包埋板

激动人心的消息！！——BBC报道了微胶囊造粒仪在细胞包埋方面的成功应用！ Doctors in London have cured a baby boy of a life-threatening disease which was destroying his liver. The boy was treated by implanting encapsulated liver cells. This is the first case reported worldwide so far. The liver cells were encapsulated in alginate using the Inotech Encapsulator IE-50R, which is a precursor model of the BUCHI Encapsulator B-395 Pro. BBC News showed also the Encapsulator IE-50R in the following report: http://www.bbc.co.uk/news/health-15745948 . 伦敦一名医生通过肝细胞微胶囊移植手术成功救治了一位患肝脏疾病的重症男婴。迄今为止，这是世界首例相关报道。肝细胞通过Inotech Encapsulator IE-50R也就是步琦公司现在的微胶囊造粒仪B-395 Pro，包埋在海藻酸钠中，形成微胶囊。另外，BBC新闻还报道了Encapsulator IE-50R在其他方面的应用，见下面链接：lhttp://www.bbc.co.uk/news/health-15745948 This report demonstrates that the Encapsulator is excellent for cell encapsulation. 该报道表明微胶囊造粒仪在细胞包埋方面有着优越性能。

还不知道如何包埋？不妨试试步琦微胶囊造粒仪微胶囊造粒应用”疏水性液核微胶囊在许多行业中发挥着非常重要的作用，主要应用于香水、化妆品、造纸和农业等行业，近年来也在药物和生物活性（食品）行业中得到了应用。该方法允许大多数油或疏水液体被封装，以下物质是常见的例子：常见例子香熏油精油脂肪酸风味和香味Omega-3 鱼油疏水API碳氢化合物洗涤剂化妆品这种方法使被封装的物质（称为封装剂）免受许多不同的环境条件，如氧气，热量，pH值等的影响，并有助于延长其保质期，并实现缓释。与在微珠中封装油和疏水液体相比，使用核壳胶囊具有以下优点：使用核壳胶囊的优点更高的包封率-高达40%胶囊表面无包封剂更强的包封保护多种释放方式，瞬时释放或缓释使用BUCHI封装器提供的不同喷嘴，可以获得400 - 2200 μm之间的胶囊尺寸，同时获得狭窄的尺寸分布（±5%）。1应用案例介绍用海藻酸钙膜制备葵花籽油芯微胶囊（如图3）。设备仪器：封装器 B-390/B-395 Pro同心喷嘴系统：外壳喷嘴 400μm，核心喷嘴 150 μm泵送：气压（外壳材料）和注射泵/气压（芯材）搅拌器试剂聚合物：2.0% （w/v）海藻酸钠，用搅拌器溶解凝胶：100mm CaCl2，含 0.1% 吐温 80封装材料：葵花籽油纯化水2实验步骤将 4.0g 海藻酸钠粉末加入 200mL 水中。使用搅拌器将海藻酸钠完全溶解（图1）。让溶液静置，直至变清澈，并释放出其中所有的空气。气泡也可以通过放置在超声浴或真空下去除。▲ 图1. 聚合物制备将 1.47g CaCl2 和 0.1mL 吐温 80 溶于 100mL 水中。添加吐温 80 是为了降低胶凝溶液的表面张力，从而防止胶囊在进入溶液时破裂。海藻酸盐应首先通过喷嘴泵入，在获得稳定的液滴链后，应该开始通过核心喷嘴泵送葵花籽油。为了获得稳定的单中心液滴链（如图2），需要对两种流速进行微调，这些液滴在凝胶浴中固话产生液核微胶囊。让颗粒在 CaCl2 浴中变硬 20 分钟。最后用大量的水清洗胶囊。参数电压：大于 2000V流量：10（壳）和1.5（芯）mL/min频率：600hz压力：0.5bar振幅：3▲ 图2. 由葵花籽油核心组成的稳定液滴链包裹在海藻酸盐外壳内3实验结果▲ 图3. 使用 BUCHI B-395 Pro 生产的葵花籽油芯微胶囊的 40 倍图像收率：95%形态：球形载量：15%标准发展：±2.5%可以计算出葵花籽油（液体）微胶囊的载药量占比为：% = Vc / Vm * 100%其中：Vm 代表微胶囊体积Vc 代表液体芯的体积4结论海藻酸钠核壳胶囊可以应用于多种不同的液体和材料。胶囊内液体的装载量可高达 40%。封装器有不同的喷嘴尺寸，胶囊直径可在 400 ~ 2200μm 范围内选择。5参考文献 Whelehan and Marison （2011）. Microencapsulation using vibrating technology. Journal of Microencapsulation 28:669-688.Whelehan and Marison （2011）. Capsular perstraction as a novel methodology for the recovery and purification of geldanamycin. Biotechnology Progress 27:669-1077.

近年来，球差电镜技术与原位电镜技术的发展突飞猛进，吸引了一大批国内相关领域的青年学者进入此领域。为提高青年学者的研究水平，加强与国际同行的交流，进一步推动我国电子显微学事业的发展，第八届郭可信暑期学术研讨班将于2015年5月27-30日在浙江大学举行。届时，暑期学术研讨班将邀请电镜领域国际国内知名专家学者为学生做专题报告，同时给参会学生提供展示海报的机会。此次暑期班由郭可信教育基金会、中国电子显微镜学会、浙江大学电镜中心联合举办，由浙江大学电镜中心和浙江大学材料学院承办。　　会议将涵盖材料科学和生命科学，其中材料科学分会场为英文学术研讨班，与浙江大学材料学院第一届材料微结构与性能国际会议联合举办，主要内容集中在球差校正电子显微学与原位电子显微学 生命科学分会场为中文讲习班，集中生物医学、农林和共聚焦显微学。主要讲授基本理论和实验技术，理论讲授分为：(1)常规电镜制样技术，包括：动物、植物、微生物等样品制备 (2)免疫电镜胶体金标记技术，包括：包埋前胶体金标记技术、包埋后胶体金标记技术 (3)冷冻电镜技术，包括：高压冷冻技术、超低温快速冷冻技术、冷冻置换技术。(4)共聚焦显微学主要讲授：①超高分辨技术及其应用，包括PALM, STORM, STED 技术(2014年诺贝尔奖成果) ②荧光光谱分析技术与单点分析技术 实验方面包括：(1)免疫电镜胶体金标记技术示范，包括：包埋前胶体金标记技术、包埋后胶体金标记技术 (2)高压冷冻技术。共聚焦显微学：(3)膜蛋白运动参数分析技术示范 (4)蛋白相互作用的三维分析技术示范。届时还会邀请国际同行专家亲自授课。　　会议期间还将安排参观浙江大学电镜中心，并适当安排原位电镜样品杆的上机演示，生物制样的实际演示。欢迎各位同学踊跃报名，希望通过此平台培养和造就一批高精尖的电镜专业人才，为我国电镜事业和新材料的发展注入新的活力。　　中国电子显微镜学会　　2014年12月16日　　附：组委会名单　　大会主席： 张泽院士　　执行主席： 韩高荣 教授 李吉学 教授 杨勇骥 教授　　大会秘书：王勇 教授(材料科学) 洪健 教授(生命科学) 林金星 教授(共聚焦显微学)　　联 系 人： 王 勇 教授 E-mail：khk_zju@163.com　　洪 健 教授 E-mail：jhong@zju.edu.cn　　林金星教授 E-mail：linjx@ibcas.ac.cn

清风送爽的四月天，我们再聚北京。相聚由北京共赢联盟国际科技有限公司主办的“2023年EXAKT不脱钙硬组织切磨系统操作及维护技术培训班”。2023年4月10日-13日，在北京共赢联盟国际科技有限公司设在北京亦庄经济开发区的组织病理实验室举办了为期4天的EXAKT硬组织切磨系统设备操作及维护培训班。本次学习培训的单位有中国医科大学口腔医院、山东第一医科大学医学院、西安交通大学口腔医院、青岛大学附属医院、上海熠品质量技术服务有限公司等，共7位学员参加了本次培训。开班首日，实验室技术总监王东胜为接受培训的老师们做了开班动员，介绍了业内硬组织病理制片技术发展动态和公司组织病理实验室的发展历程、技术团队、核心技术以及服务项目等；且就硬组织制片做了《与硬组织制片相关的解剖与形态学简述》的主题分享。王东胜老师分享了他在硬组织制片领域中遇到的关于解剖、制片与形态学在标本取材、磨片要领和染色等方面的经验；张文隆工程师详细介绍了硬组织切磨片系统和制片流程，对每一个制片环节做了详细讲解。培训期间，学员们就硬组织切磨系统的实际操作及设备维护维修进行了系统性的学习和实践，内容包括：（1）EXAKT硬组织切磨系统操作规程和硬组织切片、磨片、染色与骨形态计量分析技术规范；（2）大样本分切技术介绍、演示及学员进行鲜活组织样本分切操作；（3）光固化包埋技术介绍、演示及学员进行组织样本包埋操作；（4）T7200包埋剂使用方法介绍；（5）样本修复技术介绍及样本快修复和切片修复技术演示；（6）平行粘片系统技术介绍及演示；（7）T4000和T7200试剂使用方法介绍；（8）E300CP切片机切割与切片技术介绍、演示及学员进行样本块组织面分切操作；（9）平行粘片系统技术介绍及演示；（10）E400CS磨片机技术介绍及演示。学员们在专家组的辅助下，独立完成了制备硬组织切磨片，熟悉掌握了相关的制片技能。学习培训期间，公司还安排了部分专家老师为学员们做了相关的新技术讲座，包括《骨形态计量分析技术应用》等主题报告，让学员在学习切磨系统的基础上，对骨形态计量分析技术在其独有领域的关键作用有了全新的了解和认识。总结会上，技术总监王东胜、高级实验师赵培冉组成的技术专家组，对每位学员的制片进行了专业化的点评，与大家共同探讨了切磨片的制作标准、操作技能以及如何才能做出高质量的硬组织切磨片等问题。 培训结束后，杨立强总经理及王东胜技术总监给每位学员颁发培训合格证书。学习时间，学员们还参观了公司组织病理实验室，对实验室业务范围、仪器设备等情况有了直观的认识和了解。此次培训班培训内容涵盖面广、充实丰富，不仅提升了学员们的制片技能，同时也为用户实验技术人员尽快适应工作岗位、担负起工作职责奠定了坚实基础。

致：各院校和相关企业为了帮助EXAKT用户更好地了解不脱钙硬组织切磨技术、制片流程、设备操作规程及日常维护等相关的技术知识，切实提高用户老师切磨技术的实操技能。由北京共赢联盟国际科技有限公司举办的“2024年EXAKT不脱钙硬组织切磨系统操作及维护技术培训班”已确定将于2024年10月14日在北京举办，现将相关事宜通知如下：一、主办单位北京共赢联盟国际科技有限公司二、培训时间2024年10月14日 - 18日（不含往返行程，共计5天培训日程）三、培训地点北京共赢联盟国际科技有限公司中心实验室地址：北京市大兴区亦庄经济开发区地盛南街1号信泽四海科技园3041室四、培训内容EXAKT不脱钙硬组织切磨系统及制片流程介绍；E312/ E302切骨机技术学习与E312立式切骨机实操训练；E510脱水浸润仪的技术学习与观摩；E520包埋机技术学习及实操训练，T7200包埋剂和包埋填料的应用方法介绍；E530修复仪的技术学习及实操； E402/E401平行粘片系统技术学习及实操，T4000和T7210试剂使用介绍；E400CS磨片机技术学习及实操；E300CP切片机技术学习及实操；EXAKT不脱钙硬组织切磨设备日常维护操作要点；批量样本光固化包埋与修复处理新方法介绍与演示；硬组织切磨片扫描技术的常见问题与处理办法；形态计量分析技术介绍。五、培训方式与条件1、小班学员制；集体上课，分组上机操作训练，每组配备带教老师；2、提供EXAKT不脱钙硬组织切磨设备操作规范及日常维护手册；3、提供实验用设备、仪器、物品、耗材；4、提供学员培训用组织样本，学员也可自带组织样本；5、提供午餐（工作餐）。六、培训费用1、学员往返北京及当地食宿费用均由学员自理。2、本次培训班费用为人民币6000元/人。七、学员报名凡是拟参加学习培训的单位和人员，请于2024年9月20日联系我司展位电话报名，并获取填写《2024年EXAKT不脱钙硬组织切磨系统操作及维护技术培训班报名表》。2023年EXAKT硬组织切磨系统操作及维护技术培训班内容回顾（点击标题即可查看详情）

7月13日，北京中医药大学北京中医药研究院公开招标，购买全自动生化分析仪 、包埋机、染色封片工作站、电子天平等多台/套仪器，预算557万元。　　项目编号：BIECC-21ZB0582　　项目名称：北京中医药大学北京中医药研究院2021年双一流仪器设备采购项目　　预算金额：557.0000000 万元(人民币)　　采购需求：包号名称数量是否接受进口产品预算（人民币）交货时间交货地点01全自动生化分析仪等1批部分是329.5万元按招标文件要求北京中医药大学良乡校区指定地点02包埋机等1批是70万元03染色封片工作站1套是93万元04电子天平等1批否64.5万元简要技术要求：北京中医药大学采购仪器设备一批，共分4个包，用于北京中医药研究院“双一流”科研建设。　　注：具体采购内容及数量详见招标文件第六章“货物需求一览表及技术规格”。　　合同履行期限：按招标文件要求　　本项目( 不接受 )联合体投标。　　开标时间：2021年08月03日 09点00分(北京时间)（定稿）21ZB0582北京中医药大学北京中医药研究院2021年双一流仪器设备采购项目招标公告.doc

2016年12月19日，美国食品和药物管理局(FDA)批准了Foundation Medicine公司的FoundationFocus CDxBRCA产品，成为市场上第一个基于二代测序的伴随诊断试剂盒。　　该产品被批准用于鉴定携带BRCA突变的晚期卵巢癌患者，这些患者更易对Clovis Oncology公司生产的PARP抑制剂Rubraca(rucaparib)有反应。与此同时，FDA加速批准了Rubraca这一新药，该药物适用于已经用两种或更多种化疗治疗并且携带有害的BRCA1和BRCA2基因突变的晚期卵巢癌患者。FoundationFocus CDxBRCA是基于福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)的卵巢肿瘤组织，采用NGS技术检测BRCA1和BRCA2突变的伴随诊断试剂盒。该检测的结果可用于鉴别正在考虑用Rubraca治疗的卵巢癌患者。如果患者具有BRCA1/2有害突变的阳性结果，则可能适合接受Rubraca治疗。　　据美国国家癌症研究所最新统计，超过22，000名妇女将被诊断患有卵巢癌，超过14，000名妇女将死于该疾病。而其中，15%至20%的卵巢癌患者携带有BRCA突变。FoundationFocus CDxBRCA便可以用于检测患者肿瘤组织中的此类突变。　　此前，于2014年12月FDA曾批准AstraZeneca公司生产的PARP抑制剂Lynparza(olaparib)以及Myriad Genetics公司的伴随诊断产品BRACAnalysis CDx，用于鉴定接受三线以上化疗并具有BRCA突变的晚期卵巢癌患者。Myriad公司的伴随诊断可基于患者血液检测生殖系突变，其中使用PCR和Sanger测序来分析单核苷酸突变和Indel，使用多重PCR以评估大片段缺失和重复。　　Clovis公司提交了两项单臂试验的数据，包括106名先前接受过治疗的卵巢癌患者，Foundation Medicine公司的检测证实了96%的研究参与者存在BRCA突变。在此项研究中，54%的患者肿瘤缩小，反应持续中位数为9.2个月。　　使用Rubraca治疗的患者通常经历恶心、疲劳、呕吐、贫血、血小板水平低和呼吸困难。一些患者经历严重的副作用，包括骨髓问题、急性骨髓性白血病和胎儿损伤。由于是基于替代终点(surrogate endpoint)指标，Rubraca获得加速批准，因此，Clovis必须继续对该药物进行后续研究并提交数据以证明其对患者结果的影响。

