分子筛BioSep-SEC-S3000鉴定白介素,上样100ul,浓度约0.1mg/ml。0.5ml/min,温度20,PBS buffer,为什么总是脱尾???
高效凝胶色谱法测定重组人白介素-l1的含量 来自《东方医药网》 摘要 目的:建立重组人白介素-11的高效凝胶色谱含量测定方法。方法:采用外标法,色谱柱:Biosep SEC-S2000 (300mm×7.8 mm),流动相:0.2mol/L 磷酸盐缓冲液(pH 6.8),流速:0.5 mL/min,检测渡长:280nm。结果:线性范围:2.5~30μg(r=0.9990),平均回收率101.1%~101.9%(RSD 1.8%,n=9) 精密度:RSD= 0.75%( n=5);最低检测限0.15μg。结论:该法用于测定重组人白介素-11的含量,简便,准确,重现性好。 关键词:重组人白介素-11;高效凝胶色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=21282]高效凝胶色谱法测定重组人白介素-l1的含量[/url]
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
一、原理采用两株识别不同表位的抗IL-8单克隆抗体,其中一株(4D7)作为包被抗体,以识别和结合待检标本中的IL-8,另一株作为酶标抗体,与结合于包被抗体的IL-8的另一个表位结合并催化底物显色。二、试剂器材1. 试剂盒提供包被抗体、酶标抗体、标准品,底物(ABTS)、96孔elisa板。2. 包被缓冲液、PBS、底物缓冲液配制同常规ELISA法。三、操作步骤:1. 包被:pH9.5 碳酸盐缓液稀释4D7单克隆抗体粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔,放4℃,36小时。2. 封闭:0.1%吐温PBS(Buffer A)冲洗96孔板三次,加3%BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔,放37℃,1小时。3. 加待检样品:Buffer A 冲洗96孔板三次,加待检样品及Buffer B 稀释的标准品100μl/孔,放37℃,3小时。4. 加酶标抗体:Buffer A冲洗96孔板五次,3%PEG Buffer A稀释酶标抗体至1∶800,加入96孔板,100μl/孔,放37℃,1小时。5. 显色:Buffer A冲洗96孔板五次,pH5.4柠檬酸缓冲液溶解底物(ABTS),0.2mg/ml,加3%H2O2,2μl/ml,加入96孔板,100μ/孔,室温下或37℃显色。四、注意事项:1. 待检标本如为血清,应采用一次性容器,血液采集后尽快(6小时以内)分离血清。2. 封闭液或抗体稀释液应新鲜配制或冻存。
科技日报讯(戴欣郭阳虎)近日,解放军302医院临床检验医学中心科研人员开发出一种针对丙型肝炎患者的新型基因检测技术。该技术对患者本身的白介素28B基因进行多态性分析,在国内率先将多色荧光探针技术(PCR)运用于丙肝患者临床抗病毒疗效的预测和评估中。这为快速检测丙肝患者对某种抗病毒药物是否有效提供了重要依据,从而能更有效地指导临床医务人员准确选择用药,提升治疗效果。 由于患者身体基因型的不同而导致抗病毒用药使用疗效的差异,一直是广大医师用药的困扰。业界许多专家认为,丙肝患者体内白介素28B基因的分布与抗病毒疗效可能存在非常密切的关系,掌握其分布有助于更准确的用药选择。目前国内外科研人员已相继开发了多项针对这一基因位点的检测技术,但由于操作程序复杂、周期长、准确性较差,很难应用推广,给丙肝临床诊断治疗带来一定困难。 302医院的临床检验医学中心毛远丽和王海滨带领的课题组,通过对上千例丙肝患者基因样本进行分析、检测,成功研制出一套针对丙肝患者的抗病毒治疗易感基因检测技术。该技术对多组白介素28B的基因进行筛选,通过合成DNA序列探针,构建双色荧光PCR体系,通过对患者的染色体内白介素28B的基因进行多态性分析,从而得出患者本身个别基因突变的位点。运用该方法,一小时即可完成检测,快速准确,能为患者的临床治疗提供更加准确有效的诊疗依据。 该技术在国内率先将多色荧光探针技术运用于丙肝患者临床抗病毒疗效的预测和评估,大大提高了丙肝临床诊治水平,也标志丙肝个性化诊疗迈出了重要一步。它有助于临床医生更好地选择适合丙肝患者的个性化治疗方案,准确选择抗病毒药物的种类和治疗持续时间,有效缩短患者治疗时间的同时减少就医成本。来源:中国科技网-科技日报 作者:郭阳虎 2014年01月21日
想咨询下雷杜酶标仪可以做细胞因子定量么?比如白介素 肿瘤坏死因子等等 哪一家的试剂盒可以做呢 谢谢
生物制剂 是用病原微生物(细菌、病毒、立充次体)、病原微生物的代谢产物(毒素)以及动物和人血浆等制成的制品,可用于预防、治疗和诊断疾病。用于防治传染病的生物制品可分为人工自动免疫制品(如疫苗和类毒素等)和人工被动免疫制品(如丙种球蛋白、白喉抗毒素、破伤风机毒素等)常用的生物制剂有干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等。其主要特点为: 1、生物活性功能多,均具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节活性。 2、作用范围广,在体外这些生物制剂几乎对所有肿瘤细胞都有抑制效应。 3、对机体的免疫功能有调节增强作用。
【序号】:1【作者】: 张齐好 郑炜炜【题名】:悬滴培养诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞【期刊】:中国病理生理【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgblslzz201011024.aspx【序号】:2【作者】: 兰玲 陈源文【题名】:腺病毒介导的白介素10基因体外转导大鼠β2m^-/Thy-1^+骨髓源性肝干细胞【期刊】:【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:http://www.cqvip.com/qk/98512x/2008001/26294118.html
本人刚接触气相没多久 最近做了一个蛋白液的乙腈残留,参考了药典白介素的方法,精密量取1ml顶空进样(1ml定量环),80℃平衡30min,4ml/min柱流速,45摄氏度等温,分流比5:1。对照为0.0004%乙腈,超纯水稀释,峰面积大约35左右。样品为蛋白液,其中有多种无机盐,twen80。问题:现在做了挺多样品,对照品出峰重现性还可以接受,倒是样品峰面积直接差到姥姥家了,几乎每次都相差很大,一个峰面积为5,下一针可能就是20!求有这方面经验的大神不吝赐教啊!
