蛋白质降解(Targeted Protein Degradation,TPD)以剂量和时间依赖性方式通过蛋白酶体对致病靶蛋白进行降解。从目前药物研发进展来看,靶向蛋白降解的概念提供了革命性的药物开发机会,预计将带来现代小分子药物研发的转变。 在靶向蛋白降解领域,蛋白质免疫印迹技术(Western Blot,WB)是观察细胞中浓度依赖性蛋白质降解的经典方法。然而,传统的蛋白质印迹非常耗费资源,需要多个洗涤步骤和长孵育时间才能产生高质量的印迹,导致技术操作复杂、通量低、定量不准和重复性差等劣势,难以推动选择性诱导、快速和可持续性的蛋白质降解疗法的快速发展。 根据药物研发需求,工业界迫切需要建立高效、灵敏、可量化和可重现的蛋白质降解技术平台,满足不同通量和不同研发阶段需求。目前全球领先的靶向蛋白质降解药物研发公司基本建立了高低通量结合、筛选和验证一体化的研发平台。下面文章一窥行业领先的药物公司平台建设思路。SLAS Discovery:C4 Tx团队总结加速靶向蛋白降解疗法开发和优化的高通量技术 本文总结了靶向蛋白降解领域最常采用的从低通量到高通量的几种不同方法。详细说明了传统Western blot、基于毛细管电泳技术的Digital Western Blot(ProteinSimple)、高通量流式细胞术(HTFC)、AlphaLISA SureFire技术、时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)技术和Nano-Glo HiBiT技术。01 Digital Western Blot技术 Digital WB技术是传统WB实验系统的高效替代方案。使用该技术,可在同一根毛细管中完成样品分离、捕获、固定、免疫检测和定量分析,从而实现传统WB的所有实验步骤(包括蛋白质上样、分离、免疫印迹、洗涤、检测以及数据分析)自动化,有效提高蛋白质表达定量结果的精确性和重复性。全自动Digital WB技术显著地缩短了样本检测时间到3小时,直接采集化学发光或荧光信号值,利用数字化信号峰面积来表征蛋白含量,短时间内实现了目的蛋白的可视化精准定量分析。ProteinSimple旗下具有系列的Digital WB系统,从25到96个样本通量,可满足靶向蛋白降解药物研发过程中对中低通量检测需求。 本技术可相对和绝对定量检测目的蛋白丰度,适用于内源性的或未修饰靶蛋白分析,如果抗体表位不受干扰,也可检测修饰的标记过的蛋白质。与传统WB相比,Digital WB可实现高分子量蛋白质可靠捕获和定量分析如BRD4案例。同时,需要样本量少,只需要3 μL上样量,特别适用于细胞或降解剂有限的条件下,96孔板中收集处理过的细胞可满足检测需求。除了自动化和标准化之外,批次数据差异CV值较低,重复性好。软件符合21 CFR Part11,数据全程可记录。这些优势使其成为工业领域蛋白表达检测平台的标准配置。02高通量流式细胞术(HTFC)和In-Cell Western (ICW) 流式细胞技术可分析细胞表面和细胞内蛋白质表达水平,技术进步已使流式可作为中高通量筛选方法来辅助药物发现。紧凑型流式细胞仪可检测96孔板中细胞配体或蛋白质的不同荧光强度。本质上,高通量流式细胞术一次检测单个细胞,提供单个细胞信号。而ICW对孔内所有细胞进行批量读取。两种方法使用比率荧光读数来提高重现性和降低标准偏差,进而提高整体数据质量。与传统流式比,这两种技术方案需要更少的样本体积和检测抗体可有效降低成本。但无法根据蛋白质分子量参数来区分特异性和非特异性信号。03AlphaLISA SureFire技术 AlphaScreen是一种多功能的基于微珠相互靠近实验技术,基于生物分子的相互作用,可测定各种分析物包括标记的或内源性蛋白。本技术提高了检测灵活性,微珠种类被设计识别各种不同的工程化蛋白质标签,或AlphaLISA每个微珠能包被针对目标蛋白不同表位的特异性抗体。当与同一蛋白质结合时,Alpha供体和受体微珠会靠近,采用680nm近红外光激发,供体微珠导致单线态氧分子释放。