热压镶嵌制备金相试样的小技巧，且听可脉小编娓娓道来：实际上，金相实验工程师在长期从事材料检测与分析的过程中，都感悟了许多应用经验，热压镶嵌制备金相试样也确实有许多值得互相借鉴的小技巧。1. 热压镶嵌机的预热可以缩短制样时间像MetLab的双筒热压镶嵌机METPRESS-2，它的预热功能千万不要忽略。早上刚上班还有一些日常事务需要处理的时候、在前道切割工序进行过程中、在开始准备镶嵌树脂的过程中… … 都可以利用这个时间打开预热功能，预热温度50-90℃，可根据本次制备的材料来设定。这将为正式的镶嵌制备节约时间。一次、一天、一月、一年… … 会为您节省出令人惊叹的时间！ 2. 灵活使用酚醛树脂粉末PhenoPowder，节约制样成本有些材料确需使用QMAXIS（可脉）的环氧树脂EpoPowder、丙烯酸树脂TransPowder、蜜胺树脂MelaPowder，以保证镶嵌树脂和样品的耐磨性一致，实现高保边的实验目的。热压镶嵌块的高度更多地是受制于磨抛的需要——采用自动磨抛机METPOL-A，镶嵌块要适合磨抛机的卡具；采用手动磨抛机METPOL-1V/2V时，镶嵌块要适合人手的把握。通常，镶嵌块的高度在15-20mm。但是，高度较小的样品，可以在观察的面包埋上述较贵的树脂，其它满足样块高度的部分，则用酚醛树脂填充。这样，既保证了样品制备的决定性技术要求，又能节约较贵树脂的使用量。日积月累，也会节省可观的制样成本。3. 酚醛树脂预制块可以提供很多便利和上述使用酚醛树脂粉末有些相近，当样品被覆盖了足够高度后，塞进与镶嵌筒直径一致的预制镶嵌块，不仅回避了倾倒粉末的小心翼翼，而且明显节省了加热加压的时间，镶嵌速度大增。尤其日常镶嵌量较大时，这是非常好的选择。4. QMAXIS（可脉）全能型的蜜胺树脂MelaPowder能一次解决许多应用这种非透明的白色，适合与大多数材料匹配。较高的耐磨性无需担忧研磨、抛光阶段树脂屑的脱落。较低的收缩率不仅对样品提供了有效的边缘保护，而且节省镶嵌料。特别地，如果后续除了显微观察，还要测试硬度时，这是不二之选。不必为硬度测试再重新制备样品了。5. 热压镶嵌也可以轻松地在镶嵌块上制作样品标签将样品放入镶嵌筒/隔块底部，倒入匹配的镶嵌树脂，高度约占总成型高度的80%，再倒入透明的丙烯酸树脂TransPowder，在其上平铺样品标签，再用TransPowder覆盖一个薄层，开始镶嵌。完成后，您将获得一个不可更改的标签样块了。6. 不要使用非金相制备的树脂科技的进步，研发出了难以计数的各类树脂。宣传资料也是铺天盖地，用词用语都极富煽动力。有的单位或个人为了节约制样成本，听信宣传资料描述，尝试买来某种树脂替代金相镶嵌树脂。镶嵌筒底部流淌出不固化的液体、镶嵌块底边缺齿、镶嵌块中间成渣、镶嵌块不成型… … 各种现象不一而足。不要颠覆常识——术业有专攻。以QMAXIS（可脉）的七种常用热压镶嵌树脂为例，这都是专为金相制样设计的、久经实践验证的热压镶嵌树脂。不正确的树脂将会浪费样品、荒废时间、损害热压镶嵌机，甚至造成实验室事故。7. 坚信MetLab热压镶嵌机的提示语“CLEAN MACHINE AFTER USE”，养成好习惯为了保证不同材料制备时的不同热压镶嵌树脂不混杂，也为了观察面高度边缘保护，请在每次试样制备完毕后，认真清理镶嵌筒底部。这也是延长热压镶嵌机使用寿命的必须付出。当然，在热压镶嵌的操作中养成好的使用习惯，肌肉和意识也会形成记忆，延展到生活和工作的方方面面，岂不收益更多！

透射电子显微镜是使用较为广泛的一类电镜，具有分辨率高、可与其他技术联用的优点。已广泛应用于医学、生物学等各个研究领域，成为组织学、病理学、解剖学以及临床病理诊断的重要工具之一。常规电镜样品制备包括常温化学双固定、常温脱水包埋、常规超薄切片、普通电镜观察几个步骤。样品制备过程历时约一周，超薄切片经醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色后，电镜观察。所有操作均按照以下流程进行。一、试剂0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液Na 2 HPO 4 2H 2 O 35.61 g 或Na 2 HPO 4 7H 2 O 53.65 g / Na 2 HPO 4 12H 2 O 71.64 gNaH 2 PO 2 H 2 O 27.60 g 或NaH 2 PO 4 2H 2 O 31.21 g加双蒸水（ddH2O）到1000 mL0.1 mol/ L磷酸盐缓冲液（PBS）0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 250 mL加双蒸水到500 mL2 % 低温琼脂低温琼脂 1.0 g加双蒸水到 50 mL加热到沸腾，溶液均匀后备用1 % 戊二醛固定液25 %（m/v）戊二醛水溶液 2 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 25 mL加双蒸水到50 mL1 % 锇酸固定液2 %（m/v）锇酸水溶液 10 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 10 mL包埋剂A液Epon 812 树脂 50 mL十二烷基琥珀酸酐（modecenyl succinic anhydride, DDSA） 80 mL包埋剂B液Epon 812 树脂 50 mL六甲酸酐（methyl nadic anhydride, MNA） 44.5 mL2 ， 4 ， 6 - 三甲氨基甲基苯酚（ 2, 4, 6 - tridimethylamino methyl phenol, DMP-30 ）甲苯胺蓝染液甲苯胺蓝 1 g1 mol/ L NaOH 10 mL加双蒸水到50 mL混匀过滤后使用1 % 醋酸双氧铀染液醋酸双氧铀 0.2 g加双蒸水到10 mL封口膜封口，4℃避光保存1 % 柠檬酸铅染液硝酸铅 0.265 g柠檬酸钠（含2分子结晶水） 0.352 g加双蒸水到10 mL①① 配制铅染液时，要先加水6 mL，超声震荡30 min，使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH，并不是晃动，直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照，即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定，藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定，总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。封口膜封口，4℃保存仪器修块机 Leica EM TRIM切片机 Leica EM UC6光学显微镜 Nikon 80i 及配套拍照系统DS-L1透射电子显微镜 JEOL-1230Gatan Bioscan Camera 792低电压透射电子显微镜 JEM-1230二、实验流程一、 取材与固定A. 植物样品1. 自来水冲洗表面泥尘后，使用灭菌水清洗2-3次，置于铺有预湿滤纸的培养皿中。2. 使用干净锋利的刀片切取目标材料，所取材料体积不大于3 mm3。切取样品时应注意动作迅速、减小损伤，避免来回切拉；使用的灭菌水及器具应4℃预冷，并在操作中尽量保持低温以降低组织细胞活性。3. 将切下材料放入装有预冷的戊二醛固定液的青霉素小瓶中后抽气，抽几次后轻摇小瓶，并打开瓶盖。重复2-3次，直到样品沉入瓶底。4. 室温静置1h，或摇床轻摇1h。5. PBS清洗3次，10min/次。6. 1%锇酸固定液固定1h。7. PBS清洗3次，10min/次。B. 动物样品1. 4℃预冷生理盐水冲洗组织块，迅速切取组织块，体积不大于3 mm32. 将切取的组织块投入装有预冷戊二醛固定液的青霉素小瓶中，并抽气直至样品沉底。3. 室温静置1h，或摇床轻摇1h。4. PBS清洗3次，10 min/次。5. 1%锇酸固定液固定1 h。6. PBS清洗3次，10 min/次。C. 单层培养细胞或悬浮培养细胞样品②1. 3000 rpm离心5 min，收集细胞样品，尽量多的吸弃培养液上清。2. 加入4℃预冷PBS液，充分吹吸混匀，静置4 min，3000 rpm离心5 min，吸弃上清。① 配制铅染液时，要先加水6 mL，超声震荡30 min，使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH，并不是晃动，直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照，即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定，藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定，总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。3. 重复步骤2一次。4. 加入预冷的血清或蛋清，充分吹吸混匀，3000 rpm离心10 min，吸弃大部分上清，留少部分，吹吸悬浮沉淀细胞。（或离心后吸弃上清，留少部分上清，不悬浮沉淀细胞，视样品浓度而定）5. 缓慢加入戊二醛固定液，小心放入4℃冰箱，固定过夜。6. 吸弃上清，刀片小心划开离心管壁，用钳子拉开离心管，小心取出已凝成固体的血清包埋块。7. 使用干净的单面刀片或手术刀，将血清包埋块切成2 mm3左右的小块，取3-5个富集细胞样品效果较好的包埋小块继续下面实验。8. PBS清洗3次，10 min/次。9. 1%锇酸固定液固定1 h。10. PBS清洗3次，10 min/次。D. 藻类及其他游离培养样品1. 吸取2%低温琼脂液200μL到0.2mL离心管，并将离线管置于冰上，取10μL枪头迅速插入琼脂中并保持离心管竖直，且枪头竖直靠中的包裹在琼脂中。2. 静置1 min，待琼脂凝固后，小心拔出枪头，形成琼脂空腔，待用。3. 3000 rpm离心5 min，收集样品，尽量多的吸弃培养液上清。4. 加入4℃预冷PBS液，充分吹吸混匀，静置4min，3000 rpm离心5min，吸弃上清。5. 重复步骤2清洗，吸弃大部分上清，留极少部分上清液，吹吸悬浮样品。6. 使用10μL 移液器小心将样品加入已经制备好的琼脂空腔中，使样品充满空腔大部分，添加过程中尽量避免气泡出现。7. 吸取50μL溶化的琼脂，快速滴加到空腔琼脂上封口，冰浴5 min，待琼脂完全凝固。8. 使用单面刀片小心划开离心管壁，用钳子拉开离心管，小心取出已凝成固体的琼脂包埋块，稍作修葺。9. PBS清洗3次，10 min/次。10. 1%锇酸固定液固定1 h。11. PBS清洗3次，10 min/次。二、 脱水1. 按丙酮与灭菌水体积比3：7配制30%脱水剂。吸弃样品管/瓶中的PBS，快速加入现配的脱水剂（脱水换液过程禁止出现样品暴露空气中现象，可不全部吸完，略有剩余，使样品浸润；动作应迅速准确），室温放置或摇床轻摇45 min。加入按30%、50%、70%、90%、100%（v/v）的浓度梯度进行脱水。2. 配制50%脱水剂，快速换液，室温轻摇45 min。3. 配制70%脱水剂，快速换液，室温轻摇45 min。4. 配制90%脱水剂，快速换液，室温轻摇45 min。5. 使用纯丙酮快速换液，室温轻摇30 min③。6. 重复步骤5一次。三、 渗透包埋在此步脱水操作完成后即可开始配制渗透用包埋剂，以免安排不周。样品浸泡在纯丙酮中时间不宜过久，以免造成样品较脆，不利于超薄切片。1. 配制渗透用树脂包埋剂1) 取干净的10 mL注射器，拔去活塞，用封闭针头堵住注射口，放于通风橱中。2) 小心倾倒B液9 mL到注射器中；然后再小心倾倒A液1 mL。3) 插入活塞，堵住注射器后，颠倒摇匀至液体颜色均匀，无丝状液体。4) 小心拔去活塞，通风橱中操作，缓慢滴加14滴DMP-30。5) 插入活塞，堵住注射器后，颠倒摇匀至液体颜色完全均匀，无丝絮状分色，竖直放置待用。2. 按照包埋剂与丙酮体积比3：7配制30%渗透剂，快速吸弃样品管中纯丙酮并加入渗透剂，轻摇渗透3 h。3. 按照包埋剂与丙酮体积比7：3配制70%渗透剂，快速换液，轻摇渗透过夜。4. 重新配制包埋剂，并小心推按注射器，将包埋剂挤到包埋模具中至液面略凸。5. 解剖针挑取样品到纯包埋剂中，渗透3 h。6. 小心挑取样品，滤纸上稍微沾下吸弃部分粘附的包埋剂，轻轻放置到未渗透过样品的包埋孔中，小心将样品按到底，摆放好位置。记录各样品对应包埋块编号。7. 梯度温度聚合包埋1) 37℃烘箱中12 h，期间定时观察样品有无漂移现象，如有，则再次小心摆放样品位置。2) 45℃烘箱中12 h。3) 60℃烘箱中24 h。四、 修块与切片1. 拿到包埋块后检查样品位置是否得当，选取位置好的包埋块优先进行修块、切片。2. 粗修包埋块1) 使用六角扳手将包埋块固定在样品头上，露出长度合适。2) 将样品头固定在修块机上，体视镜观察修块，分四个方向将包埋块头部多余的包埋剂修去，暴露出组织块。3) 使用锋利的单面刀片修去组织块周围毛刺的包埋剂，使其四边光滑清晰。4) 卸下样品头装至切片机上，使用玻璃刀修片，直至样品表面光滑清晰。3. 半薄切片1) 将粘有水槽的玻璃刀装至切片机刀台上，体视镜下小心对刀，不时转动手轮，使样品上下移动，调整刀台左右角度及样品上下角度，直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮，使整个样品高于刀刃，点控制面板Start，设置切片区域上边界；转动手轮，使整个样品低于刀刃，点控制面板End，设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品，至出现彩色干涉光，继续步进刀台，并通过体视镜观察干涉光谱变化，直至干涉光消失。4) 转动手轮，使样品离开刀刃区域，使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中，体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度，按控制面板Run/Stop键，开始切片。体视镜观察可见900nm厚度切片反光为亮绿色。6) 待有切片下来形成4-6片的切片带，按Run/Stop键停止切片，体视镜观察下，使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃，并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域，根据水膜表面张力捞取切片，放到干净载玻片上，酒精灯略微加热，使水蒸干，并对着光亮用记号笔标示切片所在位置。4. 半薄切片染色1) 吸取20μL甲苯胺蓝染液，滴加到载玻片放有切片的位置，室温静置30 s 。2) 去离子水冲洗玻片，直至不再有蓝色。吸水纸上沥干，酒精灯略微加热，加速切片上的水分蒸发。3) 显微镜观察切片质量和样品位置。5. 精修包埋块1) 移去装有水槽的玻璃刀，取下装有包埋块的样品头，装至修块机上。2) 根据半薄切片结果，使用新的锋利刀口，小心修理包埋块四边，使其尽可能的光滑、平整。6. 超薄切片1) 将钻石刀装至切片机刀台上，体视镜下小心对刀，不时转动手轮，使样品上下移动，调整刀台左右角度及样品上下角度，直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮，使整个样品高于刀刃，点控制面板Start，设置切片区域上边界；转动手轮，使整个样品低于刀刃，点控制面板End，设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品，至出现彩色干涉光，转动手轮，使样品上下移动，调整刀台左右角度及样品上下角度，直至包埋块整个表面与刀刃的干涉光谱颜色一致；继续步进刀台，并通过体视镜观察干涉光谱变化，直至干涉光消失。4) 转动手轮，使样品离开刀刃区域，使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中，体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度，按控制面板Run/Stop键，开始切片。体视镜观察可见70nm厚度切片反光为亮灰色及浅灰色。6) 待有切片下来形成10-20片的切片带，按Run/Stop键停止切片，体视镜观察下，使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃，并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域，根据水膜表面张力捞取切片，轻轻放到干净载膜铜网上，用尖角滤纸靠近铜网边缘缓慢吸干水分。8) 轻轻移去捞片环，将载有切片的铜网放到铺有滤纸的平皿中，晾干待染色观察。五、 染色1. 醋酸双氧铀染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液，13 200 rpm离心5 min。2) 将放有切片的载网小心放到染色盘上，有切片面靠上，并稍微用镊子按载网边缘，使其与染色盘接触粘附牢固。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面，盖上平皿防尘，室温染色30 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中，轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘，更换水洗液，轻摇清洗5min。6) 重复清洗2次。2. 柠檬酸铅染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液，13 200 rpm离心5 min。④2) 在放置染色盘的平皿中放入2片固体NaOH，用以吸收平皿中CO2气体。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面，盖上平皿防尘，室温染色8 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中，轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘，更换水洗液，轻摇清洗5min。连续染色时，载网不需要从染色盘上拿下，清洗后直接进行铅染即可，但是铅染液要现用现取。6) 重复清洗2次。7) 小心夹取载网，放置到铺有滤纸的干净平皿中，晾干待电镜观察。六、 电镜观察1. 取出样品杆，打开样品夹，小心放入载网，合上样品夹，并转动样品杆，轻敲确保样品夹已准确固定载网。2. 将样品杆插入透射电镜样品室，开始抽气。3. 打开灯丝开关，等待检测电流出现后，打开观察窗开始观察。4. 先在低倍下找到切片，再高倍观察切片，寻找待看目标，仔细对焦。5. 将切片目标区域遇到观察窗中间后，调整灯丝电流密度为3.8 pA/cm2。6. 插入拍照CCD，Start View，微调焦距，Start Acquire 拍照。7. 拍照完毕，按格式需求保存照片到指定文件夹。8. 使用专用写保护闪存盘拷贝数据到公共电脑观察、使用。三、应用领域1、材料领域材料的微观结构对材料的力学、光学、电学等物理化学性质起着决定性作用。透射电子显微镜作为材料表征的重要手段，不仅可以用衍射模式来研究晶体的结 构，还可以在成像模式下得到实空间的高分辨像，即对材料中的原子进行直接成像，直接观察材料的微观结构。2、物理学领域在物理学领域中，电子全息术能够同时提供电子波的振幅和相位信息，从而使透射电子显微镜在磁场和电场分布等与相位密切相关的研究上得到广泛应用。目前，透射电子显微镜结合电子全息已经应用在测量半导体多层薄膜结构器件的电场分布、磁性材料内部的磁畴分布等方面。3、化学领域在化学领域，原位透射电子显微镜因其超高的空间分辨率为原位观察气相、液相化学反应提供了一种重要的方法。利用原位透射电子显微镜进一步理解化学反应的机理和纳米材料的转变过程，以期望从化学反应的本质理解、调控和设计材料的合成。目前，原位电子显微技术已在材料合成、化学催化、能源应用和生命科学领域发挥着重要作用。透射电子显微镜可以在极高的放大倍数下直接观察纳米颗粒的形貌和结构，是纳米材料Z常用的表征手段之一。4、生物学领域在生物学领域，X射线晶体学技术和核磁共振常被用来研究生物大分子的结构，已经能够将蛋白质的位置精度确定到0.2nm，但是其各有局限。X射线晶体学技术基于蛋白质晶体，研究的常常是分子的基态结构，而对解析分子的激发态和过渡态无能为力。生物大分子在体内常常发生相互作用并形成复合物而发挥作用，这些复合物的结晶化非常困难。核磁共振虽然能够获得分子在溶液中的结构并且能够研究分子的动态变化，但主要适合用来研究分子量较小的生物大分子。