来自华东师范大学生命科学学院、加州大学圣地亚哥分校等机构的研究人员在新研究中揭示了伤口愈合过程中促进上皮细胞增殖的关键分子抗菌蛋白REG3A,这有可能为治疗银屑病和难以愈合的皮肤伤口提供新方法。相关论文发表在Cell杂志旗下的《免疫》(Immunity,IF:24.221)期刊上。文章的通讯作者是华东师范大学生命科学学院上海市调控生物学重点实验室赖玉平研究员。目前主要研究方向是增强皮肤免疫能力来抗衡微生物入侵和/或感染以及调节银屑病人的再生胎牛血清胰岛源蛋白3A 的表达。上皮角质细胞增殖是皮肤在损伤后正常愈合的必要条件,对于维持皮肤的完整性非常重要。异常的上皮增殖是导致银屑病和其他皮肤紊乱性疾病的一个内在因素。然而目前科学家们对于触发上皮增殖的因子还并不是很清楚。在这篇文章中,研究人员分别对银屑病病人的皮肤样品、银屑病小鼠皮肤样品以及正常小鼠背部伤口的皮肤样品进行了皮肤活组织检测,他们发现胰岛再生源蛋白REG3A分子在这两种皮肤样品中山羊血清都有高表达,但在正常皮肤中没有。他们的研究还进一步阐明了REG3A和相关级联分子的关系,明确指出在皮肤细胞中,白介素-17(IL-17)与白介素-17的受体A(IL-17 RA)结合后能促进REG3A的表达。而REG3A表达后,能与EXT样蛋白3(EXTL3)结合,通过活化一些蛋白酶( PI3K-AKT)来诱导皮肤角质形成细胞的增殖,从而促进表皮增生和伤口愈合。这些研究结果揭示了分泌型肠抗菌蛋白REG3A可通过IL-17诱导促进皮肤角化细胞增殖,表明REG3A可能调节了在正常损伤修复和银屑病的表皮过度增殖。 最为重要的是,该发现将为银屑病的治疗提供潜在的新靶点。银屑病是临床常见的一种自身免疫炎症性皮肤病。目前尚无有效的治疗方法,往往症状缓解后复发,且复发时病情加重。研究表明直接干扰银屑病关键蛋白IL-17虽然能够改善病情,但存在严重的免疫抑制风险。开发REG3A小分子药物或能避开这些问题,为银屑病提供更有效安全的治疗。此外,这类药物还有特级胎牛血清可能用于治疗促进伤口愈合。
转从:中国分析网,很不错的一网站。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16097]YYSWXS0296 蛋白质 糖蛋白重组人白介素 4受体 N-糖基化位点测定 基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16098]YYSWXS0281 蛋白质 β-casein的磷酸化分析 电喷雾质谱法[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16099]YYSWDB0131 蛋白质细胞色素C 分子量的测定电喷雾质谱法[/url]
【序号】:1【作者】:李娜 武荣 周海燕 【题名】::地塞米松对重症胎粪吸人幼兔肺组织中肿瘤坏死因子α和白介素8水平的影响【期刊】: 中国新生儿科杂志【年、卷、期、起止页码】: 2012年第27卷第1期 57-59页【全文链接】:http://cqvip.jsinfo.gov.cn/qk/98402A/201201/40569162.html【序号】:2【作者】:武荣 李娜 周海燕 刘石 【题名】::地塞米松对重症胎粪吸入新生兔环氧化酶水平的影响【期刊】:中国医药【年、卷、期、起止页码】:2011年第6卷第3期 349-350页【全文链接】:http://cqvip.jsinfo.gov.cn/qk/88539X/201103/36892858.html【序号】:3【作者】:李娜 周海燕 武荣 【题名】:地塞米松治疗新生兔胎粪吸入的肺组织病理观察【期刊】: 安徽医学年、卷、期、起止页码】: 2010年第31卷第10期 1211-1213页【全文链接】:http://cqvip.jsinfo.gov.cn/qk/91545X/201010/35569200.html【序号】:4【作者】:詹峰 武荣 金桂红 周海燕 李娜 胡波【题名】:氨茶碱对重症胎粪吸入新生兔的TNF-α和IL-8水平的影响【期刊】:中国医药导报【年、卷、期、起止页码】:2011年第8卷第9期 20-22页【全文链接】:http://cqvip.jsinfo.gov.cn/qk/61014A/201109/37166430.html【序号】:5【作者】:詹峰武荣周海燕李娜【题名】:氨茶碱治疗新生兔重度胎粪吸入时的病理改变【期刊】: 医学综述年、卷、期、起止页码】:2010年第16卷第23期 3654-3656页【全文链接】:http://cqvip.jsinfo.gov.cn/qk/98202X/201023/36211330.html
95%。目前细胞分选主要用于研究,临床应用较少。血液学应用最多的是造血干细胞的研究,最近随着造血理论的深入研究关于造血干细胞究竟是否都是CD34+细胞出现一些争论,实验研究证明, CD34-造血干细胞较CD34+造血干细胞更具造血潜能,这些实验研究所用的CD34- 和CD34+细胞就是通过细胞分选获得的。小鼠造血干细胞分选一般按lin-c-Kit+CD34+/ lin-c-Kit+CD34-分选,人造血干细胞分选一般按lin-CD34+/ lin-CD34-分选。 为避免某些遗传性血液病如海洋性贫血、异常血红蛋白病的纯合子出生,产前诊断非常重要,这些疾病的主要靶细胞是红细胞,而孕妇血循环中存在着胎儿有核红细胞,只是数量非常少,利用流式细胞仪可从孕妇血液中分选出胎儿有核红细胞(分选条件:CD45-GPA+)进行基因分析,作出产前诊断。利用流式细胞仪分选免疫担当细胞进行细胞免疫学研究也是目前的热门课题。总之,流式细胞仪能够分选出你想得到的任何一亚群细胞,只要你想得到的某一亚群细胞有合适的单克隆抗体标记,流式细胞仪的分选功能将得到越来越多的科学研究和临床应用。二十二. 流式细胞术在血液学中的应用 其他流式细胞仪可能在两方面对骨髓增生异常综合症(MDS)有用,一是测定CD34阳性细胞数,以监测病情,二是测定核蛋白增殖因子(PCNA),有报告PCNA再在生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、白血病三种疾病中表达有明显差异,可辅助鉴别诊断。 此外流式细胞仪也可检耐药蛋白,如肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药蛋白(MRP)、 P170等。 流式细胞仪也可检测细胞因子,细胞内细胞因子如白介素系列(IL-1—IL-14),肿瘤坏死因子(TNF),干扰素(IFN)等,[/color
序号:2文章名:白介素-6与1,25(OH)2维生素D3联合作用下大鼠骨髓破骨细胞的体外诱导培养作者:李永明; 林珠; 唐林; 张晓东;期刊:口腔医学 2005.05 第17-19页全文链接:http://www.cnki.net/KCMS/docdown/pubdownload.aspx?dk=U_WEEvREcwSlJHSldTTEYyQzNhNnM5N0RiWWRQWXBRUlFCVmltUUt6L2lwMkRQUHlUSFdPSHNEajQ4UjRTRDFNPQ_F_kqyx200505008_P_17_19_D_pdfdown序号:2文章名:IL-6与OPG/RANKL/RANK信号通路在风湿性关节炎发病机制中的作用作者:李盛村; 鲍捷; 王国祥;期刊:现代预防医学 第1-6页全文链接:http://www.cnki.net/KCMS/docdown/pubdownload.aspx?dk=U_WEEvREcwSlJHSldTTEYyQzNhNnM5N0RiWWRQWXBRUlFCVmltUUt6L2lwMkRQUHlUSFdPSHNEajQ4UjRTRDFNPQ_F_xdyf20120919011_P_D_pdfdown
[font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:11000023210200070751-XM001项目名称:临床检测用试剂采购项目预算金额:2129.3466 万元(人民币)采购需求:[table][tr][td]包号[/td][td]品目号[/td][td]标的名称[/td][td]采购包分品目预算金额(万元)[/td][td]数量[/td][td]单位[/td][/tr][tr][td]1[/td][td]1-1[/td][td]血小板聚集功能检测试剂盒(光学比浊法)[/td][td]755.9786[/td][td]15[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]1-2[/td][td]血小板聚集功能检测试剂盒(光学比浊法)[/td][td]30[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]1-3[/td][td]反应杯[/td][td]200[/td][td]个[/td][/tr][tr][td]1-4[/td][td]搅拌珠[/td][td]30[/td][td]个[/td][/tr][tr][td]1-5[/td][td]非衍生化多种氨基酸、肉碱和琥珀酰丙酮测定试剂盒(串联质谱法)[/td][td]5760[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-6[/td][td]样本萃取液及流动相溶剂包(串联质谱法)[/td][td]5760[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-7[/td][td]琥珀酰丙酮样本前处理液(串联质谱法)[/td][td]5760[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-8[/td][td