单线态氧的产生本身不足以产生信号,但当受体微珠靠近时,会引发能量转移反应,进而产生放大的荧光信号。AlphaLISA SureFire技术采用改进光谱特性的微珠,只能进行终点分析,需要细胞裂解来观察感兴趣蛋白质信号。对于时效性降解曲线,可通过多个高通量筛选细胞培养板在不同时间点裂解来实现。该技术优势是有助于更快地优化、自动化和小型化,适用于化合物常规和高通量筛选。可减少实际操作时间和信号读取需要的总时间,加速药物发现。具有飞克级灵敏度和 4-5 log 宽动态范围,使其适合于细胞内、分泌或膜结合蛋白检测。 对于靶向蛋白质降解的细胞学实验,384孔板可显著缩短实验时间。使用合适的抗体,通过使用针对靶蛋白翻译后修饰的抗体来区分靶标蛋白。例如使用特异性识别磷酸化蛋白的抗体直接评估具有自磷酸化活性激酶的化合物BiDAC抑制和降解影响,可与总蛋白(磷酸化和未磷酸化)测量值进行比较。获得这两个数据可能会提高降解剂与抑制剂前体区分机制的理解,进一步了解目标蛋白调节对表型影响。 尽管有这些优点,该技术有一些局限性。Alpha 微珠价格昂贵且对环境光高度敏感,需要在暗室环境添加实验试剂,上机前孵育期间尽可能避免在光线下长时间暴露。此外,读板机温度会影响单线态氧的生成和扩散速率,每摄氏度可高达10%。为了最大限度地减少批次间差异,实验微孔板和读板机应保持在温度良好可控环境中。最后需要注意过渡金属可导致单线态氧猝灭效应。04时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)实验 TR-FRET实验可用于检测细胞内蛋白质水平变化,有助于高效快速的靶向蛋白质降解领域的药物发现。与AlphaLISA SureFire 技术类似,TR-FRET 是一种直接的均质混合和读取夹心免疫分析方法,信号检测前不需多次洗涤步骤。通过量化两种荧光团标记的抗体之间的比率信号来确定蛋白降解水平,这些抗体结合同一蛋白质上的两个不同表位,采用供体和受体荧光团标记。 TR-FRET是终点实验,需要细胞裂解来观察检测感兴趣蛋白质的信号。如蛋白降解动力学曲线,必须使用多个高通量筛选细胞板并行设计TR-FRET实验,以便裂解细胞并在每个时间点后添加检测抗体。将这些数据叠加可提供DC50、Emax偏移以及时效曲线。对于生物标志物分析,重要的是两种抗体使用不同表位与同一蛋白质结合,以启用 FRET 信号,同时将背景信号降至最低。与Alpha 技术一样,该方法可用于测量目标蛋白质翻译后的抑制,从而可对通路抑制以及总蛋白质水平进行定量。也可区别癌症样本突变体和正常组织中相同蛋白质野生型具有选择性的降解剂。本技术需要购买高质量特异性抗体,长期药物发现工作时,TR-FRET 分析每个数据点成本可能是该技术的最大缺点,尽管成本可通过批量定制标记抗体降低。TR-FRET实验的灵活性、适应性和可转移性具有优势。一旦针对某个细胞系靶蛋白的 HTRF方法建立,通常很容易转移到表达相同蛋白质的其他细胞系中。HTRF技术具有宽动态范围和信号稳定,而无需担心环境光的猝灭效应。05Nano-Glo HiBiT技术 Nano-Glo HiBiT技术是一种高通量靶向蛋白质降解药物筛选系统。本技术基于分成两部分互补NanoLuc荧光素酶系统,11个氨基酸的HiBiT标签和 17.6 kD LgBiT多肽。采用 CRISPR基因编辑技术将11个氨基酸的 HiBiT标签引入到编码目标蛋白基因内,或设计为可通过质粒转染或慢病毒感染的重组DNA表达载体,两种方式都可实现将标签与感兴趣目的蛋白相连。加入特有的裂解检测试剂,HiBiT会自发的与检测试剂中与HiBiT互补的多肽LgBiT结合,二者结合后可形成有催化功能的NanoLuc 荧光素酶,可催化底物产生明亮的发光信号。该信号强度与细胞裂解物中的 HiBiT 标记蛋白含量成正比。 本技术检测蛋白质浓度线性范围有几个数量级,产生的发光信号可稳定数小时,因此适用于蛋白质降解剂药物发现阶段的高通量筛选。将HiBiT标签基因编辑敲入到感兴趣的蛋白质序列中,并生成稳定表达 HiBiT 标签目的蛋白的细胞系,整个实验开发时间至少需要3-4周。