数字PCR是第三代PCR技术，和qPCR技术相比具有灵敏度高、精准度高、对抑制剂耐受性更强等优势，不依赖于标准品和标准曲线，并可直接对起始核酸进行绝对定量，尤其适用于对低丰度样品的检测。目前，数字PCR在医学、制药、环境、食品检测等多个领域展现出了良好的应用前景。集多重优势于一体的数字PCR实验该如何实施呢？今天呢，我们就一起来看一下数字PCR实验的第一步：模板的制备。图源：gene-π数字PCR学习网站模板制备是数字PCR实验成功的关键一步。模板提取、质量控制、避免污染和保存都是模板制备过程中的重要因素。1、清除环境污染大多数Taq聚合酶的敏感性都比较高，一旦存在污染可能会发生外源DNA扩增并影响整个实验。而外界环境中存在多种污染源，因此必须遵守严格的实验规程并做好清除污染措施。为了避免DNA污染，应遵循以下常规PCR建议：☑ 定期使用3%漂白剂溶液和水/乙醇清洁实验室工作台和设备，或根据应用情况使用DNase/RNase；☑ 尽可能将管盖好；☑ 涡旋后进行离心；☑ 设置无模板对照。2、模板提取数字PCR的DNA和RNA模板提取方法与实验室中各种提取方法是兼容的，包括苯酚氯仿法,各种试剂盒提取方法。☑ 在提取过程中，尽量简化步骤，缩短提取时间；☑ 减少化学因素对核酸的降解；☑ 减少物理因素对核酸的降解，如机械剪切力和高温；☑ 防止核酸的生物降解。3、质量控制模板提取之后，我们需要对模板的纯度和质量进行检测，以保证得到最佳的实验效果。例如分光光度法可以验证提取的DNA溶液的良好吸光度(A260/280)的比例。常用的方法还有PicoGreen荧光染料定量检测、琼脂糖凝胶电泳、毛细管凝胶电泳和3' ：5' 分析等，尽量避免污染物和潜在抑制剂的存在。4、保存提取的DNA模板的存储也是一个重要的监控因素。保存时需要避免核酸降解，如胞嘧啶脱氨和8-Oxo-2' -脱氧鸟苷的形成，因为氧化损伤可能导致在PCR扩增过程中的碱基转位。缓冲液和温度条件对样品的质量也有影响，一般提取的DNA模板用TE溶解并-20℃保存。除了上述这些，样本本身固有的其他参数也可能会对数字PCR实验产生影响：A 、富含GC的模板因为GC键非常稳定，如果模板包含富含GC的区域可能导致模板不能完全扩增。因此，为了使模板获得更好的变性，可以尝试在PCR混合物中添加DMSO或甜菜碱。B、高分子量DNA与qPCR一样，模板的复杂性可能会影响检测性能，例如质粒和长片段基因组DNA。对DNA片段进行限制性酶切可以平衡模板差异，并防止对目标分子的低估。但要保证扩增子序列中不能有酶切位点，对已经片段化的DNA(例如来自福尔马林固定、石蜡包埋组织或细胞游离的DNA)进行酶切可能导致信号丢失。通常高分子量的DNA或质粒作为模板可能会影响阴阳性微滴分区，建议在进行数字PCR之前使用化学或酶切方法进行DNA剪切，而且剪切步骤可以直接在PCR mix中进行。C、DNA拷贝数的转换在数字PCR实验中，需要对模板浓度进行检测，以避免浓度过高造成检测结果饱和（全部都是阳性微滴）。当浓度足够高时，常用的方法如荧光法和分光光度法，可用于定量核酸，从而初步预估使用数字PCR的适合测量浓度。值得注意的是，这种方法测量的是组成核酸碱基单位体积的质量。因此，使用测量质量的方法来确定基因组拷贝数，需要进行相应的换算。当以质量为基础的核酸定量与dPCR结果进行比较时，或从任何用于计算分子拷贝数的方法中得出的结果时，必须包括用于计算基因组分子量的清晰描述，以及用于计算该值的方法。在数字PCR中，DNA拷贝数的计算只需要知道被研究基因组的质量，然后应用以下公式即可：反应体积中拷贝数=反应体积DNA质量(ng)/研究基因组质量(ng) 。这里还有在线网站供大家参考：http://cels.uri.edu/gsc/cndna.html详情可参考深蓝云公众号的推文：技术小站 | 浓度到拷贝数的换算。D、逆转录酶在逆转录酶数字PCR (RT-dPCR)中，RNA转录本需通过一步法或者两步法转化为互补DNA (cDNA)进行使用。在一步法中，逆转录和PCR均在同一分区中按顺序排列。即使每个RNA分子产生多个cDNA拷贝，结果也不会被高估。在两步法中，先进行批量转录，然后对cDNA进行微滴分区，在单独的反应中进行dPCR。逆转录酶的步骤可能是一个主要的错误来源，应在实验设计中考虑。通过上述的介绍，大家是不是发现数字PCR的模板制备并没有那么复杂呀，感兴趣的小伙伴可以先把模板制备好，然后联系我们，赶紧来体验一下数字PCR的魅力吧。快速学习网址：足不出户，网页自动翻译让您轻松快速掌握Gene π数字PCR学堂。参考文献：1 Cai, Y., Li, X., Lv, R., Yang, J., Li, J., He, Y., & Pan, L. Quantitative Analysis of Pork and Chicken Products by Droplet Digital PCR. BioMed Research International, 2014, 810209. http://doi.org/10.1155/2014/810209. PMID: 252431842 Pérez-Barrios, C., Nieto-Alcolado, I., Torrente, M., Jiménez-Sánchez, C., Calvo, V., Gutierrez-Sanz, L., Palka, M., Donoso-Navarro, E., Provencio, M., Romero, A. Comparison of methods for circulating cell-free DNA isolation using blood from cancer patients: impact on biomarker testing. Transl Lung Cancer Res. 2016 Dec 5(6):665-672. doi: 10.21037/tlcr.2016.12.03. PMID: 281497603 Demeke, T., Malabanan, J., Holigroski, M., Eng, M. Effect of Source of DNA on the Quantitative Analysis of Genetically Engineered Traits Using Digital PCR and Real-Time PCR. J AOAC Int. 2017 Mar 1 100(2):492-498. doi: 10.5740/jaoacint.16-0284. Epub 2016 Dec 22. PMID: 281181374 Holmberg, R.C., Gindlesperger, A., Stokes, T., Lopez, D., Hyman, L., Freed, M., Belgrader, P., Harvey, J., Li, Z. Akonni TruTip and Qiagen Methods for Extraction of Fetal Circulating DNA-Evaluation by Real-Time and Digital PCR. PLoS One. 2013 Aug 6 8(8):e73068. doi: 10.1371/journal.pone.0073068. Print 2013. PMID: 23936545.5 Rajasekaran, N., Oh, M. R., Kim, S.-S., Kim, S. E., Kim, Y. D., Choi, H.-J., Byum, B., Shin, Y. K. Employing Digital Droplet PCR to Detect BRAF V600E Mutations in Formalin-fixed Paraffin-embedded Reference Standard Cell Lines. Journal of Visualized Experiments : JoVE, 2015, (104), 53190. Advance online publication. http://doi.org/10.3791/53190. PMID: 26484710.6 Devonshire, A. S., Whale, A. S., Gutteridge, A., Jones, G., Cowen, S., Foy, C. A., & Huggett, J. F. Towards standardisation of cell-free DNA measurement in plasma: controls for extraction efficiency, fragment size bias and quantification. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2014, 406(26), 6499–6512. http://doi.org/10.1007/s00216-014-7835-3. PMID: 24853859.7 Group T D , Huggett J F . The Digital MIQE Guidelines Update: Minimum Information for Publication of Quantitative Digital PCR Experiments for 2020[J]. Clinical Chemistry(8):8.

GenePure Pro 是采用磁珠分离技术，选择相应的试剂盒就可以自动地从多种样品材料如血液、组织、细胞中分离纯化高纯度的核酸。整个仪器结构设计精巧，透明的工作腔便于观察工作情况；大屏幕液晶面板，美观大方，操作简单；完善的保护功能，使用安全，更可靠。是临床基因检测和分子生物学实验室学科研究的得力“助手”。产品特点1. 高效率 全磁棒和振幅动态调整技术，可应对各类微小磁珠，做到提取磁珠无残留无挂壁现象。2. 精控温 全包裹性更全面的深孔条加热，可大幅降低管内温度和设定温度的温差，提升裂解和洗脱效率。3. 安全性 一次性提取套管及紫外灭菌灯，避免不同批次间的气溶胶污染，减少操作危险。4. 智能化 独特驾驶舱面板的UI设计，可一次性展示设备运行的所有参数，易于理解和操作。5. 多样化 可通过更换加热以及磁棒模块，实现32孔通量向48孔通量的提升。6. 标准化 可根据需要编辑多个运行程序，且具备大存储内核，保证实验的条件统一，结果重复性良好。工作原理图产品应用案例1：组织以及石蜡包埋组织基因组DNA提取 博日新品GenePure Pro与博日磁珠法提取试剂盒完美匹配，无论是组织的DNA提取还是实验难度系数较大的石蜡包埋组织的提取，都能得到很好的效果。案例所用试剂MagaBio plus组织基因组DNA提取试剂盒magaBio 石蜡包埋组织基因组DNA提取试剂盒案例2：病毒DNA/RNA/DNA&RNA 提取 博日新品GenePure Pro与博日磁珠法提取试剂盒完美匹配，无论是组织的DNA提取还是实验难度系数较大的石蜡包埋组织的提取，都能得到很好的效果。案例所用试剂MagaBio plus组织基因组DNA提取试剂盒magaBio 石蜡包埋组织基因组DNA提取试剂盒案例3：口腔拭子、全血、干血斑基因组的提取 博日新品Gene Pure Pro以及博日自主研发的试剂盒全力的解决从全血、血浆、干血斑以及口腔拭子的核酸的提取到检测的问题。案例使用以及相关试剂盒MagaBio 干血斑基因组DNA纯化试剂盒MagaBio 血浆游离DNA提取试剂盒MagaBio 口腔拭子基因组DNA纯化试剂盒MagaBio Plus全血基因组DNA纯化试剂盒 杭州博日科技有限公司是一家专业从事生命科学仪器和试剂研发、生产、销售及服务的企业。

质谱成像用于可视化斑马鱼体内富勒醇的组织分布 碳纳米材料和纳米技术设备的应用日益广泛，而纳米颗粒具有潜在生物活性，可能会干扰正常的生物系统，从而引起公众对纳米颗粒潜在风险的关注。碳纳米材料在水生生物体内的累积、食物链的营养传递和生物放大潜力是其生态风险评价的重要环节。富勒醇是一种碳纳米材料，可通过水相暴露和食物链在大蚤体内累积，表明其对生态系统有潜在的不利影响，引起人们对富勒醇环境毒理学研究的关注。 本研究选择斑马鱼作为实验对象，利用基质辅助激光解吸电离成像质谱(MALDI-TOF-IMS）研究富勒醇纳米颗粒通过水相暴露途径在斑马鱼不同组织内的空间分布。 1. 成像质谱显微镜测试条件将冷冻斑马鱼组织包埋在0.1g/L明胶中进行冷冻切片，厚度为20 μm，将组织切片放置在ITO导电载玻片上，干燥40 min后进行成像质谱分析。采集参数如下：采集模式，正离子模式 采集范围m/z 500-1000；检测器电压，1.80 kV。激光直径10 μm，频率1000 Hz，强度30。 2. 基于成像质谱显微镜的组织成像研究2.1富勒醇纳米颗粒的MALDI-TOF质谱分析对富勒醇纳米颗粒的离子化条件进行摸索，a-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA）和2,5-二羟基苯甲酸（DHB）是用于多肽、脂质、碳水化合物、蛋白质分析的常用基质。富勒醇纳米颗粒在使用CHCA与DHB作为基质检测时，未获得对应分子离子峰。富勒醇纳米颗粒对电离源中激光有较强的吸收，并促进电离，实验证明富勒醇纳米颗粒在正离子模式下产生C60+ 离子。因此，本研究中可采用激光解吸离子化方式(LDI)直接检测富勒醇纳米颗粒。图1显示了正、负离子模式下富勒醇纳米颗粒的质谱图，m/z 720.0和721.0离子分别对应C60+和[C60+H]+。其它离子可能与碳笼的光致电离片段对应，如C58+ (m/z 696.0)、C56+ (m/z 672.0)、C54+(m/z 648.0)、C52+ (m/z 24.0)、C50+ (m/z 600.0)、C48+ (m/z 576.0)、 C46+ (m/z 552.0)、C44+ (m/z 528.0)、C42+ (m/z 504.0)。C2基团丢失是C60分子离子的特征裂解方式。根据上述结果，选择m/z 720.00和721.00作为特征离子进行质谱成像分析。图1 富勒醇纳米颗粒的MALDI-TOF质谱图：a）负离子模式，b）正离子模式，c）b图的局部放大 2.2 斑马鱼组织中富勒醇纳米颗粒的质谱成像分析对富勒醇纳米颗粒暴露的斑马鱼组织切片进行MALDI-TOF-MSI分析，获得不同组织中的分布信息。研究显示富勒醇纳米颗粒在鱼鳃的分布最多，其次是肠、肌肉和脑。 富勒醇纳米颗粒在鱼鳃中主要分布在鳃丝部分。同时观察到富勒醇纳米颗粒存在于肠壁组织。肠腔内吸收细胞的游离端-细胞质内的胞饮囊泡为富勒醇纳米颗粒进入肠壁细胞提供可能，从而为富勒醇纳米颗粒进入循环系统和通过肠血途径进一步进入体内其他组织提供先决条件。 肌肉组织中富勒醇纳米颗粒的存在表明其可通过循环系统运输到肌肉组织。此外，在脑部也观察到富勒醇纳米颗粒信号，表明富勒醇纳米颗粒可最终通过循环系统并穿透血脑屏障到达脑部。 富勒醇纳米颗粒在斑马鱼组织中的分布差异可能与暴露途径有关。鳃是呼吸、渗透调节和排泄的场所，是直接接触和吸收周围水中污染物的器官。水相暴露导致鳃直接接触和吸收暴露溶液中的富勒醇纳米颗粒；此外生物组织的独特结构如血脑屏障等也可能影响富勒醇纳米颗粒的分布。因此，从毒性风险的角度分析，鳃是最危险的暴露组织。 图2 斑马鱼组织切片中富勒醇纳米颗粒的MALDI-TOF质谱成像图：分别显示在鳃、肠、脑和肌肉组织中的分布 本研究详细内容已正式发表于Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2020, 412: 7649-7658. 文献题目《Visualization of the tissue distribution of fullerenols in zebrafish (Danio rerio) using imaging mass spectrometry》 使用仪器岛津iMScope TRIO 作者Qiuyue Shi1,2 , Cheng Fang3,4 , Zixing Zhang1 , Changzhou Yan1 , Xian Zhang1 1 Key Laboratory of Urban Environment and Health, Institute of Urban Environment, Chinese Academy of Sciences, Xiamen 361021, China2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China3 Global Centre for Environmental Remediation, University of Newcastle, Callaghan, NSW 2308, Australia4 Cooperative Research Centre for Contamination Assessment and Remediation of the Environment, University of Newcastle, Callaghan, NSW 2308, Australia