]样本释放剂[/td][td]5600[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-9[/td][td]维生素检测仪用样本处理液VB6[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-10[/td][td]维生素检测仪用样本处理液VB1/C[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-11[/td][td]维生素检测仪用样本处理液VB2[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-12[/td][td]维生素检测仪用样本处理液VB9/B12[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-13[/td][td]维生素检测仪用样本处理液VA/D/E[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]1-14[/td][td]样本稀释液[/td][td]18000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4[/td][td]4-1[/td][td]巨细胞病毒IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)[/td][td]253.5547[/td][td]1200[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-2[/td][td]单纯疱疹病毒1+2型IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)[/td][td]1200[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-3[/td][td]弓形虫IgM抗体测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]1200[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-4[/td][td]风疹病毒IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)[/td][td]1200[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-5[/td][td]EB病毒早期抗原IgG抗体测定试剂盒(化学发光免疫分析法)[/td][td]4000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-6[/td][td]EB病毒衣壳抗原IgG抗体测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]4000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-7[/td][td]EB病毒衣壳抗原IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)[/td][td]4000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-8[/td][td]EB病毒核抗原IgG抗体测定试剂盒(化学发光免疫分析法)[/td][td]4000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-9[/td][td]增强液[/td][td]33.12[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]4-10[/td][td]清洗液[/td][td]144[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]4-11[/td][td]反应杯[/td][td]46080[/td][td]个[/td][/tr][tr][td]4-12[/td][td]光路检测试剂盒[/td][td]96[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-13[/td][td]免疫球蛋白A测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]315[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-14[/td][td]免疫球蛋白G测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]315[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-15[/td][td]免疫球蛋白M测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]315[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-16[/td][td]多项蛋白质控品(高值)[/td][td]30[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-17[/td][td]多项蛋白质控品(中值)[/td][td]30[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-18[/td][td]多项蛋白质控品(低值)[/td][td]30[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-19[/td][td]多项蛋白定标品[/td][td]15[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-20[/td][td]SCS清洁液[/td][td]150[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-21[/td][td]稀释杯[/td][td]46200[/td][td]个[/td][/tr][tr][td]4-22[/td][td]样本密度分离液[/td][td]300[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-23[/td][td]样本稀释液[/td][td]300[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]4-24[/td][td]缓冲液[/td][td]300[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]4-25[/td][td]反应杯[/td][td]1500[/td][td]个[/td][/tr][tr][td]4-26[/td][td]免疫球蛋白G1测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]72[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-27[/td][td]免疫球蛋白G2测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]72[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-28[/td][td]免疫球蛋白G3测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]96[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-29[/td][td]免疫球蛋白G4测定试剂盒(散射比浊法)[/td][td]96[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-30[/td][td]α肿瘤坏死因子测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-31[/td][td]全自动免疫检验系统用底物液[/td][td]15.75[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]4-32[/td][td]探针清洗液[/td][td]10[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]4-33[/td][td]探针清洁试剂盒[/td][td]500[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]4-34[/td][td]一次性样本杯[/td][td]50000[/td][td]个[/td][/tr][tr][td]4-35[/td][td]白介素-1β测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-36[/td][td]白介素2受体测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-37[/td][td]白介素-6测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