如需要挑取高表达HiBiT信号的单细胞克隆,则这个系统开发时间额外增加2-3周。与不需要基因编辑开发表达HiBiT细胞系技术相比,开发时间长是这种方法的一个缺点。然而,一旦产生稳定表达的具有足够信号的细胞克隆或细胞群,操作只需加样、直接均匀混合和读取检测,比较简单。 HiBiT 技术也可进行实时动力学蛋白降解检测。LgBiT蛋白通过慢病毒转染到已经表达HiBiT标记的目标蛋白细胞中,同时表达HiBiT和LgBiT标签,整个实验过程中重组发光NanoBiT酶都存在,通过与特定底物作用来检测信号随时间变化值。作为单一的非裂解试剂添加步骤,持续几分钟到几小时到几天时间内实时测量目的蛋白质降解,所以这种方法检测板和HiBiT试剂成本方面更具成本效益,但长时间实验需要配置自动化系统。靶向蛋白质降解平台建设策略 纵观目前市面上几种不同通量的靶向蛋白质检测技术,每种技术都各自优势和相关局限性。如何构建高效的靶向蛋白质降解技术平台来推动药物发现计划,需要注意整体策略选择,综合考虑成本、时间和可行性等多种因素。根据具体研发目标,选择最可能受益技术方案。针对某些靶标蛋白可能需要采用分层筛选漏斗原理,根据C4团队的经验,这种分层方法可最大限度地提高数据收集效率,以推动BiDAC降解剂早期发现和优化工作。各种策略前提是针对目标蛋白的抗体,及所有检测方法和试剂都必须在化合物筛选前完整验证。如有Nano-Glo HiBiT技术平台,可作为快速优化降解剂效力的高通量筛选的首选方法,它适用于终点法和连续读取方法,以与TR-FRET相当的成本,但提供更多的数据类型和检测灵活性。如有针对目的靶标高度特异性且经过验证的抗体,同时有相关即用型试剂盒,TR-FRET是一种合适的高通量药物发现工作的替代方案。TR-FRET可为表达相同目标蛋白的不同细胞系后续筛选提供有吸引力的选择。具体那种方案作为高通量筛选阶段优先选择,取决于研发阶段和目标。 本团队建议高通量筛选平台需与其他技术平台配合使用,才能更充分表征异双功能蛋白降解剂。如采用Digital WB确认内源性蛋白质降解,以确保与初步筛选实验中利用HiBiT高通量技术获得一致性实验结果,防止初级筛选试验中数据结果被错误解读。不管首选策略是什么,随着未来几年靶向蛋白降解领域的研究不断加强,利用更高通量技术和更自动化平台来加速药物发现是一项有价值的投资。SLAS Discovery:C4 Tx团队开发一种小分子诱导泛素化动力学检测方法 目前大多数靶向蛋白降解化合物借助最常见的E3泛素连接酶,主要是Cullin环连接酶CRBN或VHL。化合物在E3连接酶和靶蛋白之间形成三元复合物,并促进E3连接酶催化靶蛋白泛素化,多泛素化靶蛋白随后被细胞蛋白酶体降解。BiDACs以催化方式驱动靶蛋白泛素化,时间依赖性的诱导靶蛋白持续降解。作为新兴的治疗策略,理解蛋白质降解的催化基础对于靶向蛋白质降解表征和效用至关重要。 依赖CRBN双功能蛋白降解化合物(BiDAC)的催化速率是药物发现过程中需要考虑的重要参数。C4基于毛细管的全自动数字化WB技术,开发了一种无细胞裂解物泛素化的体外系统来检测BRD4溴结构域1(BD1)泛素化的动力学。采用全自动Digital WB来进行BD1和BRD4泛素化水平,研究发现 BiDAC 在泛素化速率、亲和力和协同性方面存在显着差异,并遵循快速平衡模式。此外,量化发现不同化合物之间泛素化模式有所不同。本研究提供一个框架来优化BiDAC,进而提高三元复合物形成亲和力和泛素化率。只有在形成稳定的靶蛋白-BiDAC-E3泛素连接酶三元复合物时才能高效特异性泛素化靶蛋白,但三元复合物形成不一定决定泛素化率。通过检测无细胞裂解物中BD1结构域泛素化初始速率,来了解相同化学系列BiDAC是否在催化效率方面和热力学参数方面差异。 下图A中 3个化合物CFT-0251,CFT-0743和CFT-0660在不同浓度下,90min时BD1泛素化免疫印迹条带。下图B中用 DMSO或300nM CFT-0251处理样品,不同时间点的BD1和 BD1_Ub代表性化学发光定量峰图。通过Digital Western检测在4个时间点,根据每个时间点获得的曲线下峰面积AUC测量BD1转化为泛素化偶联BD1的量。