仪器信息网讯 &ldquo 2015全国生物医学农林电镜技术研讨会暨生物电镜前沿技术培训班&rdquo 日前在浙江大学举行。本次会议由中国电子显微镜学会生物医学电镜专业委员会和农林电镜专业委员会主办，浙江大学农生环测试中心与德国徕卡公司联合承办。　　本次会议特别邀请了国内外知名专家教授和电镜工作者讲授生物电子显微镜技术的最新发展，交流生物样品制备和应用方面的技术经验，并安排部分学员参加实验操作及演示。报告人：北京大学生命科学学院 贺新强教授　　冷冻蚀刻(Freezeetching)技术是从50年代开始发展起来的一种将冷冻断裂和复型相结合的透射电镜样品制备技术。样品经冷冻断裂蚀刻后，能够观察到不同劈裂面的微细结构，进而可研究细胞内的膜性结构及内含物结构。北京大学贺新强教授在报告中介绍了课题组利用冷冻蚀刻技术在植物细胞壁研究中的一些应用。利用该技术可以清晰地观察到细胞壁的空间立体结构。报告人：北京大学第一医院 王素霞教授　　电镜诊断学或超微病理学是通过电子显微镜技术，观察组织细胞的超微结构及其病理变化，对疾病做出病理诊断。王素霞教授从超微病理学的特点、超微病理诊断的局限性及其诊断的临床应用，结合诊断电镜样本的处理、电镜超微病理图像研判等方面介绍了医学电镜病理诊断的技术要点与诊断原则。报告人：云南农科院植物病毒与种质资源研究所张仲凯教授　　张仲凯教授在报告中从负染色观察的优势、负染色制样方法、与其他实验结果的比较验证、Tospovirus不同电镜制样方法的超微结构比较等几个方面介绍了植物病毒样品负染色制样及电镜观察分析。报告人：华东师范大学 倪兵教授　　倪兵教授从样品的收集、制样工具的准备、样品制备技术等方面介绍了原生动物纤毛虫的形态学研究技术。据介绍，由于传统的制样过程时间长，而且样品经化学固定-脱水-干燥等步骤，会产生许多假象，如坍塌、细胞收缩等，而冷冻制样技术则能避免这些问题。在报告中，倪兵详细介绍了冷冻扫描电镜技术在原生动物形态观察中的应用。报告人：浙江大学生物技术研究所 胡东维教授　　胡东维教授通过包埋剂的选择、探针的选择、低温包埋的程序、标记方法、免疫金标记的对照方法、标记结果的判断等几个方面，详细介绍了超薄切片包埋后免疫金标记技术的具体制样步骤和注意要点。报告人：第二军医大学 杨勇骥教授　　杨勇骥教授从成功进行胶体金标记的重要关键点、如何设计包埋前免疫标记程序、包埋前免疫标记技术的优缺点等几个方面,介绍了生物样品包埋前免疫金标记技术。报告人：福建中医药大学 陈文列教授　　透射电镜常规制样周期长，是影响电镜技术在临床病理诊断中应用的制约因素之一。微波可用含水试剂和有极性试剂的作用，缩短样品制备的周期。陈文列教授从微波固定仪器的原理、微波炉的选择，在制样过程中影响微波作用的因素、实验注意事项，以及电镜样品微波聚合方法、微波电子染色、微波快速脱钙等应用实例详细介绍了微波技术在透射电镜样品制备方面的应用。　　另外，在本次研讨会上关于电镜技术具体应用实例的报告有：中科院遗传所的梁晶晶介绍的《秀丽线虫的透射电镜制样与观察》 北京大学生命科学学院的单春燕博士介绍的《泛素化修饰调节APP在体内-溶酶体系统的膜泡分选》 清华大学李英博士介绍的《生物样品光镜-电镜联用技术应用》等报告。　　关于电镜制样技术的相关报告有：北京大学生命科学学院仪器中心王国鹏博士的《高压冷冻制样技术探索》 北京大学生命科学学院仪器中心胡迎春博士的《基于超薄连续切片的TEM三维重构技术》等报告。

详细信息 漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目公开招标招标公告 福建省-漳州市-芗城区 状态：公告 更新时间： 2023-11-22 招标文件: 附件1 项目概况 受漳州市卫生健康委员会委托，福建国诚招标有限公司对[350601]FJGC[GK]2023005、漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目组织公开招标，现欢迎国内合格的供应商前来参加。漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目的潜在投标人应在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目获取采购文件，并于2023年12月15日 09时00分00秒（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：[350601]FJGC[GK]2023005 项目名称：漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目 采购方式：公开招标 预算金额：5,940,000.00元 采购包1(全自动组织脱水机): 采购包预算金额：600,000.00元 采购包最高限价： 600,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 1-1 A02321900-临床检验设备 全自动组织脱水机 2(台、套) 否 用于手术切除组织自动按程序浸入各种溶剂进行脱水、透明、浸蜡等病理分析前处理； 600,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包2(激光包埋盒打号机): 采购包预算金额：500,000.00元 采购包最高限价： 470,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 2-1 A02321900-临床检验设备 激光包埋盒打号机 2(台、套) 否 激光打印；可以打印≥8行各类数字、字符及汉字；打印出的字迹清晰不褪色耐刮擦。 500,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包3(超低温-80℃冰箱): 采购包预算金额：500,000.00元 采购包最高限价： 500,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 3-1 A02321900-临床检验设备 超低温-80℃冰箱 5(台、套) 否 质控菌株及样本菌株保存及溯源，核酸标本保存，各组质控品、科研标本低温保存 500,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包4(纯水设备): 采购包预算金额：600,000.00元 采购包最高限价： 600,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 4-1 A02321900-临床检验设备 纯水设备 2(台、套) 否 检验科仪器纯水供应 600,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包5(洗板机): 采购包预算金额：840,000.00元 采购包最高限价： 480,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 5-1 A02321900-临床检验设备 洗板机1 2(台、套) 否 酶联免疫检测使用 600,000.00 工业 5-2 A02321900-临床检验设备 洗板机2 3(台、套) 否 酶联免疫检测使用 240,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包6(显微镜): 采购包预算金额：1,600,000.00元 采购包最高限价： 1,600,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 6-1 A02321900-临床检验设备 显微镜 8(台、套) 否 用于临床中手术切取、钳取、细针穿刺等手段,获得的组织或细胞,在显微镜下给予对其组织切片进行病理诊断，三目观察镜筒，倾角可调节，需配置摄像头；高分辨率物镜六个镜头2X/4X/10X/20X/40X/60X六个镜头。 1,600,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包7(小通量数字病理扫描仪): 采购包预算金额：750,000.00元 采购包最高限价： 710,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 7-1 A02321900-临床检验设备 小通量数字病理扫描仪 2(台、套) 否 用于病理切片数字扫描。配置：切片扫描仪 1图像扫描软件 1图像浏览软件 1扫描控制计算机 1图像分析软件 1 750,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包8(切片机): 采购包预算金额：550,000.00元 采购包最高限价： 540,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 8-1 A02321900-临床检验设备 切片机1 1( 台、套) 否 用于快速制冷样本，并在高精度切片系统的支撑下时行切片；双压缩机制冷工作，冷冻箱、样本头精确控温；具有样本回缩功能；冷冻台制冷点位：≥24个。 350,000.00 工业 8-2 A02321900-临床检验设备 切片机2 1( 台、套) 否 用于病理学免疫实验室，切片及修片选择提供更好的厚度选择（包含切片机、摊片机、冷冻台）。标配2刀头。 200,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 采购包1： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包2： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包3： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包4： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包5： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包6： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包7： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包8： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 3.本项目的特定资格要求： 采购包1： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包2：无 采购包3： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包4：无 采购包5：无 采购包6： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包7： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包8： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 三、采购项目需要落实的政府采购政策 进口产品：执行《政府采购进口产品管理办法》，允许进口产品参加投标的品目详见《采购标的一览表》 节能产品：按照《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》财库〔2019〕9号等规定执行。 环境标志产品：按照《市场监管总局关于发布参与实施政府采购节能产品、环境标志产品认证机构名录的公告》（2019年第16号）等规定执行。四、获取招标文件 时间： 2023-11-22 至 2023-12-07 ，（提供期限自本公告发布之日起不得少于5个工作日），每天上午00:00:00至12:00:00，下午12:00:00至23:59:59（北京时间，法定节假日除外） 地点：招标文件随同本项目招标公告一并发布；投标人应先在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目下载招标文件(请根据项目所在地，登录对应的(省本级/市级/区县)）福建省政府采购网上公开信息系统操作)，否则投标将被拒绝。 方式：在线获取 售价：免费五、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2023-12-15 09:00:00（北京时间）（自招标文件开始发出之日起至投标人提交投标文件截止之日止，不得少于20日） 地点：福建省漳州市芗城区打锡巷(小吃街)47号商会大厦5层1号开标室（漳州）(国诚招标）六、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。七、其他补充事宜 无 八、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称：漳州市卫生健康委员会 地址：漳州市芗城区胜利西路154号 联系方式：0596-23024502.采购代理机构信息（如有） 名称：福建国诚招标有限公司 地址：古田路中美大厦二十四层东单元 联系方式：0596-28796163.项目联系方式 项目联系人：罗建英 电话：0596-2879616 网址： zfcg.czt.fujian.gov.cn 开户名：福建国诚招标有限公司 福建国诚招标有限公司 2023年11月22日 相关附件： 漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目-文件集.zip × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：洗板机,数字切片扫描,切片机,超低温冰箱 开标时间：2023-12-15 09:00 预算金额：594.00万元 采购单位：漳州市卫生健康委员会 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：福建国诚招标有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目公开招标招标公告 福建省-漳州市-芗城区 状态：公告 更新时间： 2023-11-22 招标文件: 附件1 项目概况 受漳州市卫生健康委员会委托，福建国诚招标有限公司对[350601]FJGC[GK]2023005、漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目组织公开招标，现欢迎国内合格的供应商前来参加。漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目的潜在投标人应在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目获取采购文件，并于2023年12月15日 09时00分00秒（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：[350601]FJGC[GK]2023005 项目名称：漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目 采购方式：公开招标 预算金额：5,940,000.00元 采购包1(全自动组织脱水机): 采购包预算金额：600,000.00元 采购包最高限价： 600,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 1-1 A02321900-临床检验设备 全自动组织脱水机 2(台、套) 否 用于手术切除组织自动按程序浸入各种溶剂进行脱水、透明、浸蜡等病理分析前处理； 600,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包2(激光包埋盒打号机): 采购包预算金额：500,000.00元 采购包最高限价： 470,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 2-1 A02321900-临床检验设备 激光包埋盒打号机 2(台、套) 否 激光打印；可以打印≥8行各类数字、字符及汉字；打印出的字迹清晰不褪色耐刮擦。 500,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包3(超低温-80℃冰箱): 采购包预算金额：500,000.00元 采购包最高限价： 500,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 3-1 A02321900-临床检验设备 超低温-80℃冰箱 5(台、套) 否 质控菌株及样本菌株保存及溯源，核酸标本保存，各组质控品、科研标本低温保存 500,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包4(纯水设备): 采购包预算金额：600,000.00元 采购包最高限价： 600,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 4-1 A02321900-临床检验设备 纯水设备 2(台、套) 否 检验科仪器纯水供应 600,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包5(洗板机): 采购包预算金额：840,000.00元 采购包最高限价： 480,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 5-1 A02321900-临床检验设备 洗板机1 2(台、套) 否 酶联免疫检测使用 600,000.00 工业 5-2 A02321900-临床检验设备 洗板机2 3(台、套) 否 酶联免疫检测使用 240,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包6(显微镜): 采购包预算金额：1,600,000.00元 采购包最高限价： 1,600,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 6-1 A02321900-临床检验设备 显微镜 8(台、套) 否 用于临床中手术切取、钳取、细针穿刺等手段,获得的组织或细胞,在显微镜下给予对其组织切片进行病理诊断，三目观察镜筒，倾角可调节，需配置摄像头；高分辨率物镜六个镜头2X/4X/10X/20X/40X/60X六个镜头。 1,600,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包7(小通量数字病理扫描仪): 采购包预算金额：750,000.00元 采购包最高限价： 710,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 7-1 A02321900-临床检验设备 小通量数字病理扫描仪 2(台、套) 否 用于病理切片数字扫描。配置：切片扫描仪 1图像扫描软件 1图像浏览软件 1扫描控制计算机 1图像分析软件 1 750,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 采购包8(切片机): 采购包预算金额：550,000.00元 采购包最高限价： 540,000.00元 投标保证金：0元 采购需求：（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等） 品目号 品目编码及品目名称 采购标的 数量（单位） 允许进口 简要需求或要求 品目预算(元) 中小企业划分标准所属行业 8-1 A02321900-临床检验设备 切片机1 1( 台、套) 否 用于快速制冷样本，并在高精度切片系统的支撑下时行切片；双压缩机制冷工作，冷冻箱、样本头精确控温；具有样本回缩功能；冷冻台制冷点位：≥24个。 350,000.00 工业 8-2 A02321900-临床检验设备 切片机2 1( 台、套) 否 用于病理学免疫实验室，切片及修片选择提供更好的厚度选择（包含切片机、摊片机、冷冻台）。标配2刀头。 200,000.00 工业 本采购包不接受联合体投标 合同履行期限：合同签订后 (60 ) 天内交货 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 采购包1： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包2： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包3： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包4： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包5： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包6： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包7： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 采购包8： 本采购包为专门面向中小企业采购，投标人须提供中小企业声明函。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 3.本项目的特定资格要求： 采购包1： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包2：无 采购包3： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包4：无 采购包5：无 采购包6： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包7： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 采购包8： (1)所投货物若属于医疗器械管理范畴，按照国家《医疗器械监督管理条例》，应符合以下标准：①投标人为生产企业的，投标货物若属于第一类医疗器械产品，须提供第一类医疗器械生产备案凭证，投标货物若属于第二类、三类医疗器械产品，须提供医疗器械生产许可证；投标人为经营企业的，投标货物若属于第三类医疗器械产品，须提供医疗器械经营许可证，投标货物若属于第二类医疗器械产品，须提供第二类医疗器械经营备案凭证，投标货物若属于第一类医疗器械产品，则无须提供此项；②投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品须提供第一类医疗器械产品备案凭证，属于第二类、第三类医疗器械产品则须提供完整的医疗器械注册证。所有证件必须真实、有效。。 三、采购项目需要落实的政府采购政策 进口产品：执行《政府采购进口产品管理办法》，允许进口产品参加投标的品目详见《采购标的一览表》 节能产品：按照《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》财库〔2019〕9号等规定执行。 环境标志产品：按照《市场监管总局关于发布参与实施政府采购节能产品、环境标志产品认证机构名录的公告》（2019年第16号）等规定执行。四、获取招标文件 时间： 2023-11-22 至 2023-12-07 ，（提供期限自本公告发布之日起不得少于5个工作日），每天上午00:00:00至12:00:00，下午12:00:00至23:59:59（北京时间，法定节假日除外） 地点：招标文件随同本项目招标公告一并发布；投标人应先在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目下载招标文件(请根据项目所在地，登录对应的(省本级/市级/区县)）福建省政府采购网上公开信息系统操作)，否则投标将被拒绝。 方式：在线获取 售价：免费五、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2023-12-15 09:00:00（北京时间）（自招标文件开始发出之日起至投标人提交投标文件截止之日止，不得少于20日） 地点：福建省漳州市芗城区打锡巷(小吃街)47号商会大厦5层1号开标室（漳州）(国诚招标）六、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。七、其他补充事宜 无 八、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称：漳州市卫生健康委员会 地址：漳州市芗城区胜利西路154号 联系方式：0596-23024502.采购代理机构信息（如有） 名称：福建国诚招标有限公司 地址：古田路中美大厦二十四层东单元 联系方式：0596-28796163.项目联系方式 项目联系人：罗建英 电话：0596-2879616 网址： zfcg.czt.fujian.gov.cn 开户名：福建国诚招标有限公司 福建国诚招标有限公司 2023年11月22日 相关附件： 漳州市卫生健康委员会(漳州市医用设备集中采购工作小组办公室)全自动组织脱水机等设备统招分签采购项目-文件集.zip