-38[/td][td]白介素-8测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]4-39[/td][td]白介素-10测定试剂盒(化学发光法)[/td][td]9000[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5[/td][td]5-1[/td][td]绝对计数管[/td][td]269.9333[/td][td]9700[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-2[/td][td]淋巴细胞亚群检测试剂(流式细胞仪法-6色)[/td][td]9700[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-3[/td][td]CD45RA检测试剂[/td][td]2300[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-4[/td][td]CD4检测试剂[/td][td]2300[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-5[/td][td]白细胞分化抗原CD38检测试剂(流式细胞仪法-APC)[/td][td]2400[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-6[/td][td]白细胞分化抗原CD3检测试剂(流式细胞仪法-APC)[/td][td]3500[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-7[/td][td]CD25检测试剂[/td][td]2400[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]5-8[/td][td]流式细胞分析用溶血素[/td][td]3600[/td][td]毫升[/td][/tr][tr][td]5-9[/td][td]流式细胞分析用鞘液[/td][td]960[/td][td]升[/td][/tr][tr][td]6[/td][td]6-1[/td][td]七项呼吸道病原体核酸检测试剂盒 (双扩增法)[/td][td]731.48[/td][td]7680[/td][td]人份[/td][/tr][tr][td]6-2[/td][td]三项呼吸道病毒核酸检测试剂盒 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http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201110/2011100810195848.jpg上海医学专家10月7日表示,首次发现银屑病——俗称“牛皮癣”的致病“元凶”——真皮内γδT淋巴细胞。该项研究可能为今后开发有针对性的治疗药物提供“靶点”。上海交通大学医学院附属瑞金医院皮肤科与美国路易斯维尔大学医学院免疫、肿瘤与生物医学中心严俊教授课题组合作的成果——“真皮γδT细胞是炎症性皮肤病IL-17的主要产生细胞”发表在最新一期的国际医学顶级杂志——《免疫》(Immunity)杂志上。该文第一、第二作者为瑞金医院青年医师蔡怡华和沈雁。据悉,银屑病发病率高,其中的脓疱型和红皮病型等特殊类型病情有为严重,甚至危及生命;关节病型在所有关节炎中致残最为严重。中华医学会皮肤性病学分会副主任委员、上海瑞金医院皮肤科主任郑捷告诉记者,当前,国际医学界并无根治银屑病的方法。近百年来,银屑病的治疗经历代谢治疗、感染治疗、免疫治疗不同阶段,均因剂量致死、高肿瘤发病率、易引发银屑病性心脏病等原因无法继续。因为始终没有找到发病机制,银屑病的治疗在缓解、复发、加重的怪圈中徘徊。根据近年来中国各地皮肤科专家的统计,银屑病在中国的发病率约1%。此外,近年来,随着感染性皮肤病患者人数减少,银屑病在病种构成中的比率上升。这项研究结果首度证实:导致银屑病发生的白介素17(IL-17)并不是长期以来认为的来自于血循环中的Th17细胞,而是由真皮内的γδT细胞产生。郑捷说,这一研究方法和结果不单对银屑病,还对其它各器官疾病的病因学研究都具有启示意义。该研究结果也为瑞金医院皮肤科长期坚持以针对皮肤的方法治疗银屑病、不主张过多的系统用药,提供了理论依据。据了解,国际医学界重视这项研究结果的意义还在于它可能为今后开发有针对性的治疗药物提供了药物作用的“靶点”。
70kDa)中的七个得到了可溶性表达,而其它的融合标签(GST,MBP和hexahistidine)系统则只得到了四个可溶性表达的蛋白。表1. 用大量的目标蛋白评估NusA标签对提高融合蛋白可溶性的作用参考文献a目的蛋白数目目的插入序列种属目标蛋白大小范围NusA融合蛋白可溶性比例Shih等(2002)40酵母,哺乳动物,植物,昆虫9-10060Korf等(2005)75人6-12760bKohl等(2008)96人1-11844ca. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器,质膜或者骨架的蛋白,相对于其它标签系统来讲,NusA标签是最好的可溶性表达的选择。Kohl等(2008)也发现只要在20-25℃诱导表达,NusA标签能够大大提高难表达的蛋白比如膜蛋白的可溶性。与Korf等的研究结果一致,Kohl等也发现25℃诱导表达比30℃或37℃诱导表达可以纯化得到更多的NusA融合蛋白。切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白表2总结了16个采用NusA标签成功获得可溶性蛋白,在切除标签后这些蛋白仍有正确折叠结构和活性。大部分这种研究是是关于分子量小于或接近20kDa的目标蛋白。纯化后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括:■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶(Ermolova 2003)——目标蛋白切除标签后用BDA(蓝色葡聚糖)亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。■ Xklp3a,Tep3Ag和E8R(De Marco 2004)——用蛋白酶切割后,His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除。与Ni2+亲和结合的标签被紧密地结合在树脂上,在流出液中则可以得到纯化的目的蛋白。所有这三种蛋白在纯化后都正确折叠且均一分散在溶液中。纯化的膜结合蛋白E8R牛痘病毒蛋白在Tris缓冲液中除去NusA后出现了沉淀,然而加入0.02%的月桂酰基麦芽糖苷和150mM的氯化钠后,蛋白又重新变得可溶。■ 环麦芽糖糊精酶(Turner 2005)——这个蛋白属于α-淀粉酶家族。这个家族的蛋白通常在大肠杆菌中很难以活性形式表达出来。将其与肠激酶混合孵育24小时以上会使其活性逐渐增强,直到达到未经肠激酶处理过的融合蛋白的2倍以上,这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。■ 八种人趋化因子(Magis-trelli 2005)——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag(亲和素)生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性,而没有一个融合蛋白有这样的活性。■ 蚯蚓血红蛋白(Karlsen 2005)——酶切后,用分子筛分离纯化蚯蚓血红蛋白,纯化后的蛋白通过圆二色谱检测得到的α-螺旋结构与模型预期结果一致,且纯化后的蛋白可以以单体的形式稳定保存。■ 人白介素-29(Li 2006)——用S-蛋白亲和层析比Ni2+亲和层析可以得到更纯的目的蛋白。将融合蛋白N端的NusA/His•Tag®/S•Tag™标签切掉后,用链亲和素琼脂去除生物素标记的凝血酶。用水疱性口膜炎病毒(VSV)处理固定的人羊膜上皮细胞(WISH 细胞)后,通过检测纯化的IL-29对细胞的保护效应来检测其抗病毒活性。■ 人干扰素-λ2(Li 2007)——酶切后,用Novagen提供的EKaptureTM琼脂除去重组的肠激酶。先用纯化后的干扰素-λ2处理WISH细胞,24小时后加入VSV病毒,可以观察到干扰素-λ2可以有效地保护细胞免于病毒介导的病变。表2. 切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白参考文献目的蛋白目的蛋白分子量(kDa)切割用蛋白酶融合蛋白亲和层析固定介质纯化后目的蛋白产量(mg/L)Ermolova等(2003)植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶32凝血酶Ni2+1.5De Marco等(2004)Xklp3ATep3AgE8R15NRa32bTEV酶TEV酶TEV酶Ni2+5.02.54.0Turner等(2005)环麦芽糖糊精酶69肠激酶Cu2+1.6Magistrelli等(2005)八种人趋化因子8-21Xa因子Ni2+30-100Karlsen等(2005)蚯蚓血红蛋白15TEV酶Ni2+NRaLi和He(2006)人白介素-2920凝血酶S-蛋白60Li和Huang(2007)人干扰素-λ220肠激酶Ni2+65a. 未报道b. 根据NCBI报道预测的全长蛋白分子量与NusA标签融合且具有活性的蛋白 与这些切除NusA标签后保持活性且正确折叠的蛋白不同,还有很多报道指出目的蛋白在“NusA-目的蛋白”的融合形式时具有很好的活性。