90分钟时间内DMSO对照显示很低背景泛素化水平。相比之下,CFT-0251在300nM浓度时泛素化水平最高,BD1在整个实验过程中发生明显的泛素化,进而导致蛋白降解。 BiDAC诱导的BD1泛素化水平在不同泛素化位点可变的。下面A图 BD1泛素化模式量化10个化合物对BD1结构域无赖氨酸泛素数量。随着时间变化,最大活性浓度下测试各种BiDAC,只有CFT-0743结果双泛素化比单泛素化更多。 了解泛素化率有助于深入了解BiDAC系列化学过程,可优化E3连接酶降解目标蛋白质过程。特别是对于挑战性的目标蛋白,其中泛素化率可能被证明是需要优化的关键参数。需要开发定量描述热力学和降解动力学的方法工具,来全面了解BiDAC诱导的蛋白质降解过程以及循环的每一步对整体降解速率的影响。降解标签(dTAG)技术验证蛋白质降解靶标 常规的靶标确认策略包括RNAi或 CRISPR/Cas9破坏基因表达,从而导致细胞总蛋白水平降低 ,或使用小分子拮抗剂抑制蛋白功能。小分子药理学方法较单纯的基因方法具有许多优势,包括剂量依赖性效应以及快速且可逆的作用。相比之下,基因方法提供的动态控制较少、无法确定有效剂量且通常完全不可逆。dTAG 靶标确认技术结合了基因和药理学策略的技术优势,可快速提供细胞总目的蛋白丰度的剂量依赖性效应,且在降解剂洗脱方面,这种效应是可逆的。靶向蛋白降解剂会敲低整个蛋白质,影响蛋白功能。因此,新的降解剂开发需要评估潜在靶点,靶点验证是一项重要工作。dTAG降解技术提供了一种可复制推广的策略,原则上可降解任何细胞内感兴趣的蛋白质(POI)。它主要优点是不依赖于蛋白配体或PROTAC的预先存在,具有广泛地适用性,使其成为蛋白靶标发现和确证的有效策略。dTAG 的作用机理 通过CRISPR/Cas9 介导的基因座特异性敲入或慢病毒转基因表达,靶蛋白表达为一种具有 FKBP12F36V 突变体的嵌合体。dTAG-13等 dTAG 化合物由一个高选择FKBP12F36V 配体与 E3 连接酶配体连接组成,该配体在融合蛋白和 E3 连接酶之间形成一个三元复合体,从而引起靶蛋白多聚泛素化和降解,dTAG-13 已被用来检测和验证癌症新靶点。 下图利用dTAG降解剂处理表达FKBP12F36V 融合蛋白,评估探索剂量依赖性降解反应。利用Digital WB检测蛋白降解水平,最高剂量500nM下观察到最大降解。在这种情况下,与 5nM dTAG-13 处理相比,用相应的阴性对照 (dTAG-13-NEG) 处理似乎略微降低了目标蛋白水平。A图CRBN募集dTAG降解剂dTAG-13,B图是VHL募集的dTAG降解剂dTAGV-1。与 dTAG-13处理一样,观察到剂量依赖性降解,最高测试剂量 (500 nM) 下观察到最大降解。右图条带图和峰面积图定量数据显示两个dTAG降解剂之间的灵敏度差异。与 dTAG-13相比,用dTAGV-1处理后的降解更敏感,在这种情况下,dTAGV-1将用于后续实验的首选降解剂。 采用dTAGV-1处理野生型FKBP12和FKBP12F36V 靶标2细胞,Digital WB可直接反应融合蛋白与野生型分子量变化,同时准确检测dTAGV-1剂量依赖性降解反应。 通过以上案例,可知传统免疫印迹方法重复性较差、定量不准确和操作时间长等技术限制,很难满足蛋白泛素化水平检测和靶标验证的精准定量需求。Digital WB技术是基于毛细管电泳的快速定量免疫学检测方法,可检测靶蛋白和泛素化蛋白表达水平,进而准确反应靶向蛋白降解研究过程量效关系和时效关系。Digital WB技术可灵敏地、快速地、可重复性确认内源性蛋白降解,以确保与初步筛选实验中高通量技术获得一致性实验结果,是RPOTAC技术平台构建的必备技术。已被GSK、Pfizer、Arvinas、Kymera therapeutics、C4 therapeutics,药明康德和康龙化成等领先RPOTAC药物研发和服务公司采用。PROTAC 是 Arvinas, Inc. 的注册商标,BiDAC是C4 therapeutics的注册商标。