生命科学基础研究与人类健康和社会经济发展密切相关，在科学和经济社会领域中的重要性日渐增强。Science 曾发布125 个挑战全球科学界的重要基础问题，其中涉及生命科学的问题约占 54%。生命科学研究过程离不开各类科学仪器的帮助，今年，仪器信息网特别策划话题：“生命科学技术平台经验分享”，邀请高校、科研院所公共技术平台的老师分享技术心得和经验，方便生命科学领域研究人员了解相关技术进展、学习仪器使用方法。本篇由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心电镜技术平台主管孔妤撰写，她根据多年工作经验，详细介绍了电镜技术的发展，并分享了生物电镜实验的心得体会。以下为供稿内容： 电镜技术平台是中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心公共技术中心的一个重要分支，成立之初只有一台老式透射电镜，经过多年发展，目前已具备不同配置的三台电镜和全套的电镜制样设备。平台现有专业技术人员4名，最大程度地满足中心及上海地区电镜实验方面的需求。平台大型设施的建设和功能拓展是与生物电镜技术的迅猛发展、科研方向的转变息息相关的。现就生物电镜技术及在神经科学中的实践进行分享。一、电镜简介电镜的发明起源于1927年电子光学领域先驱Hans Bush的电子束聚焦理论。1932年Knoll和Ruska创造出了世界第一台透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，TEM），把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上。1940年科学家们又发明了第一台扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope，SEM），可以看到散射的电子而不是通过样品的电子。由于高速电子的波长远小于光子，电镜的分辨率远远高于光学显微镜，用于观察光镜不能分辨的细微物质结构。经历几十年的发展，透射电镜和扫描电镜在多尺度上均能实现超高分辨率的洞察力，冷冻电镜的分辨率甚至达到2.0Å或更小的原子级理论极限值。随着生物样本保存方法和超薄切片技术的建立，电镜在细胞生物学、神经生物学、病理学、结构生物学、传染病学、药学和植物学等多领域的研究中发挥着不可替代的作用。二、透射电镜技术 透射电镜由电子光学系统、真空系统和电气控制系统三部分组成，其中电子光学系统是透射电镜的核心，包括照明系统、成像系统和图像观察系统。成像原理是：在真空条件下，高压加速的电子束穿透一层很薄（通常几十至几百纳米）的样品，形成透射电子，透射电子在电磁透镜的作用下在荧光屏或相机上成像，当电子束投射到样品时，样品的原子序数越大，荧光屏上呈现的像就越暗，所以呈现出明暗不同的灰度图像。由于生物样品的组成元素都较轻，因此用重金属元素标记膜结构可以实现生物超微结构的观察。以下为我们常用的几种生物透射电镜制样技术：1.常温包埋切片技术：早期的透射电镜主要用于病毒等极小病原体的样品形貌观察，后来发展到可以通过超薄切片观察生物样品组织和细胞内的超微结构。为保存生物样品在生活状态的超微结构特征，需要使用戊二醛、甲醛或丙烯醛等醛基固定液对样品进行化学固定，由于化学固定剂存在一定的渗透速度，生物组织需要切得尽可能的小（通常1mm3左右），以保证中心部分的细胞在发生自溶前得到固定。甲醛的分子较小，能够快速地渗透到组织内部进行固定，但甲醛只有一个醛基，固定能力较弱并且固定效果可逆，所以较难渗透的样品一般采用甲醛和戊二醛混合固定液。戊二醛具有两个醛基，可以对生物组织中的蛋白质、糖类等结构进行交联固定，具有较好的固定效果，是最常用的电镜固定液。固定后的样品再经后固定、乙醇梯度脱水、树脂渗透、包埋及聚合后即可进行超薄切片。超薄切片的制备是生物电镜技术的关键，用钻石刀获得厚度一般为50-100nm切片，收集于带膜的金属载网上，经醋酸铀和柠檬酸铅染色后在透射电镜上进行观察。2.高压冷冻-冷冻替代技术(HPF-FS)：针对于一些特殊样品，单一化学固定易发生组织收缩、细胞外空间损失和细胞降解的现象，高压冷冻固定可以避免这些问题。高压冷冻是在2100bar压力下将生物样品在30毫秒内进行冷冻固定，极大限度地保存样本自然生理状态的结构特征，为研究细胞结构与功能的关系提供充分而准确的超微结构信息,避免了因化学固定引起的各种假象，同时还可以捕捉到一些光、电刺激后细胞动力学的错综变化瞬间。冷冻固定后的样品需要转移至冷冻替代仪中进行逐步回温和替代，随着温度逐渐升高，替代液中的锇酸、醋酸铀及醛类也会渗透至组织细胞中发挥固定和染色作用。HPF-FS技术虽然有着固定速度快，样品接近自然生理状态的优点，同时也存在着固定体积小（厚度不超过200μm）、易于产生冰晶损伤、设备依赖性等问题，限制了该项技术的广泛应用。3.免疫电镜技术(IEM)：基本原理类似于免疫组织化学，将电镜技术与免疫标记技术结合，通过电镜下观察到的（高电子密度）标记物如胶体金或DAB染色来标记某种特定的物质，达到对某种物质在细胞中的超微定位和对组织进行超微结构研究的目的。该技术较为复杂，包括包埋前免疫、包埋后免疫、冷冻超薄切片等不同的技术路线。路线的选择依据在于是否最大限度地保存抗原的免疫活性和组织的超微结构。不能根据这些技术出现的先后来认为其先进性，它们各具优缺点，又各有相应的适用范围。①包埋前免疫是在树脂包埋之前完成免疫标记流程。固定后的样品，经过冻融或表面活性剂处理后，增加细胞膜的通透性，之后进行一抗和二抗的标记，二抗偶联胶体金标记，或辣根过氧化物酶，辣根过氧化物酶通过过氧化物反应，将DAB底物氧化沉淀在目标位点，沉淀的DAB反应物会和之后的锇酸反应，生成特定的黑色标记。完成标记的样品经过常规的电镜包埋切片制样流程，就可以在电镜下观察超微结构和其上的特异标记。包埋前免疫技术的标记效率较高，但由于标记过程中需要增加膜的通透性，所以膜结构通常保存较差。②包埋后免疫是将固定后的样品进行树脂包埋和超薄切片，将切片收集在带支撑膜的镍网上,对镍网上的切片进行免疫胶体金标记，胶体金的粒径通常为5-20nm,使用不同粒径的二抗来实现对不同抗原的多重标记。由于制样过程中需要尽可能的保存抗原，常采用的固定剂是4%多聚甲醛+0.1～0.5%戊二醛溶液或只使用4%多聚甲醛。树脂一般选择在较低的温度（-10℃～50℃）下进行紫外聚合的LR-white,LR-Gold或K4M,HM20等丙烯酸盐类树脂。HPF-FS技术也可用于包埋后免疫电镜的制样，能明显提高样品结构和抗原的保存效果。③冷冻超薄切片是将固定后的样品在-120℃进行冷冻超薄切片（50-100nm），捞于镍网上再进行胶体金免疫标记。标记后的样品用醋酸铀染色并用甲基纤维素封片后就可以进行电镜观察。由于不需要有机溶剂脱水和树脂包埋，冷冻超薄切片技术具有标记效率高，膜结构保存良好的特点，但是对技术人员的技能和经验要求高。4.负染色技术：负染色又称阴性反差染色，它是利用高密度的、且在透射电镜下又不显示结构的重金属盐（如磷钨酸、醋酸铀等），把生物标本包围起来、在黑暗的背景上显示出呈现阴性反差样品的微细结构。负染色所显示的电镜图像，正好与组织超薄切片正染色相反，其样品结构为透明浅色，而背底则为无结构的灰色或黑色。负染色技术无法看到样品的内部结构。这种方法操作简单，图像衬度高，广泛应用于水溶性样品中的颗粒性物质或生物大分子等样品质量和结构的快速检测分析，如外泌体、脂质体、细菌、病毒、蛋白质和纳米制剂等。样品的纯度和浓度都有要求，如果杂质太多样品中有盐类结晶会干扰染色反应。5.冷冻电镜技术（Cryo-EM）：近年来冷冻透射电镜成为最为热门的生物研究技术之一，主要包括单颗粒分析（Single particle，SPA）和冷冻电子断层扫描（tomography）两个技术分支。单颗粒分析技术通常依赖于均质的样品，通过将纯化的蛋白质瞬间冷冻在Quantifoil金网上，将载网通过冷冻样品杆或冷冻传输装置放入冷冻电镜中进行观察，在保持蛋白天然构型的前提下，解析蛋白的构象特征。单颗粒分析在电镜下观察每个蛋白质分子在某个角度的投影，获得多个不同方向和/或粒子图像，再通过数据分析和图像分类算法得到该蛋白分子的三维构象图。随着冷冻电镜的加速电压的提高（300kV）和算法的迭代更新，单颗粒分析的分辨率甚至可以达到1.2埃，实现对蛋白质结构原子级别的解析，适用于膜蛋白、蛋白质等大分子复合物的研究。冷冻电子断层扫描技术是一种无标记的冷冻成像技术，能以纳米分辨率提供细胞器和蛋白质复合物的3D数据集。以细胞为例，首先需要对细胞进行低温冷冻（玻璃化），通过聚焦离子束 (FIB) 对细胞目标区域减薄，得到减薄的细胞冷冻薄片。将冷冻薄片置于冷冻电镜下，通过样品杆的倾转，拍摄冷冻薄片在不同角度下的一系列2D图像，然后将其重建为 3D 数据集。冷冻电子断层扫描不需要对样品进行任何脱水、染色或标记，并可以与光学显微术联合使用，获得目标细胞器、蛋白质的在细胞中的位置和纳米分辨率级别的三维结构信息。相比于SPA，冷冻电子断层扫描不仅能获得单个蛋白质的结构信息，还能得到它们在细胞内的空间排布特征以及周围亚细胞结构的三维超微特征。三、扫描电子显微镜技术扫描电镜由真空系统、电子束系统和成像系统三大系统组成。不同于透射电镜，扫描电镜的成像原理是用极细的电子束在样品表面进行逐点扫描，激发样品表面放出二次电子、背散射电子等电子信号，通过不同的电子探测器接受不同来源的电子来形成样品的表面形貌像（二次电子）或衬度像（背散射电子）等，所以扫描电镜的常用功能包括二次电子成像和衬度成像。1.二次电子成像：用被入射电子轰击出的样品外层电子成像，能量低，只能表征样品表面。生物组织在高真空条件水分会快速挥发，影响并破坏样品形态。生物样品必须经过干燥才能进行扫描电镜观察。含水的特殊生物样品也可以通过低真空模式（成像质量下降）或冷冻传输的方法进行观察。干燥方式一般有冷冻真空干燥和临界点干燥两种，其中临界点干燥法是我们常用的方法，它可以消除液体表面张力对脱水过程中样品形态的影响。干燥后的样品还需要用真空镀膜仪在表面喷镀一层导电金属，镀膜厚度控制在5-10nm为宜，用来消除荷电效应，减少热损伤，并提高在扫描电镜中定位检查所需的二次电子信号。2.衬度成像：电子照射到待测样品的过程中，样品能发射一部分电子，背散射电子探头就会检测到这些电子，从而产生相应的电信号，通过放大电路 之后，在对其进行相应的转换，后在检测器 上显示相应待检测样品表面的相关信息图像。背散射电子的数量主要与样品的原子序数有关，原子序数越大，反射的背散射电子就越多，因此可以用来对重金属加强染色的生物样品进行背散射电子成像，得到类似于透射电镜成像的效果。目前我们主要依赖于场发射扫描电镜对树脂包埋的样品进行连续切片扫描后获得序列图像，由此得到第三维度的信息。场发射扫描电镜XY的分辨率已达到2nm以上，Z轴分辨率由切片的厚度决定，现有三种策略：系列块表面（SBF-SEM）、原位聚焦离子束切割（FIB-SEM）和自动化带式收集超薄切片（ATUM-SEM）。我们实验室较早采用ATUM-SEM技术开展纳米尺度上神经网络连接和脑图谱绘制的工作，该技术最大优势在于样品可一直保存和重复成像。将连续切片按顺序收集在支持条带或硅片上，放入扫描电镜中利用高通量自动化图像采集软件进行序列成像，获得样品的三维图像数据堆栈。这些海量数据的处理和分析、目标结构的分割和3D渲染等环节都具有较强的挑战性。然而，SBF-SEM技术则是将配有钻石刀的超薄切片机整合到扫描电镜中，对暴露出的样品表面进行自动连续切片和系列背散射电子成像。FIB-SEM的成像原理与SBF类似，不同之处在于聚焦离子束替代了钻石刀切割，实现了更高的Z轴分辨率，在小体积生物样品的三维重构研究中应用非常广泛。四、电镜在神经生物学中的应用与展望电镜技术作为纳米级的生物学成像技术，为神经系统超微形态学观察、疾病病理诊断和神经环路连接图谱绘制提供了二维或三维精细结构信息。神经系统具有复杂的生物结构，有比较粗大的神经纤维、神经突起（最小直径约200 nm），也有很多精细的结构如突触间隙约20 nm及其中的囊泡（直径约30 nm）。神经组织的另一个显著特点是神经元有大量的神经突起或投射到其它神经核团上产生联系，这些神经突起、相互连接可以延伸很长的距离，甚至可以达到数毫米，构成极其复杂的神经网络。全脑神经网络连接具有极精细结构和不规则投射途径促进了体电镜技术的发展，也是当前神经生物学研究的重点之一。除此之外，光电关联技术（CLEM）在神经环路连接中的应用也较多，该技术是将FM和EM技术进行优势互补，集成应用于同一个细胞对象上，可获取多重结构信息和高分辨率。由于电镜无法感知荧光信号，在电镜里找到荧光所确定的感兴趣区域，并让两种图像准确叠合成同一信息，是关联成功的关键。CLEM的工作流程以模板化组合，但不管哪种方案目标都是最大限度的保留来自光学和电子显微镜的图像信息，尽量在EM成像之前拍好FM，避免电子束和高真空对荧光信号产生漂白作用。样品制备的基本原则是在保存荧光信号和获得高衬度电镜结构之间找到平衡点。另外，图像配准时可利用内源性的标志物如血管、细胞核、髓鞘等结构以微米精度进行逐步关联。生物电镜的样品制备原理虽然大同小异，但生物类型、样品来源、实验目标的不同决定了制样方案的多样化，这就对电镜工作者提出了更高的经验要求。非标准化流程的电镜实验数量的增多，更需要依赖多元化的制样和成像方案。电镜技术平台作为一个专业性极强的团队，在现有仪器的基础上，会不断开发新的电镜方法和设备的使用功能，为科研用户提供一站式高质量技术服务，为科研项目提供了更好的技术保障。 电镜技术平台工作人员合影作者简介：孔妤，博士，正高级工程师，现任中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心电镜技术平台主管，上海市显微学学会理事。从事神经生物学电镜技术和神经组织超微结构研究多年，承担青年促进会、上海市科委等多项课题项目，发表国内外研究论文十余篇。近年来主要从事微观脑网络结构分析与重构技术、光镜电镜联用技术、免疫电镜技术等在神经环路连接研究中的应用，技术全面，经验丰富，为科研工作者论文的发表提供了高水平的技术支撑服务。点击图片了解话题详情欢迎广大网友投稿：lizk@instrument.com.cn（内容包括但不限于：生命科学科研故事、生命科学相关仪器/技术分享、市场洞察等）

1简介叶黄素是植物中常见的天然类胡萝卜素。外表为红橙色，具有天然抗氧化性能，因此也具有氧敏感性；此外，叶黄素基本上也不溶于水。叶黄素和类胡萝卜玉米黄质素存在于人类眼部视网膜中，对视觉非常重要。本研究的目的是保护抗氧化剂免于氧化，并使其在水中分散。因此，利用微胶囊造粒仪 B-390/B-395 Pro 仪器搭配气流振动喷嘴和同心喷嘴分别制备叶黄素微球和微胶囊。制备的微球呈球形、大小均匀，微胶囊由内核和外壳两种不同成分组成。如 下图所示，微球和微胶囊均呈现均匀的球形形貌。含叶黄素的微球模型含叶黄素的微胶囊模型2实验设备和材料实验设备：步琦微胶囊造粒仪 B-390/B-395 Pro实验材料：1.5%（w/w）和1.8%（w/w）海藻酸钠溶液0.1 M CaCl2样品1：7.5g 叶黄素粉末分散于 142.5g 浓度为 1.5% 的海藻酸钠溶液中样品2：5g 叶黄素粉末溶于 100mL 花生油中，磁力搅拌均匀3实验过程实验1：使用气流振动喷嘴制备包埋叶黄素的海藻酸钙基质的微球，仪器参数如下 表1所示。表1：实验 1 的过程参数。仪器微胶囊造粒仪 B-390气流振动喷嘴750 μm（核）/1.5 mm（壳）频率870 Hz进样（外置注射泵）样品1：5.45 mL/min压力1013 mbar喷嘴气体流量1 L/min分散电压0 V振幅9固化液0.1 M CaCl2搅拌温和搅拌（无旋涡）实验2：使用同心喷嘴制备包埋叶黄素油的核壳结构海藻酸钙微胶囊，仪器参数如下 表2 所示。表2：实验 2 的过程参数。仪器微胶囊造粒仪 B-395 Pro同心喷嘴450 μm（核）/ 700 μm（壳）频率300 Hz进样核：样品2（注射泵进样）壳：1.8 %海藻酸钠溶液（压力瓶进样）核进样速度11.5 mL/min压力300 mbar分散电压0 V振幅9固化液0.1 M CaCl2搅拌温和搅拌（无旋涡）4实验结果本实验成功使用气流振动喷嘴制得球型叶黄素微粒，如下图（a）所示。图中叶黄素粉末嵌入在海藻酸钙微球内部，微球直径尺寸在 300μm 到 600μm 之间。与叶黄素微球相比，实验2 制备的核壳结构叶黄素微胶囊如下图（b）所示。通过使用同心喷嘴，海藻酸盐基质形成的外壳可以将叶黄素油完全包覆，形成保护层，微胶囊直径在 1200μm 到 1400μm 之间。（a）使用气流振动喷嘴制得的叶黄素微球（b）使用同心喷嘴制得的叶黄素微胶囊5结论本研究提出两种使用微胶囊造粒仪包埋油溶性物质的可行方法，步琦微胶囊造粒仪 B-390 和 B-395 Pro 可用于制备含叶黄素的球型微粒和微胶囊。