比如单链(ScFv)催化活性抗体14D9(Zheng 2003),来自Aequorea victoria的绿色荧光蛋白(Nallamsetty 2006),人二氢叶酸还原酶(Nallamsetty 2006),来自Ensis directus蛏子的精氨酸酶激酶(Compaan 2003),来自B. thuringiensis的修饰δ-内毒素(Kumar 2005),人BCMA跨膜受体(Guan 2006),植物α-双加氧酶1(Liu 2006),以及来自Plasmodium falciparum的b-ketoacyl-acyl载体蛋白合成酶(Lack 2006)等,反映了各种不同背景的蛋白都显示出了与NusA标签融合后的活性。NusA标签提高蛋白可溶性的可能机制 Houry(1999)等揭示NusA蛋白是分子伴侣GroEL在体内的必须底物。而GroEL与其共作用因子GroES是大肠杆菌唯一的在所有生长条件下必需的分子伴侣系统。Douette等(2005)研究了融合蛋白NusA-UCP1(uncoupling protein 1)的可溶产量。UCP1是一种线粒体膜蛋白。这些作者发现16℃培养时,当GroEL共过表达的情况下,融合蛋白的可溶性有更大的提高。这个结果也表明NusA与分子伴侣途径相作用,从而阻止参与蛋白的聚集。总结 已有充分的证据证明NusA标签系统能显著提高多种不同来源蛋白的可溶性表达,而这些蛋白在单独表达时往往形成不可溶的包涵体。在一些研究报告中,用蛋白酶切除NusA标签能使目的蛋白仍保持正确折叠和生物学活性;相反,在另外许多报道中也指出当目的蛋白与NusA融合而非切除时,融合蛋白也同样具有活性。NusA标签系统的成功至少部分地是由于其与大肠杆菌分子伴侣系统相互作用的结果。
4月11日,《公共科学图书馆—综合》(PLOS ONE)杂志发表了武汉大学基础医学院和美国M.D.安德森癌症中心的科学家的研究论文,解析了IL-17细胞因子家族成员IL-17F对于结肠癌发生发展的影响及其分子机制。Th17是一种近年来被发现的在炎症性疾病和自身免疫疾病中起主导作用的效应T细胞,其产生的特征性细胞因子白介素17 (IL-17)越来越广泛地受到关注。迄今为止,已发现了六个IL-17家族成员IL-17 A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E(亦命名为IL-25)和IL-17F,以及五个IL-17受体(IL-17RA-IL-17RE)家族成员。其中IL-17F与IL-17A具有最高同源性。有研究证实IL-17F在免疫反应中发挥多重功能。过去的研究表明IL-17A在癌症形成中发挥重要作用,然而对于IL-17F是否也在肿瘤形成中起作用却并不清楚。研究人员证实IL-17F表达于正常人类结肠上皮细胞中,然而在结肠癌组织中IL-17F的表达显著减低。为了进一步检测IL-17F在结肠癌中的作用。研究人员对IL-17F过表达的结肠癌细胞系和IL-17F缺陷小鼠进行了研究。研究人员在小鼠实验中证实相比于移植到小鼠体内的对照组细胞,转染IL-17F的结肠癌细胞生长显著减慢。IL-17F基因敲除小鼠在接受结肠癌细胞移植后肿瘤数目和肿瘤体积相较于野生型对照组大大增高。这些结果表明IL-17F在结肠癌形成中发挥了重要的抑制作用。在IL-17F过表达的肿瘤中,研究人员未发现白细胞渗出发生显著改变,然而却证实VEGF水平和CD31+细胞出现下降。在IL-17F缺陷结肠癌小鼠组织中VEGF水平则显著增高。新研究结果表明IL-17F在结肠癌形成中发挥了保护性功能,而这一作用或有可能是通过抑制肿瘤血管形成而实现的。(
elisa试剂盒种类繁多,有检测食品残留物的食品安全检测elisa试剂盒,也有检测动植物的人elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,植物elisa试剂盒;还有检测细胞因子试剂盒,传染病检测ELISA试剂盒,肿瘤标志物检测ELISA试剂盒等等,下面为您详细介绍常见的一些elisa试剂盒种类有哪些。一、食品安全检验ELISA试剂盒是指食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒,以及微生物、维生素等的检测产品。包括植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒,以及动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒。二、生物原装ELISA试剂盒以及各类国产ELISA试剂盒1、细胞因子检测试剂盒:如白介素、选择素、集落刺激因子,肿瘤坏死因子,干扰素,转化生长因子,趋化因子,细胞因子受体,粘附分子,生长因子,凋亡因子等等2、心肌梗塞检测ELISA试剂盒如肌钙蛋白,肌红蛋白,C-反应蛋白等等3、内分泌检测ELISA试剂盒如甲状腺,胰腺,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇,5-羟色胺,17-羟孕酮等等4、肝纤维化检测ELISA试剂盒如纤维连接蛋白,透明质酸,胶原,基质金属蛋白酶抑制因子,基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等5、自身免疫检测ELISA试剂盒如甲状腺,盐水可提取核抗原抗体(ENA),抗核抗体,DNA,抗心磷脂抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体,胰蛋白酶原,Sm,大疱性类疱疮,蛋白酶,短膜虫法,肝-肾,肝-肾-胃,肌内膜抗体,角蛋白抗体,抗核抗体,抗核糖体蛋白抗体,抗聚角蛋白微丝蛋白抗体,抗链O,抗卵巢抗体,抗平滑肌抗体,抗线粒体抗体,等等7、优生优育检测ELISA试剂盒如早早孕,新生儿TSH,胎膜早破检测,抗子宫内膜抗体,抗心磷脂抗体,抗透明带抗体,抗卵细胞透明带抗体,抗卵巢抗体,抗精子抗体,巨细胞病毒,弓形体,风疹病毒,分娩预测,单核白细胞增多症,单纯疱疹病毒,促卵泡素,促黄体生成素,便隐血试纸,HCG等等8、传染病检测ELISA试剂盒如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB 病毒,A族链球菌等等9、特种蛋白检测ELISA试剂盒如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
[align=center]抗癌药物应用中的临床药学[/align][align=center] [/align][align=center]摘 要[/align][align=center] [/align][align=left]恶性肿瘤严重威胁人类健康,死亡率占所有疾病死亡率的首位,引起人们的普遍关注。提高抗癌药物药效可以明显延长患者的生命并且提高患者的生活质量,减轻痛苦。因此,抗癌药物发挥最大药效的研究十分必要。临床药学是研究药物防治疾病的合理性和有效性的药学学科,近十几年来在我国得到了广泛重视并有了极大的发展。本文主要就抗癌药物如何发挥最大药效进行分析和探讨,阐述了各方面的研究进展和不足,并对抗癌药物的发展前景进行了展望。随着医药学的飞速发展,更先进合理的肿瘤治疗方案必将普遍运用于临床。[/align][align=left] [/align][align=left]关键词:抗癌药物;应用;临床药学;研究进展[/align][align=center] [b]Applicationof anticancer drugs in clinical pharmacy [/b][/align][align=center][b]ABSTRACT[/b][/align][align=center][b] [/b][/align]Malignant tumor is a serious threat to human health,its mortality accounts for the first place of all disease’s mortality, thus hascaused the widespread attention worldwide. Improving the efficacy of anticancerdrugs can prolong the lifetime of patients and improve their quality of life withthe alleviated pains. Therefore, study on the efficacy of anticancer drugs is maximumnecessary. Clinical pharmacy is a pharmaceutical subject includes validity of thestudied drugs for their prevention and treatment of the diseases in the pastdozen years, which has been widely concerned and has a great development in China. This papermainly analyzed and discussed how to maximize the efficacy of anticancer drugs,and the progress on various aspects and its shortcomings, and the development ofanticancer drugs was also prospected. With the rapid development of medicinetoday, more advanced tumor reasonable treatment program will be generally used inclinic.