其他商标和注册商标是其各自所有者的财产,本文引自如下文献:1. Jeffrey R. Simard, Linda Lee etc. (2021). High-Throughput Quantitative Assay Technologies for Accelerating the Discovery and Optimization of Targeted Protein Degradation Therapeutics. SLAS Discovery. Vol. 26(4) 503–5172. Ellen F. Vieux, Roman V. Agafonov etc. (2021). A Method for Determining the Kinetics of Small-Molecule-Induced Ubiquitination. SLAS Discovery. Vol. 26(4) 547–559
  • 睿科仪器圆满举办“Auto SPE系列全自动固相萃取仪培训班”
    2014年10月23-24日,睿科仪器在美丽的厦门圆满举办了“2014睿科仪器Auto SPE系列全自动固相萃取仪培训班”,此次培训有来自各地各市的环境监测站、疾控中心、环保局、城市排水监测站、水利委员会、水务集团、水质检测公司、自来水公司、高校等用户前来参加。 培训期间,睿科应用经理戴相辉讲解了固相萃取基础知识、固相萃取技术在水质分析中的应用、水质分析中数据的质量控制等内容,并着重介绍了GB5749-2006和GB3838-2002所涉及的检测方法及其注意事项;睿科产品经理李修艳介绍了Auto SPE系列全自动固相萃取仪的硬件和软件,并做SVOC的Demo,包括软件使用的参数设定注意事项、仪器特殊功能的实现、仪器的操作注意事项等;睿科售后经理吴祥庆从日常保养、柱插杆维护、注射泵维护、12通阀维护等方面介绍了Auto SPE系列全自动固相萃取仪的维护保养,现场不仅有视频操作演示,更有仪器实机演示,让用户对仪器进行拆卸,详细了解内部构造与原理,并操作学习仪器使用及维护。 培训结束后,用户对培训的效果深感满意,纷纷表示学到了很多相关的知识与方法,希望睿科多多举办此类培训,这也是对睿科仪器的肯定与鼓励。我们深知,睿科仪器的产品能够迅速占领市场,离不开广大用户对我们的支持与信任,我们将一如既往地以先进的科技、优良的性价比以及完善的售后服务竭诚为广大用户服务。
  • 睿科仪器圆满举办“Auto SPE系列全自动固相萃取仪培训班”
    2016年10月24-25日,睿科仪器在美丽的海滨城市--厦门圆满举办了“2016睿科仪器AutoSPE系列全自动固相萃取仪培训班”,培训目的在于让用户熟悉并掌握全自动固相萃取仪的使用及维护保养,了解水质分析中数据质量控制的关键点。此次培训汇聚了来自全国各地的环境监测站、疾控中心、城市排水监测站、水务集团、水质检测公司等近60名用户前来参加。此次交流培训班,为了让每一个用户能对知识要领深入了解,我们将培训内容分为三大部分。第一部分:固相萃取技术基础知识、固相萃取技术在水质分析中的应用,并着重介绍了GB5749-2006和GB3838-2002所涉及的检测方法及其注意事项。第二部分:水质分析中的质量控制与全自动固相萃取仪的硬件和软件知识,并做SVOC的Demo,包括软件使用的参数设定注意事项、仪器特殊功能的实现、操作注意事项等;第三部分:Auto SPE系列全自动固相萃取仪的日常保养、柱插杆维护、注射泵维护、12通阀维护等方面做详细讲解,现场指导操作,实机演示,拆卸装机,了解内部构造与原理,掌握使用及维护仪器要领。培训的同时,现场也展示了全自动浓缩仪、全自动标准溶液配制仪、全自动石墨消解仪等实验室前处理自动化产品,受到用户的一致赞扬,期望能早日让我们的仪器进入实验室配套综合使用。正是睿科仪器在自动化样品前处理领域中不断的探索与创新,推动了技术的精进,打造了完整的产品系列,并结合功能强大的数据分析软件,高效、准确的帮助用户完成各种分析任务,才得到广大用户的信任与期待。培训结束后,用户表示此次学习之旅收获了很多实用的知识,希望睿科能多多举办相关仪器培训。睿科仪器的产品能够迅速占领市场,离不开广大用户对我们的信任与支持。我们将继续不断前进,以能帮助实验室解决最具挑战性的任务为目标,为广大用户竭诚服务。AutoSPE系列培训刚刚落幕,11月23-25日,我们还将举办“2016年睿科仪器Fotector系列全自动固相萃取仪培训班”,期待与食品分析的各位用户相聚睿科。