4本草奇遇记干燥制剂之旅”在上一期的本草奇遇记中，我们详细介绍了步琦在中药分离纯化方面的解决方案，希望能通过高效且操作简单的分离纯化系统助力“十四五”中医药的发展。这期我们将带领大家开启活性物质分离提纯后的旅程，领略步琦在中医药研究发展领域中最为全面的产品解决方案。干燥 & 制剂中草药原料经过萃取、分离、提纯后的活性成分，一般需要干燥长期保存或与其他组分混合再利用。根据活性成分特性和所用试剂类型，选择合适的干燥方式及制剂再制备方式非常重要。步琦拥有多种干燥及制剂应用的产品仪器——冷冻干燥机、微米级和纳米级喷雾干燥仪以及微胶囊造粒仪，不管是干燥还是包埋再造粒，均可满足不同应用需求，为您耗费精力提取出的活性组分保驾护航。冷冻干燥机 L-300第一款双冷阱实验室冷冻干燥机冷冻干燥机 L-300 最瞩目的功能是通过交替冷凝器加载，实现了无限捕冰能力。通过 Smart-Switch 确保稳定、可重现的参数（包括冷却温度、搁板温度变化 ±1°C 以及真空压力），首次实现冻干过程的连续升华。市场首台具有双冷凝器交替工作的冷冻干燥机，搭载 Infinite-Technology TM 技术，捕冰能力无极限自动蒸汽除霜，无需耗费人力工作，删除实验停工时间冷凝器温度 -105 ℃，凝冰能力 ≥12 kg/24 h多种干燥配件可供选择，满足不同应用需求推荐配件：Pt 1000 样品温度探头实时监测冻干过程中样品温度变化可以判定冷冻干燥终点（左右滑动查看）推荐配件：干燥配件不同层数、可加热和不可加热的样品搁板多种歧管配件，满足不同应用需求应用实例中药浸提膏冷冻干燥样品：白果皮甘草浸提膏（水煎）冷冻干燥参数：（点击放大查看）干燥后样品：小型喷雾干燥仪 B-290世界领先的喷雾干燥研发解决方案拥有超过 400 项专利的小型喷雾干燥仪 B-290 获得业界众多研究人员的信任。基于我们超过 40 年的喷雾干燥经验，我们的喷雾干燥解决方案备受业界推崇：样品消耗量少（低至 5 g）、高产出量（高达 70 %）及操作直观等，轻松实现经济高效、便于升级至工业生产规模等目的。仪器配置灵活，多种玻璃组件和喷嘴尺寸可供选择喷雾干燥过程清晰可见，颗粒大小可调 1 – 60 μm标配红宝石喷嘴，喷雾效果稳定蒸发量：1 L/h H2O，有机溶剂蒸发量更高推荐配件：高效旋风分离器内镀纳米涂层，有效防止静电粘连适用于处理少量样品，回收率更高应用实例使用小型喷雾干燥仪 B-290 制备丹参微囊粉末样品：丹参提取物+明胶+羧甲基纤维素钠乳化液喷雾干燥参数：加热温度 80 ℃，蠕动泵速 6 %，雾化气流 357 L/h，核壳比（质量比）1/4 或 1/6纳米喷雾干燥仪 B-90 HP小颗粒，小样品，高产出纳米喷雾干燥仪高性能款 B-90 HP 能够将最少量的样品温和处理成亚微米级颗粒，且几乎不产生损失。该用户友好型系统可提高生产效率，适用于小颗粒关系影响重大的行业。压电驱动喷头，优化生产效率和操作性，颗粒大小 200 nm – 5 μm专利气流系统实现温和溶剂蒸发，静电粒子收集器实现更高回收率（高达 90 %）样品量需求小（2 mL）,大中小型雾化器可实现小颗粒和高产量之间的最佳平衡（高达 200 mL/h）推荐配件：惰性气体循环系统 B-295 SE惰性气体分为，安全处理有机溶剂，可避免喷雾干燥过程发生爆炸配备氧气和压力传感器，双重保险防止出现爆炸条件有机试剂回收再利用，加大降低环境污染并控制实验成本微胶囊造粒仪 B-390 / B-395 Pro用于创新的微型液珠和微胶囊微胶囊造粒仪 B-390 / B-395 Pro 是一个多功能系统，适用于包埋活性成分和材料。从制药、化工到食品样品，步琦微胶囊造粒仪的适应性可让您获得创新的微型液珠和微胶囊。同时，我们提供广泛的技术支持，让您可以轻松地使设备适应您的特定样品和应用需求。可制得 150 – 2000 μm 的微型液珠或微胶囊液滴形成全过程可视，有助于快速优化，设备操作直观并易于维护多种尺寸喷嘴可选，满足不同造粒尺寸需求可无菌包埋细胞、微生物和活性物质，符合 GMP标准推荐配件：同心喷嘴系统生产芯材 & 壁材结构的微胶囊包埋、缓释和控释的首选配件死体积极小，有效控制样品量应用实例制备白藜芦醇海藻酸盐微粒样品：白藜芦醇+海藻酸钠，氯化钙（接收液）喷嘴类型：单喷嘴系统制备参数：频率 1200Hz，电压 1000V，喷嘴尺寸 300μm，接收液搅拌转速 100rpm制备的湿粒和冷冻干燥后的样品 SEM 图（点击放大查看）此次中草药干燥制剂的旅程就在此告一段落，步琦还有很多精彩纷呈的旅行线路等待着大家，下期会为您带来步琦旁线与在线近红外产品对中药质量把控的解决方案，尽情期待我们后续的分享吧！

导读显微镜玻片做不好，哎呀，心痛！怎么办？实验技能小课堂开课了！！✨今天小编给大家总结了显微镜玻片的不同制作方法，希望能和大家一起渡过难关。 01涂片法 涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织等。涂片时应注意：（1）载玻片要持平。（2）涂层须均匀且薄。（3）固定，可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定。（4）染色，染色液要盖住全部涂面。（5）冲洗，用吸水纸吸干或烤干。（6）封片。 02压片法 将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散的一种制片方法，一般过程：（1）取材。（2）固定：取材后立即压片观察，可不作单独固定处理；取材后不立即视察，可将材料用固定液固定。（3）离析：对细胞团用水解分离液处理。（4）染色。（5）压片：将材料放在载玻片上，加一滴清水或染液，盖上盖玻片用拇指轻轻压片。（6）观察。 03切片法 观察机体各部的微细结构时常用，其中以石蜡切片最为常见。其制备程序大致如下:（1）取材与固定:取得新鲜材料后，切成适当的小块立即投入固定剂中进行固定。（2）脱水、透明与包埋:把固定好的材料的水分脱掉，经透明处理后，再浸入已融化的石蜡中进行浸透、包埋。（3）切片与染色:用切片机切成薄片，贴于载玻片上。脱蜡后进行染色。（4）封固:滴加中性树胶和盖片进行封固备用。

p style="text-indent: 2em text-align: left "strong创业板史上最大规模IPO/strong/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "根据迈瑞医疗此前披露的招股说明书，公司拟发行不超过1.22亿股，募集资金总额为59.3亿元，刷新宁德时代创下54.6亿元的创业板最高募资纪录，为创业板有史以来最大规模的一笔IPO。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "据悉，迈瑞医疗的前身迈瑞国际曾于2006年在纽约上市，后在2016年私有化退市。随着迈瑞医疗成功IPO，其也成为了继三六零、药明康德之后的又一家从美国退市后回归中国的公司。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "strong颇有故事的上市之路/strong/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "迈瑞医疗创始于1991年，是中国高端医疗器械行业的龙头企业，其总部设在中国深圳，在全球拥有57家全资或控股子公司，其中包括境内子公司17家、境外子公司40家，搭建有庞大的全球研发、营销和服务网络。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "2017年，迈瑞医疗营收额达到111.7亿元，位列医疗器械生产商榜首。迈瑞的主营业务覆盖生命信息与支持、体外诊断、医学影像三大领域，通过前沿技术创新，提供更完善的产品解决方案，帮助世界改善医疗条件、提高诊疗效率。/pp style="text-align:center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/f7d7db0f-abf3-4f4d-b4dd-0ad306038793.jpg" title="屏幕快照 2018-10-17 上午7.56.26.png" alt="屏幕快照 2018-10-17 上午7.56.26.png"//pp style="text-indent: 2em text-align: center "图片来源：迈瑞医疗招股说明书/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "在距离纽约上市之后的第十年，迈瑞医疗于2017年在国内首次公开招股说明书，拟在深交所上市。但是，2018年2月13日，迈瑞医疗主动申请终止审查。3月底，公司再次发布IPO招股书，并改为创业板登录，募资规模从此前的66.26亿元小幅下调至63.4亿元。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "中国已成为全球医疗器械的重要生产基地，占全球医疗器械市场约14%的份额。然而高端医疗器械市场仍然由外资企业占领。与国际市场相比，国内还有很大的上升空间。/p

p　　罗氏正在购买Lumora核酸纯化中的热洗脱技术及相关产品，该技术可用于多种样品类型，诸如福尔马林固定后石蜡包埋的肿瘤样本。罗氏表示，计划将该技术整合到测序流程解决方案中。/pp　　罗氏称，该技术仅用于研究。/pp　　罗氏也表示，Lumora的该项技术用时较短，数分钟内即可自动分离FFPE(福尔马林固定后石蜡包埋的组织)的核酸，而其他技术一般要花费数小时。/pp　　该技术还可用于全血、粪便、痰液以及口腔拭子等样品。/pp　　Lumora的首席执行官Laurence Tisi在一份声明中表示，“核酸提取是测序流程的‘重要瓶颈’，热洗脱技术能够显著简化萃取过程，并且易于自动化。同时，这项技术的收购可能使罗氏在完全综合性测序设备上具有得天独厚的地位。”/pp　　关于此次交易的财务及其他条款尚未披露。/pp　　罗氏公司正在建立自己的技术能力，这项收购是罗氏近期一系列交易中最新的动作。/pp　　上周，罗氏宣布了购买分子生物学酶公司Kapa的生物系统。/pp　　在本月早些时候，罗氏公司4.25亿美元购买临床诊断公司GeneWeave。/pp　　而在今年四月份，罗氏收购了CAPP医疗公司，该公司专注于利用NGS开发检测血液中的循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA，ctDNA)进行癌症筛查和监测的技术。/p

p　　药明康德还未开板，又一家医疗行业“独角兽”来了!/pp　　日前，证监会官网披露了深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司(以下简称“迈瑞”)创业板首次公开发行股票招股说明书。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/97ce88f8-6a8c-4dc3-b8d6-97792f2a61e7.jpg" title="1.jpg"//pp　　作为国内医疗器械行业龙头、“独角兽”，迈瑞拥有十年海外上市经验(2016年3月迈瑞从纽交所退市)，此次预披露更新，意味着公司的IPO进程又进了一步。一旦主板上市成功，span style="color: rgb(255, 0, 0) "迈瑞有望成为第一家市值破千亿的本土医疗器械企业。/span/p

透射电镜样品制备技术之生物样品制备流程透射电镜常用的50-100 kV电子束来说，样品的厚度控制在10～100 nm为宜。由于电镜产生的电子束穿透能力很弱，需要把标本切成厚度小于0.1 µ m以下的薄片才适用，这种薄片称为超薄切片(Ultrathin sectioning)。常用的超薄切片厚度是50-70 nm，也可进行冷冻超薄切片。超薄切片技术是为透射电子显微镜观察提供薄样品的专门技术，研究材料类、生物类样品的基本技术，尤其是观察细胞、组织、器官等的超微结构以及亚细胞结构常用的技术。也是电镜细胞化学、免疫电镜等技术的关键性技术。它在生物学的发展过程中占据重要的地位，目前各种细胞、组织的超微结构知识几乎都是由它提供的。冷冻超薄切片机 Leica EM UC7制备流程取材→固定→脱水→包埋（渗透、包埋、聚合）→超薄切片→电子染色（生物类）取材→清洗→包埋（渗透、包埋、聚合）→超薄切片→电子染色（材料类）生物样品超薄切片要求：（1）细胞的细微结构保存良好，没有明显的物质凝聚、丢失、添加等人工效应；（2）切片厚度50-100 nm为宜：太薄反差低；太厚反差好，但结构重叠，电子束不能穿透；（3）切片应耐电子束的强烈照射，不变形不升华；（4）切片能够适当被染色，保证一定的反差；（5）切片均匀，无皱褶、刀痕，无染色剂或其他化学物质的沉淀。取材目地和要求（1）新鲜。(材料离体后1-5 min内进入固定液，避免细胞自溶和结构变化)（2）体积小。(厚度1 mm，长度宽度均5 mm，固定液渗透能力有限，组织太大会导致无法固定充分）（3）机械损伤小。(动作轻巧，器械锋利，避免对组织的挤压和推拉，建议用剃须刀片、手术刀片、手术剪刀。)（4）低温操作，器械、容器、固定液均需预冷（降低酶的活性，减少组织自溶）。（5）取材部位准确，且注意材料的方向性和定位。固定目的和要求：终止组织细胞的生化过程同时把它们的超微结构改变控制在最小范围内，并保护这些结构在后续的脱水、包埋等过程中不被破坏；将蛋白、离子等内容物保留在原位，以便后续的研究。固定液：固定剂＋缓冲液（1）破坏细胞的酶活性系统（2）稳定细胞物质成分，并保存之（3）接近细胞生活状态的渗透压,使细胞不收缩或膨胀（4）在组分的分子之间建立交联，提供骨架稳定细胞器的空间构型（5）提供一定的电子反差固定剂：戊二醛（C5H8O2)：渗透性好，保存蛋白质、酶活性，稳定糖元，无电子染色作用，固定脂类和膜差。可长时固定（低温可达半年）。锇酸（OsO4)：强氧化剂，固定脂类、膜结构，有电子染色作用；破坏酶活性。多聚甲醛：优良地保存酶活性，用于细胞化学。缓冲液：仿效细胞外液成分，对细胞富有生理保护。维持稳定的pH值；提供适当的渗透压；提供适当的离子成分使样品不抽提，不沉淀。固定方法：常用双固定法，用戊二醛对样品前固定，漂洗后使用锇酸对样品进行后固定。影响因素： 1.pH值：动物组织7.2-7.4，植物6.8-7.0，高度含水组织8.0-8.4 2.缓冲液类型：磷酸缓冲液、二甲砷酸盐缓冲液等，0.05-0.1 mol/L 3.渗透压：KCl, NaCl, 蔗糖调节 4.固定剂浓度：戊二醛2-6%，四氧化锇1-2% 5.材料大小：0.5-1 mm³ 操作步骤：戊二醛固定液：有细胞壁的样品5%，无细胞壁样品3%。加入缓冲体系，确保生物样本内外渗透压，避免细胞萎缩或吸涨。切取一小块组织，置入预冷的戊二醛固定液（3-5%）中，4℃预固定20分钟后，捞出置于洁净的保鲜膜或培养皿上（已滴有预冷的固定液），在固定液中用将组织切成2-5 mm长， 2-3 mm宽， 1 mm厚的细条，移入盛有预冷的戊二醛固定液的离心管中，4 ℃固定过夜。1.植物细胞的细胞壁和液泡会阻碍固定液迅速渗入。植物材料内部存有的空气，往往使材料漂浮于固定液面之上，由此影响到植物组织的固定效果。组织放入戊二醛固定液后，可用真空泵抽出组织内部的气体，使材料沉入固定液中。2.动物样本的取材，可将动物麻醉或急性处死后切取组织。或者采用原位固定、流灌固定后再切取所需组织。3.细胞培养的样品，轻微并短暂离心，倒净培养液后，加入预冷的固定液，4℃固定10 min后，低温6000 rpm/min离心5 min（离心力不可过大，离心时间不可过长，避免机械挤压），去上清，滴加新鲜固定液并重悬，4℃固定过夜。脱水用适当的有机溶剂取代组织和细胞中的游离态水分，使之能与包埋剂混合。要求：脱水要彻底；更换液体动作要迅速；脱水时间不宜过长；固定后的样品要充分漂洗。脱水剂：乙醇、丙酮、环氧丙烷等。步骤：逐级梯度脱水30％→50％→70％→80％→90％→95％(以上步骤每次15-20 min)→100％(2-3次，每次15 min)→100％丙酮(20 min) 包埋1.渗透：用包埋剂或混合液逐渐取代组织内的脱水剂（或前介质），使细胞内外所有的空隙被渗透液填充，使包埋剂逐步渗透到组织细胞内部,以便与细胞外的包埋剂同时聚合。包埋剂：聚合有良好的切割性能，软硬度易调节粘度低，易渗透；溶于脱水剂；电子透明度好，并具有一定的反差，聚合要充分、均匀，聚合温度要尽可能低；本身无结构，热稳定性好，可耐电子束轰击；来源丰富，且各批号性能尽可能一致；切片易染色,且对人体无害。常用Epon 812、Spurr、LR white等步骤：逐级梯度渗透，脱水剂:包埋剂3:1 → 1:1 → 1:3 →纯包埋剂2.包埋：将渗透好的样品块放入到适当的包埋模具中，灌装上纯包埋剂包埋。3.聚合：加温聚合形成固体基质，牢固地支撑整个细胞结构或组织，制成适于机械切割的固体包埋块，利于切片。步骤：37℃(12 h)→45 ℃(12-48 h)→60 ℃(24-48 h)超薄切片制刀：常用玻璃刀、钻石刀。刀上要装水槽，并注入槽液。槽液要求：不与材料发生化学反应，干净无杂质；液面与刀口基本平行；低粘度,蒸发量小；有一定的表面张力,有利于漂浮切片。常用的槽液：双蒸水、二甲基亚砜（DMSO）、甘油水溶液等。修块：除去组织周围多余的包埋介质和不感兴趣的部分，以提供较大的有效观察面积。并修成一定形状、大小的包埋块截面，便于连续切片。可手工、机械修块。切片：装块→装刀→对刀→加水→切片→捞片注意事项：对刀是关键；槽液用新鲜溶液；温度20~25℃，相对湿度60%；室内无空气流动，清洁，防止震动；刀槽密封，否则漏水。电子染色利用高密度的重金属染色剂（铅、铀）与细胞某些微细结构或成分结合，以增加样品局部的电子散射能力，提高电镜图像反差的方法。染色实质上是增大电子密度，电镜图像灰度不同。电子显微镜图片均为黑白灰，无彩色。常用染色剂：醋酸铀：主要染核酸、核蛋白、细胞核、结缔组织。要避光，有微弱的放射性柠檬酸铅：主要染膜结构、脂类、核酸。易与CO2反应成沉淀，染色中应避免。步骤：单染：铅盐单染,铀盐单染。双染色：醋酸双氧铀染色→漂洗→柠檬酸铅染色→漂洗→干燥。双染色较为常用。材料样品取材后可用丙酮清洗样品表面，直接包埋（渗透、包埋、聚合），超薄切片、电子染色（锇酸熏染）。