[b]Keywords[/b]: Anticancerdrugs Application Clinical pharmacy Research progress[align=center] [/align][b]1 引言[/b]近年来,由于对抗癌药物作用原理有了更深的了解,加之临床上可用于恶性肿瘤的治疗药物不断增加,化学治疗已由单药连续化疗过渡到多药联合、间段大剂量用药,使化疗效果有很大改善,成为抗恶性肿瘤的一种“根治性”手段[sup][/sup]。另外,增强抗肿瘤老药的药效也正在成为肿瘤治疗药物开发中的新关注对象[sup][/sup]。但由于人们对抗癌药物认识不足,药源性疾病不断增加,导致无数人命丧九泉的事实,促使临床药学迅速崛起。临床药学主要通过药师进入临床,运用药学专业知识,协助医师提出个体化给药方案,并监测患者的整个用药过程,从而提高药物治疗水平,发挥药物的最大药效。在抗癌药物的应用中,从临床药师的干预、最大限度克服耐药性等方面提高药物治疗水平,发挥药物的最大药效至关重要。[b]2 临床药师的干预[/b][align=left]化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时也会对人体正常细胞产生损伤,导致化疗相关毒副反应,并且化疗方案常常需多药联合、放化疗联合,使得化疗药的不良反应相对更多。临床药师可通过对化疗药及辅助用药的选择、剂量的调整、药物的相互作用及用药教育等几方面干预肿瘤患者的临床用药,提升合理用药水平,减少不良反应的发生率,从而提高患者的生存质量。[/align][align=left]2.1 药物的选择[/align]化疗方案制定前应全面评估患者的身体状态,充分了解肿瘤累及的范围,明确临床分期、既往接受药物治疗后的疗效等,权衡患者对抗肿瘤药物治疗的接受能力、对可能出现的毒副反应的耐受力和经济承受力等因素,协助医师进行药物筛选,制定个体化的药物治疗方案。治疗时要清楚方案中哪些药物需要做药学监护、监测指标及监测周期,并随患者病情变化及时调整,尽量规避风险,客观评估疗效[sup][/sup]。临床药师可以通过比较同类药物的药动学、药效学、不良反应等方面的差别,协助医师把药疗方案设计得更完善、实用、规范。临床医师选药一般是从药品的适应症和禁忌症等方面考虑,而临床药师可从“专治”“首选”“药物相互作用”“成本/效果值最合理”来考虑。例如,从药物相互作用方面考虑,联合用药是肿瘤科较为常见的一种治疗手段,其目的是为了达到药物间的协同作用以增加疗效,减少毒副反应。但肿瘤患者尤其是病情危重患者使用药品种类繁多,易发生药物相互作用[sup][/sup]。对可能存在的药物相互作用,药物与食物间的相互作用,临床药师要特别关注。实际工作中药物相互作用问题比较复杂,有药剂学,药代动力学及药效学方面的多种原因。当给医师提出药物相互作用的警示时,还要考虑是否有可替换的无相互作用的药物。如果有可供选择的药物,就调整为其他无相互作用的药物。如果没有可供选择的药物,可采用药物代谢动力学了解药物的清除情况,分析其血药浓度并调整剂量,将药物的相互作用降至最低[sup][/sup]。例如,使用培美曲塞时补充叶酸可降低培美曲塞的毒性[sup][/sup];甲氨蝶岭与其他骨髓毒性药物合用,可进一步抑制骨髓机能。大剂量使用该药后4-24h内静脉或口服给予亚叶酸钙,可防止发生严重而持续的骨髓抑制;白介素2能降低达卡巴嗪的血浆浓度,可能由于提高了达卡巴嗪的分布容积之故。白介素2与地塞米松合用可使患者耐受更大剂量的白介素2,并减轻其毒性[sup][/sup]。此外,化疗辅助药是化疗方案顺利实施的保证,也是减轻化疗毒副作用、减少患者痛苦的主要措施。因此正确选择辅助药也是临床药师的干预点之一,防治骨髓抑制药和止吐药是化疗时常用的辅用药[sup][/sup]。抗肿瘤药物之间的相互作用尚未充分阐明。但是随着抗癌药物应用数量的增多及新的联合用药方式的发展,应重视药物间的相互作用,充分了解药动学及药效学特征。若存在相互作用,就应改变用药方案或调整常用剂量,以求在一定程度上消除可能产生的毒性或亚临床效应。2.2 化疗药剂量的调整恰当的药物剂量应是使药物在最小的毒副反应下发挥最佳的疗效。药物剂量的恰当与否直接关系到用药的安全与疗效。肿瘤患者的药物剂量尤其重要。根据影响代谢的因素来确定剂量,影响药物在人体内的代谢过程是多因素的,抓住其中关键的因素来确定剂量,就可以达到较好的效果。如卡铂,主要根据肾功能来确定剂量[sup][/sup]。根据血药浓度监(TDM),测通过TDM了解患者的 PK 参数,从而实现个体化用药,确保患者在可耐受的情况下达到最优化的疗效。目前只有少数的抗肿瘤药物,其量效关系已经较为明确,TDM已较成熟,如甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、依马替尼及卡铂等而大多数抗肿瘤药物,其PK参数和疗效的关系尚未完全明确,TDM的标准尚未建立,还需进一步研究[sup][/sup]。2.3 用药教育癌症治疗中,应严密观察病情变化,监测生命体征:观察心率、血压的变化,每日测体温4次,如有异常及时报告医生[sup][/sup]。同时,对于出院患者要进行出院带药的服药指导。告诉患者药品正确的储存与保管方法,特别是注射剂和生物制品等。使患者清楚药物的治疗疗程,提醒患者按要求复查血常规及肝肾功能,定期返院化疗。对重点病人应加强随访,跟踪用药教育的效果。[b]3 克服耐药性[/b]在恶性肿瘤的治疗中,药物治疗具有不可替代的作用。但在化疗过程中肿瘤细胞产生的耐药,以及多药耐药(MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因和临床上亟待解决的难题[sup][/sup]。耐药性产生的机制很多,目前研究较多的是P-糖蛋白参与的耐药。肿瘤细胞的MDR是肿瘤化疗的一大障碍。因此,研制能逆转MDR的化疗增效剂是肿瘤研究的一大热点。但至今无一种有效的逆转MDR药物广泛应用于临床。以药物的特性及细胞增殖动力学为依据[sup][/sup]设计合理的联合化疗方案以及从中药中开发高效、低毒的逆转剂,具有重要的临床意义。中国医科院天津血液病研究所杨纯正教授等发现治疗慢性粒细胞性白血病的当归芦荟丸有效成分---靛玉红在临床试验中显示出逆转耐药和抗肿瘤的双重效应,此类药物值得期待,是寻找具有克服耐药的新抗癌药的重要方向。肿瘤多药耐药产生的机制极其复杂,迄今未有MDR 逆转剂成功地应用于临床,但近几十年来对 MDR 的研究和认识取得了许多重大进展。随着对MDR研究的不断深入,相信将有希望为克服肿瘤多药耐药提供更多的思路和途径。[align=center]4 其他方面[/align]4.1 有效防止静脉用药外渗在多种给药方法中,现在抗癌治疗的主要手段之一还是依靠静脉输液。静脉注射给药能快速地将药物送入体内,提高血清中药物的浓度,达到化疗效果。患者在接受化学药物治疗的过程中,因长期输液反复静脉穿刺及化学治疗药物对血管、黏膜、皮下组织、皮肤的刺激,药物从针眼外渗或从血管口外漏,均可致静脉无菌性炎症,局部组织疼痛灼热感,严重者可使组织坏死溃烂,长期不愈,成为临床护理工作中待解决的问题[sup][/sup]。因而为了达到减少静脉输注药物外渗以提高药效的目的,根据常见静脉抗癌药物损伤组织的机制,提出积极的预防、诊断、治疗和护理措施。护理工作者要对抗癌药物的毒性反应进行详细了解,并且要尽量保证静脉穿刺一次成功,加强静脉防治知识的宣教。为了防止抗癌药物外渗对患者所造成的痛苦,就要完善好预防工作,真正做到防患未然。在临床治疗当中,要避免抗癌药物外渗的发生,使患者的治疗能够得到正常进行[sup][/sup]。[align=left]4.2 加强护理[/align] 患者诊断为癌症后十分焦虑和恐惧,对各种治疗有疑虑,情绪紧张。应根据患者的不同年龄、知识层次、病情轻重及性格特点做好心理护理[sup][/sup],为让患者配合治疗,应采用多种沟通方式使其打消顾虑,消除紧张害怕心理,治疗前向患者讲解治疗法的安全性、可靠性、必要性[sup][/sup],主动关心病人,同时不隐瞒用药的不良反应,使患者在思想上有充分的准备,使其以良好的状态接受治疗。由于各种不良反应会给患者带来心理负担,首先应建立起和谐融洽的护患关系,工作中与病人多交流,用诚恳热情,乐观自信的情绪,严肃认真的工作态度去感染病人,使其在心理上获得安全和信任。协调好病友间的关系,相互理解关心鼓励,提高病人家庭和社会支持水平,从而树立病人战胜疾病的信心。[align=center]5 结语[/align][align=left]新抗癌药不断涌现,基础研究不断深入,合理用药和联合用药提高了化疗效果。多种途径、多种方法的研究和应用,连续静脉滴注、动脉给药、介入治疗、抗癌药与增效药合用、抗癌药与解毒药合用、大剂量化疗加造血干细胞移植等,使化疗疗效均有不同程度的提高。减轻抗癌药的不良反应,以增加病人对抗癌药的耐受性,提高药物的使用剂量,也可使化疗疗效提高。近年来在减少胃肠道反应和减轻骨髓抑制方面,取得了突破性进展,明显减轻病人用药期间的痛苦,提高用药剂量,减少并发症等方面均起到很大作用。减少多药耐药性的发生,也是当前的重要研究课题,以提高对难治性肿瘤的治疗效果。提高病人的免疫功能,改善病人的营养状况和一般状况,给予支持治疗、扶正培本的中医中药治疗和免疫治疗,这将有利于增强病人对治疗的耐受性,并提高病人的生活质量,增加治疗作用。[/align]个人认为结合免疫治疗的多种肿瘤治疗方案是一个重要发展方向。传统认为化疗主要通过细胞毒作用直接杀伤肿瘤细胞,而免疫治疗主要通过调动机体免疫系统达到抑制肿瘤生长和长期控制肿瘤的目的。