  • 安捷伦推出新型气相色谱自动进样器
    安捷伦科技公司推出新型气相色谱自动进样器  具有新的速度、样品制备功能和灵活性  2009年3月20日,北京—安捷伦科技公司(NYSE:A)今天推出了Agilent 7693A系列自动液体进样器,适用于安捷伦全线的台式气相色谱仪,并且极大地提升了液体自动进样器分析通量、灵活性、自动样品前处理能力。  “分析实验室需要在不影响分析质量的前提下,在更短的时间分析更多的样品,安捷伦不断地以GC设计上的重大突破对此做出了响应,比较典型的实例是安捷伦的微板流路控制技术以及低热容气相色谱技术,这些技术都带来了分析效率的提高”安捷伦副总裁、气相色谱系统和流程自动化总经理Shanya Kane说,“我们今天的发布的新一代气相色谱液体自动进样器,就是安捷伦长期以来帮助气相色谱用户,使其仪器投资价值最大化的最新实例。”  Agilent 7693A以全新的设计取代了行业领先的7683B,将帮助用户更快处理样品,并得到更好的数据。新ALS是模块式的,让用户可以配置其最需要的自动进样器—— 从一个带16位样品塔的基本进样器开始,可以根据需求的扩展不断增添新的功能。可选件包括,第二个进样塔、150位样品盘和样品管加热器/条码阅读器,适用于长时间无人执守操作。自校准的“即插即用”式进样器不用工具即可快速安装,可以从一个进样口移到另一个进样口,甚至可以在不同气相色谱仪之间交互使用,以适应工作量的变化,并方便进样口维护。  速度和性能  安捷伦独有的快速进样技术,速度是其它品牌液体自动进样器的两倍。进样时间不到100毫秒,最大限度地减少了样品降解和针头歧视效应。推杆的速度可以精确控制,真正实现大体积样品进样或复杂分析进样的优化。Agilent 7693A 针对气相色谱获得良好峰形和高度准确的数据进行了专门化设计。新进样器支持三明治进样,可以在进样前加入一定体积的内标和/或溶剂,全新的进样针的设计上能够将交叉污染降到最小,并延长了进样针的使用寿命。  双进样器配置能够实现安捷伦独特的双通道同时进样功能,与单进样器ALS相比,样品通量提高了2倍,从而节省了大量时间。  每个进样塔能放置最多16个样品,还可以容纳两个溶剂瓶和一个废液瓶。在使用样品瓶盘时,进样塔可以放置10个溶剂瓶和5个废液瓶,外加三个样品瓶转移位置。从而给样品处理带来了无可比拟的灵活性。  新的样品盘上样品瓶放置系统有三排50个样品瓶的架子,共能容纳150个样品,比过去增加了50个。这些架子适合放入冰箱冷藏,并且非常节约空间。安捷伦还为7693A提供了全进样盘加热/冷却选件。  自动化样品前处理  为了使许多高通量分析流程(如环境分析、食品安全检测或药物质量控制等)效率更高,安捷伦提供了一个可选件加热器/混合器/条码阅读器,可以自动进行各种样品前处理,如制备高粘度或微溶样品。用户可通过简便易用的软件让仪器进行样品前处理操作,如添加衍生化试剂、加热样品瓶、加入第二种试剂,混合,然后将处理后的样品注入气相色谱系统。  新的自动进样器的样品处理功能能够大量节省时间和人力,也消除了不同操作者之间可变因素的影响,消除因为样品前处理不同带来的重复操作。可以把溶剂消耗和废液减少90%,也减少了人员和溶剂的接触。  如需了解有关新型Agilent 7693A系列ALS的其它信息,可访问www.agilent.com/chem/7693A。  安捷伦长期致力于GC和GC/MS的创新开发,在制造耐用的仪器方面享有盛誉。安捷伦的前身,惠普公司,于1958年进入气相色谱市场,从那时起就一直是GC和GC/MS产品的领导者。1973年第一次引入微处理器控制,1975年推出世界第一台台式GC/MS系统。