瑞士步琦冷冻干燥含酵母菌的微球应用冷冻干燥应用”益生菌是一种有益于人体健康的微生物，常被用于改善肠道菌群。微胶囊包埋技术可以帮助保护菌株，延长其在体内的存活时间，不易受外界环境的影响而失活。因此，在生产益生菌产品时，需要考虑选择合适的微胶囊技术，以确保益生菌的稳定性和活性。下面这篇应用非常好的结合了微胶囊包埋和冷冻干燥技术，证明菌种经过包埋干燥后仍具有生物活性，为发酵工艺和食品转化等领域开辟新的可能性。1介绍冷冻干燥，也称为冻干是一种非常通用的脱水方法，常用于保存微生物、食物或药物，如蛋白质类药物。它将冷冻和干燥结合在一个独特的操作中，可以创造出高质量的干燥终产品。冷冻干燥通常用于保存微生物培养物，因为它具有不可忽视的优点：储存的方便性和增加邮寄微生物的可能性。此外，制得的产品只需要少量维护，培养基在储存过程中不会受到污染，微生物可以长时间保持活力。然而，众所周知，冷冻干燥技术对微生物至关重要，因为它对微生物的生存能力和生理状态都有负面影响。根据方法和生物体的不同，微生物存活率也各有不同；然而，活力水平明显低于液氮储存 2。观察到的活力下降主要是由于一些不良副作用引起的，例如细胞内冰晶的形成1、敏感蛋白的变性或在此过程中膜脂质的物理状态发生一些不可逆的变化 3,5。为了防止这种影响，通常在冷冻或冷冻干燥前使用脱脂牛奶、蔗糖、甘油、 DMSO 或海藻糖等作为冻干保护物质1,3。据报道，海藻糖在干燥、冷冻、渗透胁迫和热休克等极端环境下对酵母和细菌具有保护作用。这些保护效果与膜的稳定和酶活性的保存有关。关于海藻糖的保护作用，已经报道了几种假设。一些报道认为它的作用是通过多个外部氢键取代参与维持蛋白质三级结构的水分子，另一些报道认为它形成玻璃态结构以确保物理稳定性。除了发酵过程或食品转化，酿酒酵母或乳酸菌等微生物在益生菌膳食食品和饲料补充剂领域具有重要的经济意义。然而，这些应用需要在储存过程中保持细胞活力。通过造粒和冷冻干燥技术相结合，可以得到大小和组成均匀的无尘颗粒。由于具有更高的颗粒表面积，这使得产品将具有良好的颗粒流动性，更容易掌握的剂量和更快的产品复原性。尽管存在上述挑战，冷冻干燥仍然是一种酵母、孢子真菌和细菌的方便保存方法，因为它们的长期生存能力通常保持得相当好，而且菌株的储存和分发要求也很简单。因此，本应用旨在生产酿酒酵母颗粒作为模型微生物，使用微胶囊造粒仪 Encapsulator B-390 作为造粒机，将酵母悬浮液挤压进入液氮中形成单分散球体，然后使用冷冻干燥机 Lyovapor&trade L – 200 进行冷冻干燥处理。2仪器，试剂和器材仪器：ESCO NordicSafe, Biosafety Cabinet Class IIBUCHI 微胶囊造粒仪 Encapsulator B-390BUCHI 冷冻干燥机 LyovaporTM L-200 Pro，干燥腔体搭配可加热搁板BUCHI LyovaporTM Software试剂：YPD 培养基, Sigma Aldrich海藻糖, Sigma Aldrich脱脂奶粉琼脂去离子水液氮器材：玻璃培养皿液氮杜瓦瓶3实验本应用中描述的工作是在无菌条件下进行的。将 84g 市售面包酵母悬浮溶解在 50mL 无菌 YPD 培养基(Sigma Aldrich)中。在酵母悬浮液中加入 50mL 无菌冻干保护剂培养基（5g 海藻糖(Sigma Aldrich)和 5g 脱脂牛奶溶于去离子水中），然后用微胶囊造粒仪 B-390 进行制粒(表1)。将挤压后的液滴收集在液氮浴中冷冻，然后转移到不锈钢托盘中，保存在 -25°C 的冰箱中进行冷冻干燥。表1：微胶囊包埋参数_300μm 喷嘴1mm 喷嘴频率[Hz]68060电压[V]7502500压力[mbar]500500冷冻干燥步骤(初级干燥和次级干燥)使用 LyovaporTM 编程软件，如表 2 所示。使用 LyovaporTM L-200 Pro 干燥腔体、可加热的搁板和环境空气。表2：初级干燥和次级干燥冻干参数无酵母菌微球采用与含酵母菌微球相同成分培养基和参数进行制备。冷冻干燥后，将 1mL 无菌水加入 1mL 微球中，用以复原样品。对于含有酵母菌的菌珠，对每个重组溶液进行10倍、100 倍和 1000 倍的连续稀释。将复原后的溶液和稀释液分别涂于 YPD 琼脂平板上，如图 1 所示。琼脂板在 28℃ 培养 24h，评价细胞活力。▲ 图1：琼脂平板上的酵母活力测试4结果与讨论含有酵母的微球可以通过使用微胶囊造粒仪 B-390 进行包埋制备，结果表明:用微胶囊造粒仪 B-390 将酵母滴入液氮中，可使酵母迅速颗粒化；用 300μm 的喷嘴和 1mm 的喷嘴分别制备了 700μm 和 1500μm 左右的微球。仅使用含冻干保护剂介质的溶液也得到了类似的结果。如图 2 所示，冻干后的微球在形状和大小上与湿冻微球保持相似。▲ 图2：用微胶囊造粒仪 B-390 制得的 300μm 酵母微球，在冻干前（左）后（右）的对比通过扫描电镜对其结构进行分析。在图 3 中，可以观察到含有酵母的球珠(下两图)和仅由冻干保护剂培养基制成的球珠（上两图）在形态上的差异。含有酵母菌的微球具有由 5μm 颗粒组成的粗糙结构，可以认为是微生物，而只含有冻干保护剂的微球具有更光滑的结构。▲ 图3：含酵母菌的冻干微球（下）和不含酵母菌冻干微球（上）的结构对比当冷冻干燥时，考虑到膜中脂质物理状态的变化或由于某些蛋白质结构的变化，生物系统可能受到破坏3,9。为了验证酵母菌的活力，将酵母菌重新水合，稀释，并在 28°C 的 YPD 琼脂板上培养 24 小时。图 4 证实了文献报道的内容，即便失去了部分活力，酵母在冻干后仍然可以生长2,4,6,10。▲ 图4：在 28℃ 琼脂板中培养 24 小时后的酵母菌活力5结论含有酵母菌的微粒可以很容易地用微胶囊造粒仪 B-390 进行制备，并使用冻干机 LyovaporTM L-200 进行冷冻干燥处理。B-390 的喷嘴直径分别为300 μm和1000 μm，制得的微粒直径分别为 700μm 和 1500μm。冷冻干燥后，珠粒的大小和形状没有变化。该颗粒流动性好，容易掌握使用剂量，且与水混合后溶解速度快。冻干后的微生物在贮藏过程中仍能保持良好的活力，并能在复水化后成功生长。在本应用中，造粒包埋和冷冻干燥的结合显示出了非常好的实验结果。它可以在发酵工艺和食品转化等领域开辟新的可能性，有利于生产制备剂量易控制和重组的培养发酵剂；另外，在益生菌和食品补充剂领域中获得无尘且可自由流动的粉末，同时保证产品颗粒大小和组成的均匀度。6参考文献N’Guessan, F. K. Coulibaly, H. W. Alloue-Boraud, M. W. A. Cot, M. Djè, K. M. Production of Freeze-Dried Yeast Culture for the Brewing of Traditional Sorghum Beer, Tchapalo. Food Sci. Nutr. 2016, 4 (1), 34–41.Bond, C. Freeze-Drying of Yeast Cultures. In Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols Day, J., Stacey, G., Eds. Methods in Molecular BiologyTM Humana Press, 2007 pp 99–107.Leslie, S. B. Israeli, E. Lighthart, B. Crowe, J. H. Crowe, L. M. Trehalose and Sucrose Protect Both Membranes and Proteins in Intact Bacteria during Drying. Appl. Environ.Microbiol. 1995, 61 (10), 3592–3597.Miyamoto-Shinohara, Y. Imaizumi, T. Sukenobe, J. Murakami, Y. Kawamura, S. Komatsu, Y. Survival Rate of Microbes after Freeze-Drying and Long-Term Storage.Cryobiology 2000, 41 (3), 251–255.Wolkers, W. F. Tablin, F. Crowe, J. H. From Anhydrobiosis to Freeze-Drying of Eukaryotic Cells. Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2002, 131 (3), 535–543.Lodato, P. Huergo, M. S. de Buera, M. P. Viability and Thermal Stability of a Strain of Saccharomyces Cerevisiae Freeze-Dried in Different Sugar and Polymer Matrices. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1999, 52 (2), 215–220.Strasser, S. Neureiter, M. Geppl, M. Braun, R. Danner, H. Influence of Lyophilization,Fluidized Bed Drying, Addition of Protectants, and Storage on the Viability of Lactic Acid Bacteria. J. Appl. Microbiol. 2009, 107 (1), 167–177.Miyamoto, T. (Kyushu U. Kawabata, K. Honjoh, K. Hatano, S. Effects of Trehalose on Freeze Tolerance of Baker’s Yeast. J. Fac. Agric. - Kyushu Univ. Jpn. 1996.Giulio, B. D. Orlando, P. Barba, G. Coppola, R. Rosa, M. D. Sada, A. Prisco, P. P. D. Nazzaro, F. Use of Alginate and Cryo-Protective Sugars to Improve the Viability of Lactic Acid Bacteria after Freezing and Freeze-Drying. World J. Microbiol. Biotechnol. 2005, 21 (5), 739–746.Cerrutti, P. Huergo, M. S. de Galvagno, M. Schebor, C. Buera, M. del P. Commercial Baker’s Yeast Stability as Affected by Intracellular Content of Trehalose, Dehydration Procedure and the Physical Properties of External Matrices. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2000, 54 (4), 575–580.

p style="text-align: justify text-indent: 2em "8月10日23点，iNature Biotechnology/i在线发表了由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心（神经科学研究所）、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室研究员王凯研究组完成的题为《共聚焦光场显微镜对小鼠和斑马鱼大脑快速体成像》的研究论文。该研究发展了一种新型体成像技术：共聚焦光场显微镜(Confocal light field microscopy)，可以对活体动物深部脑组织中神经和血管网络进行快速大范围体成像。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "跨脑区大规模的神经元如何整合信息并影响行为是神经科学中的核心问题，解答这一问题需要在更高时空分辨率上捕捉大量神经元活动动态变化的工具。共聚焦显微镜和双光子显微镜等运用于活体脑成像的传统工具基于点扫描，时间分辨率较低，难以研究大范围脑区中神经元的快速变化。因此，近年来科研人员一直致力于开发更快的成像方法。在多种新技术中，光场显微镜具有潜力，得到广泛关注，其特点在于可以在相机的单次曝光瞬间，记录来自物体不同深度的信号，通过反卷积算法重构出整个三维体，实现快速体成像，在线虫、斑马鱼幼鱼等小型模式动物上已获得初步应用。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "传统光场显微镜存在两个难以解决的问题，限制了其在生物成像上的应用。首先，重构的结果会出现失真。2017年，王凯研究组研发的新型扩增视场光场显微镜（eXtended field-of-view Light Field Microscopy, XLFM）解决了这一问题，并应用于自由行为斑马鱼幼鱼的全脑神经元功能成像上，首次三维记录了斑马鱼幼鱼在完整捕食行为中的全脑神经元活动的变化。其次，现有光场显微成像技术缺乏光学切片能力，无法对较厚组织，如小鼠的大脑进行成像。让光场显微镜具有共聚焦显微镜一样的光学切片能力，滤除大样品中焦层之外的背景信号来提高信噪比，是提高成像质量、可广泛应用的关键所在。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "然而，传统共聚焦显微镜采用激光逐点扫描和共轭点针孔检测来降低焦面外噪声的策略不适用于三维光场显微镜。面对这一挑战，研究团队创新提出广义共聚焦检测的概念，使其可以与光场显微镜的三维成像策略结合，在不牺牲体成像速度的前提下有效滤除背景噪声，提高了灵敏度和分辨率。这种新型的光场显微成像技术称为共聚焦光场显微镜。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "研究团队在不同动物样品上测试了共聚焦光场显微镜的成像能力。团队成员对包埋的活体斑马鱼幼鱼进行全脑钙成像，对比共聚焦和传统光场显微镜的成像结果，发现加入光学切片能力后，图像分辨率和信号噪声比提高，可以检测到更多较弱的钙活动。进一步的，将共聚焦光场显微镜和高速三维追踪系统结合，对自由行为的斑马鱼幼鱼进行全脑钙成像，在ø 800 μm x 200 μm的体积内达到2 x 2 x 2.5 μmsup3/sup的空间分辨率和6Hz的时间分辨率。受益于更高的分辨率和灵敏度，可以识别出斑马鱼幼鱼在捕食草履虫过程中单个神经元的钙离子活动的变化。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "团队成员验证了共聚焦光场显微镜对小鼠大脑的成像效果，对清醒小鼠的视皮层进行钙成像，可以同时记录ø 800 μm x 150 μm的体积内近千个神经元的活动，最深可达约400 μm，且连续5小时以上稳定记录超过10万帧，没有明显的光漂白。团队成员进一步尝试使用共聚焦光场显微镜对鼠脑中的血细胞进行成像，深度可达600 μm，拍摄速度70 Hz，同时记录上千根血管分支中群体血细胞的流动情况并计算血细胞的速度，相比之前的传统成像方法通量提高了百余倍。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "研究团队在自由行为的斑马鱼幼鱼和小鼠大脑上证明了共聚焦光场显微镜有更高的分辨率和灵敏度，为研究大范围神经网络和血管网络的功能提供了新的工具。同时，该技术不仅适用脑组织的成像，还可以根据所需成像的样品种类灵活调整分辨率、成像范围和速度，应用在其他厚组织的快速动态成像中。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "研究在王凯的指导下，主要由博士研究生张朕坤、白璐，以及助理研究员丛林共同完成。王凯研究组余鹏、张田蕾，中国科学技术大学本科生石万卓，杜久林研究组李福宁做出贡献，研究员杜久林参与合作并给予指导意见。研究得到中科院脑智卓越中心实验动物平台的支持。研究工作受到科技部、中科院、国家自然科学基金委员会和上海市的资助。/pp style="text-align: center text-indent: 0em "img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/9bfa0661-24ad-4d0d-9ccd-10db465617c7.jpg" title="图1.jpg" alt="图1.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "图1.（上）共聚焦光场显微镜原理示意图。（下）不同于传统光场显微镜，共聚焦光场显微镜采用片状照明，选择性激发样本的一部分，在垂直照明的方向上扫描，采集到的信号被遮挡板过滤掉焦层范围之外的部分。对采集到的图像进行重构可以得到焦层内的三维信息。/pp style="text-align: center "img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/28e2bd6d-59f5-4ff1-8085-355f6d295cbf.jpg" title="图2.jpg" alt="图2.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "图2.（左）斑马鱼幼鱼捕食行为的一个例子。0s 为斑马鱼吞食草履虫的时刻。（右）左图斑马鱼捕食行为中，共聚焦光场显微镜记录到的两个不同脑区的神经元活动。箭头所指为过程中激活的单个神经元。/pp style="text-align: center text-indent: 0em "img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/c26412e7-a408-4c67-8533-1c5a118fdb4b.jpg" title="图3.jpg" alt="图3.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(68, 68, 68) font-family: 微软雅黑 background-color: rgb(255, 255, 255) "　/span图3.（左）共聚焦光场显微镜拍摄得到的小鼠视皮层中的复杂血管网络。6个在不同深度拍摄的体积连接为一个深度达600 μm的三维结构。（中）100 μm到250 μm深度血管网络的平面投影，颜色代表不同血管分支中血细胞的平均流速。（右）图中箭头所指的区域中五个血管分支在一段时间内流过血细胞数量的计数。/p