由于化疗存在免疫抑制作用,因此化疗联合免疫治疗的模式曾经受到质疑。但是,随着研究的深入,越来越多的数据显示化疗和免疫治疗存在协同作用。[align=left] [/align][b]参考文献[/b] 卜风英.化疗患者预防感染的重要性.包头医学,2009,33(11):58~59 梁岩,何珩,孙翠萍.抗肿瘤用药的应用及进展.中国医疗前沿,2009,4(21):17~18 陈晓媛,张虹,高晨燕.小分子靶向抗肿瘤药物临床研究策略探讨及案例分析.新药申报与审评技术,2013,22(3):269~273 孙西洋,任常山,曹心珂.抗肿瘤药物的靶向给药系统研究进展.中国医药生物技术,2008,3(6):461~464 王爱军,金永新,要林青等.抗肿瘤药物治疗中临床药师的干预技巧.中国药事,2013,27(1):97~99 Paz-AresLG, Smith MR.Genitourinary malignancies .Cancer Chemoter Biol ResponseModi,2001,19(21):573~595 van Meerten E [i]et al[/i].Interaction with the clinical significance of antitumor drugs.Foreign Medical Scienceson Pharmacy,2006,23(1):31~35 王祎,刘燕,丁秀云.抗肿瘤药物的研究进展.包头医学,2012,36(3):129~132 李嘉,包春波.抗肿瘤化学药物研究进展.华西药学杂志,2009,4(21):1~5 徐贞,史美祺.抗肿瘤药物的剂量选择.读者园地,2012,28(5):379~380 张岩.肝癌介入治疗术前术后护理.中国社区医师医学专业半月刊,2009,11(21):127~128 卿晨.恶性肿瘤化疗耐药及克服耐药的研究.昆明医科大学学报,2013,34(1):1~3 梁岩,何珩,孙翠萍.抗肿瘤用药的应用及进展.中国医疗前沿,2009,4(21):17~18 侯清平,李青枝.肿瘤患者化学药物治疗过程中的静脉管理.实用医技杂志,2013,20(4):406~407 王秋平.抗癌药物外渗的预防和处理.大家健康,2013,7(3):121~127 张岩.肝癌介入治疗术前术后护理.中国社区医师医学专业半月刊,2009,21(11):168~169 孙燕.50年来我国抗肿瘤药物临床研究的进展.新药研发论坛,2009,18(18):1695~1700[align=left] [/align]
[center]2008年上半年美国FDA批准的新药[/center]2008年上半年,美国FDA共批准了7个新分子实体和2个新生物制剂。本文按获批时间,就这些新药情况作一简要介绍。=============================1 新分子实体 1.1 依曲韦林(etravirine/Intelence) Tibotec制药公司开发,2008年1月18日经优先审批程序获得批准,用于联用其它抗逆转录病毒药物治疗已经在先抗逆转录病毒疗法治疗,且具病毒复制和病毒株已对一种非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)和其它抗逆病毒药物耐药证据的成人艾滋病毒感染患者。1.2 琥珀酸地拉法辛(desvenlafaxine succinate/Pristiq,简称为地拉法辛) Wyeth制药公司开发,2008年2月29日获得批准,用于治疗成人严重抑郁症。地拉法辛为缓释片剂,其推荐剂量是一日1次口服50 mg。1.3 盐酸苯莫司汀(bendamustine hydrochloride/Treanda,简称为苯莫司汀) Celphalon有限公司产品,2008年3月20日经优先审批程序获得批准,用于经静脉内给药治疗慢性淋巴细胞性白血病,后者是一种进展缓慢的血液学和骨髓性恶性肿瘤疾病。1.4 热加腺苷(regadenoson/Lexiscan) CV治疗学和Astellas制药两公司共同开发,2008年4月10日获得批准,用作不能耐受适当运动应激患者在放射性核素心肌灌注成像试验中的药物应激剂。放射性核素心肌灌注成像是一种用来发现和描绘冠状动脉疾病的试验,而注射用热加腺苷则为迄今全球范围内获准用作心肌灌注成像用药物应激剂的第一个腺苷A2A受体激动剂。1.5 溴甲纳酮(methylnaltrexone bromide/Relistor) Wyeth和Progenics两制药公司共同开发,2008年4月24日获得批准,用于皮下注射给药,以帮助正接受连续阿片类药物止痛治疗的进行性晚期疾病阶段如已不能治愈肿瘤及晚期肺气肿、心力衰竭、阿尔茨海默氏病和艾滋病等患者的肠功能恢复。溴甲纳酮是一类新型药效类别中的第一个获批药物,其治疗不会削弱阿片类药物的止痛效力。1.6 阿维莫泮(alvimopan/Entereg) Adolor和GlaxoSmithKline两公司共同开发,2008年5月20日获得批准,用于治疗成人术后肠梗阻,即帮助施行部分大、小肠切除术后患者上、下胃肠道功能的尽快恢复。阿维莫泮为口服胶囊制剂。1.7 二氟泼酯(difluprednate/Durezol) Sirion治疗学公司产品,2008年6月23日经优先审批程序获得批准,用于治疗眼科术后炎症和疼痛。二氟泼酯属强效局部皮质激素类药物,为泼尼松龙(prednisolone)的二氟化物。二氟泼酯为0.05%眼用乳剂。2 新生物制剂 2.1 列洛西普(rilonacept/Arcalyst) Regeneron公司开发,2008年2月27日经优先审批程序获得批准,用于长期治疗≥12岁患者的两种cryopyrin相关周期性综合征,即家族性寒冷型自身炎症综合征和穆-韦(Muckle-Wells)两氏综合征。cryopyrin相关周期性综合征属极罕见自身炎症疾病,而列洛西普则是迄今FDA批准的唯一一个治疗药物。列洛西普为皮下注射剂,属白介素-1阻滞剂。2.2 培塞株单抗(certolizumab pegol/Cimzia) UCB公司开发,2008年4月22日获得批准,用于虽经传统疗法治疗,但未获适当疗效的成人中至重度活动性克罗恩氏病(即节段性回肠炎)患者以达到临床症状和体征缓解及维持治疗目的。培塞株单抗为皮下注射剂,是迄今获准上市的唯一一个聚乙二醇化的抗α-肿瘤坏死因子抗体类药物。
多肽合成方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时,由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。【合肥国肽生物】多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速,可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年,多肽液相片段合成法发展迅速,在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中,根据多肽片段的化学特定性或化学选择性,多肽片段能够自发进行连接,得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少,所以纯度较高,且易于纯化。多肽的生物合成方法主要包括发酵法、酶解法,随着生物工程技术的发展,以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。多肽的固相合成多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,分离纯化,获得目标多肽。1、Boc多肽合成法Boc方法是经典的多肽固相合成法,以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基,苄醇类作为侧链保护基,Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上,TFA切除Boc保护基,N端用弱碱中和。肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行,最终采用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中,为了便于下一步的多肽合成,反复用酸进行脱保护,一些副反应被带入实验中,例如多肽容易从树脂上切除下来,氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。2、Fmoc多肽合成法Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的,不受TFA等试剂的影响,应用温和的碱处理可脱保护,所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成,避免了采用强酸。同时,与Boc法相比,Fmoc法反应条件温和,副反应少,产率高,并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收,易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。多肽液相分段合成随着多肽合成的发展,多肽液相分段合成(即多肽片段在溶液中依据其化学专一性或化学选择性,自发连接成长肽的合成方法)在多肽合成领域中的作用越来越突出。其特点在于可以用于长肽的合成,并且纯度高,易于纯化。多肽液相分段合成主要分为天然化学连接和施陶丁格连接。天然化学连接是多肽分段合成的基础方法,局限在于所合成的多肽必须含半光氨酸(Cys)残基,因而限定了天然化学连接方法的应用范围。天然化学连接方法的延伸包括化学区域选择连接、可除去辅助基连接、光敏感辅助基连接。