1996年,HP 5973推出石英镀金双曲面四极杆质量分析器,实现了仪器稳定性和性能上的突破。1999年安捷伦从惠普分离出来,直至今日,仍在GC和GC/MS的硬件和软件方面不断开拓创新。  # # #  关于安捷伦科技  安捷伦科技(NYSE: A)是全球领先的测量公司,是通信、电子、生命科学和化学分析领域的技术领导者,公司的19,000名员工在110多个国家为客户服务。在2008财政年度,安捷伦的业务净收入为58亿美元。要了解安捷伦科技的信息,请访问:www.agilent.com.cn http://agilent.instrument.com.cn/ 。
  • 睿科仪器圆满举办“Fotector系列全自动固相萃取仪培训班”
    2016年11月24-25日,睿科仪器如期而至的又一次成功举办了“Fotector系列全自动固相萃取仪培训”,培训目的在于让用户熟悉并掌握全自动固相萃取仪的使用及维护保养,了解食品分析中数据质量控制的关键点,让大家在实际运用中得心应手。参加此次培训的用户遍布全国各省的产品质量安全检验检测中心,职业病防治研究院、疾病预防控制中心及公安局等。为了让每一个用户能对培训的内容有细致深入的掌握,我们将培训内容分为三大部分。第一部分:固相萃取技术基础知识、固相萃取技术在食品分析中的应用,并着重介绍了固相萃取常见问题以及最佳的前处理解决方案。第二部分:Fotector系列全自动固相萃取仪的日常保养、上样座维护、柱插杆维护、注射泵维护、12通阀维护等做了详细讲解。并现场指导操作,实机演示,拆卸装机,了解内部构造与原理,掌握使用及维护仪器要领。第三部分:分析化学中的质量保证与质量控制,全自动固相萃取仪的硬件和软件知识,并做食品分析方法的Demo,包括软件使用的参数设定注意事项、仪器特殊功能的实现、操作注意事项等。此次培训中,现场也展示了全自动均质器、全自动浓缩仪、全自动标准溶液配制仪、全自动石墨消解仪等实验室前处理自动化产品,受到用户的一致认可,期望能早日让我们的仪器进入实验室配套综合使用。培训结束后,用户表示此次学习之旅收获了很多实用的知识,对实际的操作有了全面的了解,希望睿科能多多举办相关仪器培训。睿科产品能够迅速占领市场,在行业大众的视野中耀耀生辉,离不开广大用户的支持与信任,我们也将继续不断前进,以能帮助实验室解决最具挑战性的任务为目标,为广大用户竭诚服务。
  • 敬业!CIEPEC2017上 知名仪器公司老总亲自当讲解员
    p  2017年6月13日,第十五届中国国际环保展览会(CIEPEC 2017)于北京中国国际展览中心(静安庄馆)正式拉开帷幕。本届展览会共设8个展馆,吸引了众多国内外厂商参展。/pp  据了解,刚刚过去的“六· 五”环境日上,武汉天虹荣获“第四届湖北省环境保护政府奖”,二十多年来,天虹环保精耕大气环境监测领域,培育环境监测服务产业。对外捐赠古巴,落实习主席一带一路方针 助力G20峰会,承担长三角区域环境空气VOCs自动监测工作....../pp  借CIEPEC 2017之际,仪器信息网对武汉市天虹仪表有限公司总经理李虹杰进行了采访。/pp  李总介绍到,此次环保展,武汉天虹带来了环境监测车、环境空气质量自动监测系统、VOCs在线监测系统、工地扬尘监测系统、超低排放污染源烟气(尘)监测系统、现场采样设备等众多产品。/pp  其中,李总针对环境监测车和臭氧原级校准系统对我们进行了一个详细的介绍....../ppbr//pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=177AB34CA7994F1B9C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=490&playerid=2BE2CA2D6C183770&playertype=1" type="text/javascript"/scriptpbr//ppbr//pp /pp /p
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