一石激起千层浪，安信“毒”地板事件在网络曝光后，地板行业受到公众前所未有的关注。中国证券报记者在建材市场实地调研了解到，除了安信地板外，其他品牌地板也可能存在劣质产品，而市场上还有大量生产销售超低价地板的杂牌军，其产品质量更加堪忧。　　业内人士向中国证券报记者透露，劣质地板厂商都声称有质量证书，其产品流向市场的途径：一是将合格的产品送检，但实际销售的是不合格产品，“地板产品质量检验证书用钱都能够买到” 二是篡改质量检验证书，也就是伪造证书。　　其中的玄机耐人寻味。中国林产工业协会一位不愿具名的专家表示，“问题的症结在于监管不到位，价格竞争激烈，劣币驱逐良币，以次充好的企业更加赚钱。”　　建材市场地板乱相　　市面上销售的地板到底有多少不合格产品?有人说，“八成木地板不达标”。不过，中国证券报记者在走访地板卖场时发现，几乎所有卖家都声称达到国家标准，而且是E0级，也是国内的最高标准。　　在北京玉泉营建材市场，中国证券报记者发现，市场中存在不少声称产品达到国家标准的地板销售店铺，价格便宜的实木复合地板甚至低于100元/平米。　　这些店铺中的一位销售员说，“地板的生产基地在北京的大兴，厂家直销，所以价格相对便宜，质量肯定没问题，环保也达到国家标准，都有证书的，如果你想要买更好的，就去旁边的品牌卖场，如东方家园、居然之家。”　　对于这些杂牌军，一家品牌地板的一位销售员说：“他们的产品肯定不达标，否则怎么可能有那么便宜的实木复合地板?产品质量检验证书用钱都能够买到，这在业内比较普遍。一旦出现问题，这些杂牌子的店铺随时可以走人。消费者购买地板关键还是要看品牌。”　　一位从事装修业20年的湖北人老潘告诉中国证券报记者：“品牌卖场中的产品一般比较正规，因为一般出现问题，同品牌的其他产品也会受到牵连，但是大卖场旁边的小店铺则很不靠谱，多次的产品都会出现。”　　一位从事质检工作的专家则表示，“这些小店铺应当是获得了产品质量合格的检验证书才能在建材市场中销售，其证书的获得有两种可能，一是将合格的产品送检，但实际销售的是不合格产品，二是篡改质量检验证书，也就是伪造证书。实际上，即使是品牌地板，也可能存在第一种情况，因为检测机构只对送检的那个批次产品负责。”　　居然之家有关人士表示，“合格的实木复合地板的价格怎么也得近200元/平米，网络上说的安信地板以每平米110元左右的价格卖给万科，怎么可能挣钱?如果又要便宜，又要品牌，很可能以次充好，双方应该都很清楚。”　　监管“失守”　　在质检工作者和业内从业人员看来，只有拿到质检合格证书，厂家才能够进行生产，其产品才能够进入流通渠道。但质检合格证书并不能保证消费者真正购买到合格地板，而只能保证送检的那个批次的产品质量不存在问题。　　对于这一情况，国家人造板和木竹制品质量监督检验中心的有关人士表示，“每个省都有几家地板质量检验机构，全国加起来100多家，都是经过国家有关部门授权的，但这也导致相互之间竞争十分激烈，有些不太合规的情况可能因此出现。”　　上述质检专家则表示，“检测机构必须对送检的产品负责，如果对假冒伪劣产品给出合格证书肯定不合法，也是一种渎职行为，没有人会为了钱这么做。经常出现的情况是：送检的是合格产品，而销售的是不合格产品。”　　上述国家人造板和木竹制品质量监督检验中心的人士说：“在目前情况下，消费者要完全避免碰到以次充好的情况，最好是先不付费，而是拿着产品到检测机构进行检测，得到合格结果后再付费。这样检测机构和经销商都没有造假的空间。”　　对于质检环节的乱象，中国林产工业协会的专家表示，“不能将地板行业的问题都推到质监机构身上，质检只是保障市场健康运行的一个环节，还需要其他市场监管部门和行业准入主管部门的协同工作。”　　据介绍，企业获得生产许可证的关键是送检的产品合格，几乎没有准入门槛，其中居心不良的企业必然会生产不合格的产品。很多消费者对标准并不了解，购买者也不一定是真正的消费者。这就给劣质地板提供了大量的生存空间。　　低价竞争之殇　　业内人士认为，“安信的品牌在业内的知名度还是可以的，目前最终的真相是什么还有待检验结果的公布，但这一事件给地板行业提出的命题无疑很重要，也就是不能再走低价竞争的道路，如果质量不能得到保障，价格再便宜都会没有人买。”　　“价格竞争在地板行业很普遍，不合格产品的成本更低，这直接导致正规企业在竞争中处于劣势，甚至改变产品策略。要改变这一现状，行业应当自律，企业应当更讲诚信，而消费者则应当抵制过于廉价的产品。”中国林产工业协会的专家说。　　居然之家的人士说，“这次的‘毒’地板事件就像三聚氰胺牛奶，牛奶卖那么便宜，还说蛋白质的含量高，明显存在问题。同理，地板卖那么便宜，还是实木复合，明显不切合实际情况。当然，中高档价位的产品也并非完全没有问题，只是出现问题的概率更低，而一旦出现问题，受到的打击也越大。”　　一位质检专家还透露，“随着消费者环保意识的觉醒和消费需求的提升，实木复合地板的国家标准也正在酝酿升级。当前的标准基本能够满足要求，但是将来的标准更加环保，从E1级上升到E0级，这意味着企业生产成本的进一步提高。企业唯有提升产品质量和品牌，才能在成本上升的背景下赢得竞争优势。没有品牌优势的、不讲诚信的企业则将在竞争中被淘汰出局。”　　安信地板遇冷　　在北京玉泉营建材市场的居然之家卖场中，安信地板与大自然、圣象等国内品牌和部分进口品牌处在同一层。作为安信的经销商，这几日并不好过。　　由于北京楼市政策收紧，地板的消费受到抑制。居然之家地下一层的地板生意很冷清，只有两三家店里有客户在询问。一位在打算购买圣象地板的消费者说，安信的牌子也不错，但是出了“毒”地板的新闻后，就没有考虑去那里看。中国证券报记者也看到，安信地板的店面几乎无人问津。　　从全国范围看，安信地板也遭遇了冷落。据新华社记者了解，上海部分门店的安信地板已经下架，使用安信地板的房地产企业也已经停止安装施工并进行检测。新华社记者当日在浦东龙阳路上的百安居建材超市门店，已经看不到安信地板的踪影。超市负责人告诉新华社记者，全国的百安居门店都已经将安信地板临时下架，等待相关部门的检测结果。　　上海一家在全国有项目布局的房企负责人说，安信地板事件发生后，公司第一时间在全国范围内对项目进行了摸底，目前掌握有一两个项目使用了安信地板，正在进行相关复检，预计本周内可以出结果。　　安信公司的新闻发言人胡娅说，安信地板在一些建材大卖场的相关产品，也采取了临时下架措施，等待政府部门公布权威的检测结果。　　不过，北京玉泉营居然之家的安信地板并没有下架。居然之家有关人士表示，在居然之家销售的产品都经过了检测，安信的品牌来之不易，在大卖场中应该不会乱来，想不到在精装修上面没有守住“底线”。

天津某单位批量采购51种仪器及消耗品，国产优先，具体清单见附件。示例如下：种类名称仪器包埋盒打号机自动脱水机通风柜厨组织包埋机玻片打号机试剂苏木素染液伊红染液(水溶性)二甲苯（AR）无水乙醇（AR）耗材石蜡塑料包埋盒石蜡包埋模具盖玻片毛刷吹风筒尖头镊子设备清单.xlsx联系方式：为避免过度打扰，请添加仪器信息网工作人员微信获取采购方联系方式：

电子类样品检测手段多种多样，其中扫描电子显微镜检测不仅观察样品表观形貌，通过制样设备可实现对内部指定点或区域的观察分析，就目前来说电镜观察手段及观察方法渐趋成熟，但制样手段及手法仍有许多值得探究，在这里简单介绍下简单易操作的制样方法。下图是经常遇到的几个电子类材料的类型，线路板PCB,LED,OLED等，从材料角度来说，基本为复合材料（金属/玻璃/硅/聚合物，填料）；大多为软硬结合材料；大多为分层结构；多为局部器件的平整面获取和分析。图1.电子材料部分类型举例一般根据样品形状大小，分析观察需要，可采用三种方式制备样品：样品较薄或待分析结构位于表面10微米左右，可用胶加以保护并采用徕卡精研一体机EM TXP配合其光学显微镜观察，切到目标位置附近，再做简单磨抛处理后，采用徕卡三离子束EM TIC 3X进行离子束的切磨处理；若样品较厚，且观察区域较大，可采用传统方法磨抛，并使高度和直径符合徕卡三离子束EM TIC 3X的旋转抛光要求即可，徕卡三离子束TIC 3X旋转抛光具有旋转和移动功能，可最大程度保证加工面积；若样品微小，则可将其用小型包埋板包埋，再用精研一体机EM TXP切割到目标位置附近后，再做离子束的切磨处理，在此不用担心楔形样品，厚度方向和高度方向的倾斜，采用多功能的样品台来调节即可。图2.微电子类材料处理的简单方法图3.徕卡三离子束EM TIC 3X多功能样品台图示对于样品较薄或待分析结构位于表面10微米左右，其处理方法及所需工具如下，胶水，胶带（或其他平整柔软垫子）载玻片，加热台过程如下：胶带贴于载玻片（若有耐高温软垫子，则不需要此步骤），将胶水混合滴在胶带上，样品有结构的一面扣在胶水上，轻轻按压，加热台加热后，抬起胶带，则胶水与样品固化在一起，此方法的优点在于不会过多使用胶，样品导电性不会因为过多的胶引起荷电效应过重或后续处理过于复杂。图4.较薄样品处理所用耗材及工具简图 对于较柔软样品，如柔性屏，由于其材质的不同，则处理起来与上述不同，其需要准备的耗材如下：剪刀或刀片（视材料的薄厚而定）取小块样品，用铝箔纸将其包覆起来，胶水封口，干燥后刀片切出断面，粘在小片硅片上或小样品托上，接着离子束加工即可。图5.柔性电子材料制样工具及耗材 由于电子类材料多为复合材料，且多为胶类物质填充其中，因此电镜观察除了要复合用背散射电子成像信息更丰富以外，导电性是一个干扰正常观察项，同时，微电子材料的诸如分层结构等多为纳米或亚微米级，因此对镀膜处理要求高，若镀膜颗粒大则分层不清楚甚至不分，较宽范围的金属层结构的晶向结构无法分析，徕卡高真空镀膜仪EM ACE600镀膜颗粒细腻，膜厚可控，非常适合离子束加工后的微电子类材料平整断面处理。图6.徕卡高真空镀膜仪 EM ACE600

香精香料微胶囊化在上一篇文章中，我们从喷雾干燥技术和珍贵化合物生产影响因素两方面介绍了保护香精香料的方法和可能遇到的问题。本篇文章将继续从举例分析喷雾干燥技术微胶囊化的应用及微囊化后如何评价进行展开！1香精香料微囊化的应用研究小组已经研究了许多将香精或香料封装到载体材料中的应用，从而实现有效包埋、高产量和长保质期的目的。表1概述了使用步琦喷雾干燥仪进行的香精香料微囊化研究，列举出香精香料品类、载体及带来的益处等。表1：使用 BUCHI 喷雾干燥仪进行微囊化的应用列表香精和香料载体材料发现和益处硫磺香精阿拉伯树胶、麦芽糊精或其混合物获得良好的包封率，高回收率，提高储存稳定性薄荷精油八种不同的变性淀粉不同载体在喷雾干燥过程中对薄荷精油的包封效果葛缕子精油WPC、SMP 及其与麦芽糊精的混合物发现 WPC 本身以及碳水化合物的结合可成功用作壁材，WPC 表现出比 SMP 更好的封装性能柠檬烯油阿拉伯树胶、 WPC 及其与木薯粉的混合物创造了具有均匀表面且无开裂的微胶囊形态，为柠檬烯油提供足够保护椰子油（含维生素A）阿拉伯树胶颗粒呈球形，表面粗糙，粒径范围为 3.5 到 10.4μm，保护和稳定胶囊中的维生素A奇亚籽油WPC/果胶+麦芽糊精WPC+Hi-Cap100不同载体封装，最终微胶囊增加了诱导时间，提高了稳定性鱼油WPI研究喷嘴类型和工艺设计（二流体喷嘴、三流体喷嘴和超声波喷嘴）对鱼油包封率和微胶囊性能的影响石榴籽油SMP实现 95.6% 高包封率的最佳操作条件菜籽油扁豆分离蛋白和麦芽糊精将菜籽油封装在最有效的壁材中，以防止其降解氧化核桃油和奇亚籽油HPMC、麦芽糊精微囊化工艺保护核桃油和奇亚籽油植物甾醇阿拉伯树胶和麦芽糊精喷雾干燥法制备了性能优良的植物甾醇微粒葵花籽油HPMC、麦芽糊精基于 RSM 开发优化封装工艺2微胶囊的特征理想的香精或香料包封工艺可以得到含水率低、粒径均匀、表面含油量小、产率高、芯材保留量大的干粉；在这里，我们将重点讨论这些产品指标。2.1 水分含量和水分活度众所周知，水分会影响油的氧化、风味保留和颗粒的微观结构。通常，微粒的水分含量通过热重分析法测量。研究表明，核桃油和奇亚籽油胶囊的水分含量在 0.95-2.13% 之间，葵花籽油粉的含量在 2.34-4.86% 之间。水分活度通常与水分含量有关，可以用水分活度计来测量。它会影响香味的释放，因为它会改变包衣基质的结构。低水分活度减缓挥发物的释放并抑制微生物腐败。在较高的水分活度水平下，基质可能会开始塑化；因此，会增加流动香精的释放速率。研究发现，在较高水分活度水平下，储存过程中薄荷精油挥发物的损失更为明显。2.2 粒度、分布和微观结构最终粉末的粒度、分布和微观结构也是产品加工和处理的重要因素。它们会影响产品的风味、颜色、质地和气味，以及产品的流动性和分散性。通常，需要均匀、均质并成球型的颗粒形态。使用二流体喷嘴时，经 BUCHI 喷雾干燥仪 B-290 处理的颗粒粒径范围为 1-25μm，而用超声波喷嘴时粒径范围为 10-60μm。科学家研究了三种类型的喷嘴对最终粉末的影响，结果发现：用二流体喷嘴生产的鱼油微胶囊平均直径最小，为 7.3μm；其次是超声波喷嘴和三流体喷嘴，分别为 11.3μm 和 12.0μm。此外，与其它两种喷嘴比较，超声波喷嘴可以产生最窄的粒径尺寸分布。一般来说，表面光滑、凹陷和褶皱少的微胶囊有益于包封率，当然对稳定性也有帮助。微胶囊的微观结构可以用扫描电镜观察。研究发现，以分离小扁豆蛋白、麦芽糊精和海藻酸钠作为壁材包埋菜籽油，制备的微胶囊具有坚固的囊壁结构可以保护囊芯。此外，对于含有维生素A的椰子油微胶囊，当壁材浓度分别在 15% 和 20% 时，外表呈球形且表面粗糙，壁材起到有效保护和稳定维生素 A 的作用。2.3 产率产率可以通过将微胶囊固体质量的重量除以待喷雾干燥的固体质量的总和来计算。喷雾干燥过程中可以重点考察芯壁材料、芯壳比、表面活性剂、入口温度、进料浓度等因素的影响。通常，BUCHI 喷雾干燥仪 B-290 的产率高达 70%。有研究发现，通过降低进料固体浓度和增加芯壁材料比，产率会增加，通过提高进口空气温度，产率也会增加。2.4 总含油量、表面含油量和包封率微胶囊的总含油量包括表面油和包封油。粉末表面上存在的油是一种不良特性，会影响存储稳定性。通过喷雾干燥后保留的总油减去表面油的含量，或通过有机溶剂洗去表面油从基质中提取精油的水蒸馏法计算包封率。制备的奇亚籽油微胶囊的包封率很高，超过 99%，因此表面油的损失率小于1%。有研究报道，不同改性淀粉对薄荷精油的包封率随壁材性质的不同通常在 39.2%-97.4% 之间波动。显然，当微胶囊的包封率最高、即微胶囊表面含油量最低时，对于隔离周围环境起到保护包封化合物的效果最好。2.5 储存稳定性在存储期间，含有香精和香料的微胶囊会被氧化，导致气味变质。可见存储性是决定包封率的最重要因素之一。可以通过测试过氧化值（PV）和 2-硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）来确定储存稳定性。含有菜籽油的扁豆蛋白-麦芽糊精-海藻酸盐微胶囊比游离菜籽油具有更好的氧化稳定性：在 30 天的储存期内，微胶囊的 PV 显著降低，这说明包埋具有强大的益处。即使在 25 天后，TBARS 值与微胶囊制备后第 1 天相比也没有太大变化。3结论喷雾干燥技术在香精和香料的包埋中已经得到了广泛关注和应用。它可以生产高质量的包埋粉末并延长产品的保质期。本文综述了载体性质、乳液特性和喷雾干燥参数对微胶囊干燥的影响。BUCHI 喷雾干燥仪 B-290 为许多客户提供了可靠且受欢迎的解决方案，以支持他们的微胶囊研究。使用该设备开发的产品现在和将来都将被纳入到广泛领域内，例如增强健康油脂输送的补充剂等等。4参考文献Gharsallaoui., A. Roudaut., G. Chambin, O. Voilley., A. Saure, R., Spray Drying Microencapsulation of Food Ingredients. Food Research International 2007, 40, 1107-1021.Di Battista, C. A. Constenla, D. Ramírez-Rigo, M. V. Piñ a, J., The use of arabic gum, maltodextrin and surfactants in the microencapsulation of phytosterols by spray drying. Powder Technology 2015, 286, 193-201.Noello, C. Carvalho, A. G. S. Silva, V. M. Hubinger, M. D., Spray dried microparticles of chia oil using emulsion stabilized by whey protein concentrate and pectin by electrostatic deposition. Food Research International 2016, 89, 549-557.转载请注明出处！

为回馈用户多年来对我们的支持与厚爱，埃朗科技国际贸易（上海）有限公司定于2012年5月1日至2012年12月31日开展 &ldquo 买低温恒温水槽送搅拌器&rdquo 活动。具体内容如下：1、凡在活动期间，向埃朗科技国际贸易（上海）有限公司购买由上海爱朗仪器有限公司生产、品牌为EYELA的附带磁力搅拌功能的低温恒温水槽PSL-1400两台或者PSL-1810一台，即可获赠由上海爱朗仪器有限公司生产的EYELA品牌的NZ系列强力搅拌器一台（4种型号中任选一种）。2、本次活动不设赠送台份上限，多买多送，可多次购买。3、此活动期间所购买的PSL-1810/1400低温恒温水槽及所赠送的NZ系列搅拌器均享有正常的售后服务。4、本次活动只针对中国大陆地区的客户。5、参与买低温恒温水槽送搅拌器活动的产品不再享受其它形式的优惠，赠品不可折算为现金优惠。6、本次活动的最终解释权归埃朗科技国际贸易（上海）有限公司所有。 关于本次活动的详情，请咨询我公司营业部。联系电话：010-84264220-8008传真号码：010-84264233联 系 人：何 佳电子邮件：j-he@eyela.co.jp