施陶丁格连接方法是另一种基础的片段连接方法,其为多肽片段连接途径开拓了更广阔的思路。正交化学连接方法是施陶丁格连接方法的延伸,通过简化膦硫酯辅助基来提高片段间的缩合率。其他多肽合成方法1、氨基酸的羧内酸酐法(NCA)氨基酸的羧内酸酐的氨基保护基也可活化羧基。NCA的原理:在碱性条件下,氨基酸阴离子与NCA形成一个更稳定的氨基甲酸酯类离子,在酸化时该离子失去二氧化碳,生成二肽。生成的二肽又与其他的NCA结合,反复进行。NCA适用于短链肽片段的多肽合成,其周期短、操作简单、成本低、得到产物分子量高,在目前多肽合成中所占比例较大,技术也较为通用。2、组合化学法20世纪80年代,以固相多肽合成为基础提出了组合化学法,即氨基酸的构建单元通过组合的方式进行连接,合成出含有大量化合物的化学库,并从中筛选出具有某种理化性质或药理活性化合物的一套多肽合成策略和筛选方案。组合化学法的多肽合成策略主要包括:混合-均分法、迭代法、光控定位组合库法、茶叶袋法等。组合化学法的最大优点在于可同时合成多种化合物,并且能最大限度地筛选各种新化合物及其异构体。3、酶解法酶解法是用生物酶降解植物蛋白质和动物蛋白质,获得小分子多肽。酶解法因其多肽产量低、投资大、周期长、污染严重,未能实现工业化生产。酶解法获得的多肽能够保留蛋白质原有的营养价值,并且可以获得比原蛋白质更多的功能,更加绿色,更加健康。4、基因工程法基因工程法主要以DNA重组技术为基础,通过合适的DNA模板来控制多肽的序列合成。有研究者通过基因工程法获得了准弹性蛋白-聚缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-缬氨酸-甘氨酸肽(VPGVG)。利用基因工程技术生产的活性多肽还有肽类抗生素、干扰素类、白介素类、生长因子类、肿瘤坏死因子、人生长激素,血液中凝血因子、促红细胞生成素,组织非蛋白纤溶酶原等。基因工程法合成多肽具有表达定向性强,安全卫生,原料来源广泛和成本低等优点,但因存在高效表达,不易分离,产率低的问题,难以实现规模化生产。5、发酵法发酵法是从微生物代谢产物中获得多肽的方法。虽然发酵法的成本低,但其应用范围较窄,因为现在微生物能够独立合成的聚氨基酸只有ε-聚赖氨酸(ε-PL)、γ-聚谷氨酸(γ-PGA)和蓝细菌肽。[img=,457,333]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221507346400_2482_3531468_3.jpg!w457x333.jpg[/img]我们主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线:17718122172;17718122684;17730030476;17718122397
1.鸡蛋中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素的测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101171106_274538_1987954_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101171106_274539_1987954_3.jpg
类胡萝卜素是一类广泛存在于自然界中的脂溶性色素,它为许多食品提供红色或黄色色泽。存在于植物的叶、茎、花、根或果实中,自然界中的类胡萝卜素以岩藻黄素(存在于藻类)最多,其次是存在于绿叶中的叶黄素、紫黄素和新黄素,其他的类胡萝卜素如β一胡萝卜素广泛存在于胡萝卜、南瓜、辣椒等蔬菜中:水果、蛋黄、奶油中的含量也较丰富。类胡萝卜素按其组成可以分为两大类,即胡萝卜素类和叶黄素类。1.番茄红素从结构上来看番茄红素是直链开环结构,无维生素A的功能,具有防癌抗癌作用,主要存在于番茄中。(1)“α-胡萝卜素“α-胡萝卜素分子断裂后可形成一分子维生素A,主要存在于胡萝卜中,其次是番茄。(2)β-胡萝卜素β-胡萝卜素则形成2分子维生素A,并且自然界中三种胡萝卜素以它占多,分布最广。1μg的β-胡萝卜素相当于1.6IU的维生素A。主要存在于胡萝卜中,其次是番茄中。(3)r-胡萝卜素 r-胡萝卜素分子断裂后可形成一分子维生素。2.叶黄素类(Xanthophylls)叶黄素类是共轭多烯烃的加氧衍生物,即在分子中含有羟基、甲氧基、羧基、酮基或环氧基,多呈浅黄、橙、黄等色泽;在绿叶中它们的含量一般比叶绿素多一倍,常见的叶黄素类色素有以下的十几种,它们可以简单地被认为是胡萝卜素类的衍生物。性质:①低浓度呈橙黄色至黄色,高浓度为橙红色;②不溶于水、甘油、丙酮、酸、碱,微溶乙醇和食用油,易溶苯、石油醚;③酸性不稳定,弱碱较稳定,不受还原物影响;④光、热、空气使其色泽变淡;⑤重金属(铁)使其褪色。
胰岛素是由胰脏内的胰岛β-细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等物质刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素,同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成,因此,胰岛素在人体新陈代谢中起着重要作用。如果机体内胰岛素的量不足就会引发糖尿病,目前胰岛素依然是治疗糖尿病的特效药,因此胰岛素的人工合成技术一直是生物医药领域研究的热点。(请移步百度搜“合肥国肽生物”即可)现在采用的基因工程技术有两种方法可以让微生物发酵产生胰岛素。一种就是先在大肠杆菌中分别合成胰岛素A链和B链,然后在体外用化学方法将两条链连接成胰岛素。而另一种是采用分泌型载体表达胰岛素原,然后将其转化为胰岛素。[align=center][img=,696,264]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903191636238364_2915_3531468_3.jpg!w696x264.jpg[/img][/align]近年来,重组人胰岛素已在临床上广泛应用,但是由于胰岛素分子非常容易聚合,在浓度较高的胰岛素注射液中主要以二体和六体的形式存在。为解决这个难题,通过蛋白质工程开发出的单体速效胰岛素也应运而生。胰岛素的合成相较于普通含有多对二硫键的多肽,难点在于其结构中包含了分子间与分子内的两种二硫键,使得几对二硫键的特异性定点形成更加困难,产率低,纯度低等结果不可避免地出现了。[align=center][img=,694,773]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903191636420965_8665_3531468_3.jpg!w694x773.jpg[/img][/align]固相合成法合成胰岛素是我们国肽生物的代表性技术,我们所具有的成熟的胰岛素合成工艺已经得到了国内外客户的广泛认可和肯定。我们的胰岛素产品突破了以往的收率低,纯度不高等缺陷,能够进行大批量生产,并且产品纯度能够高达99%,国肽生物是值得客户信任的胰岛素供应品牌。[img=,220,52]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903191637138335_1412_3531468_3.jpg!w220x52.jpg[/img]
超轻元素、轻元素、重元素区别???
亲们,求助一下,用GB/T 20764-2006 《可食动物肌肉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定 液相色谱-紫外检测法》做抗生素,仪器:WATERS e2695,检测器:2698 DAD,柱子:Sunfire C18 250*4.6,5,流动相:乙腈+甲醇+0.01mol/L草酸溶液(2:1:7),流速:1.0mL/min,柱温:30度,检测波长:350nm,进样量:20微升,用标曲最大点进样(200ng/mL),四种都不出峰,我们试了更大浓度的也一样。请问问题出在那里呢?有推荐的方法和柱子吗?
[color=#444444]最近 我在做猪肉中红霉素、林可霉素、替米考星遇到点问题,想请教同仁一些关键控制点,首先我用的标准是GB 20762 内标用的罗红霉素,发现不过柱内标跑步出来,林可霉素外标法回收率能做到60%多,请教同仁谢谢![/color]
林可霉素,盐酸克林霉素,大观霉素,3种药物的ASE和手动2种方式提取大观霉素回收率低,药物极性强,易溶于水,溶于甲醇。乙腈,甲醇,水,甲酸水都已试过,求各位大神指教。
目前我们国肽生物合成的同位素标记多肽主要为C13,N15两种同位素标记的多肽,通过直接在肽链中引入同位素标记的氨基酸达到有效标记整条肽链的目的,常用的同位素标记的氨基酸有Tyr,Thr,Lys,Arg,Glu等。同位素标记的多肽与普通肽的区别在于其结构中某一个或几个氨基酸中的C被C13取代或者N被N15取代。[img=,422,228]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905091355121241_560_3531468_3.jpg!w422x228.jpg[/img]专业的团队,一流的合成纯化技术,严谨的工作态度,严格的质量要求,是我们能够满足客户对同位素标记多肽的不同纯度要求的重要保障。与此同时,同位素标记多肽的原料(同位素标记的氨基酸)价格昂贵,使得我们合成成本高,这就直接导致了这种多肽价格的高昂,秉着客户至上,竭力满足客户需求的经营理念,我们国肽生物提供微克,毫克到千克级别的质量服务。我们主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线:17718122172;17718122684;17730030476;17718122397