应用分享 | CytScop®Mini 智能细胞计数仪的性能评价

浚真生命科学

2024/09/06 18:34

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CytScop®Mini 智能细胞计数仪采用AOPI双荧光和台盼蓝染色法原理，采用独特的明场和荧光宽场大视野显微光学系统，结合专利的微流控芯片技术，搭载高精准细胞识别算法，实现有效稳定的细胞计数、细胞活率、细胞浓度和生长曲线的测定。小型化机身助力随时随地进行智能细胞计数，软件系统可升级，实现实验数据通过蓝牙或直传云服务器，更具时间、空间灵活性。

在实际应用中，细胞计数结果的准确性和精确性对于开展后续工作具有非常重要的作用。所以对于细胞计数仪器，除去人为操作误差和样本误差外，如何保证仪器的系统误差符合标准规定的要求将非常重要。

为了检测CytScop®Mini的细胞计数性能，采用了ISO描述的实验操作方法（ISO 6887-1:2017）：通过一系列倍比稀释来评估CytScop®Mini的细胞计数性能。

一、测试样本及仪器设置参数

细胞样本

CHO细胞，母液浓度10.5×10⁶ cells /mL，活率98%；

仪器测试参数

TB模式参数

AOPI模式参数

二、稀释及取样

按照ISO6887-1:2017提供的倍比稀释指南，对样本母液进行连续稀释，得到6个稀释梯度：1，0.5，0.25，0.125，0.0625，0.03125，每个浓度梯度取3个平行，上机测试。

三、计数结果分析

变异系数（C.V）是衡量各观测值变异程度的一个统计量，常常用来反映一组数据的离散程度，在仪器的测量中可以用来反映仪器测量的精确性。C.V值越小，说明仪器测试数据离散程度越小，仪器的重复性越好，精确度越高。如图1所示，CytScop®Mini分别使用TB模式和AOPI模式测量总细胞浓度（TCD）的C.V变化。

图1 CytScop®Mini测量TCD的C.V变化图

对CytScop®Mini测试结果进行线性拟合分析，结果如图2所示：

图2 CytScop^®Mini测量总细胞浓度的线性相关关系及回归分析图

通过对各稀释浓度下活率进行统计分析，可以评估仪器在细胞计数过程中对样本活率的影响。统计各稀释浓度下样本的活率，结果如图3所示：

图3 CytScop®Mini测量各稀释浓度下活率变化图

四、结论

使用CytScop®Mini分别在明场和荧光场下进行细胞计数， CytScop®Mini进行细胞计数性能分析。通过设计倍比稀释实验可以看到，在0.2M-10M的浓度范围内，CytScop®Mini对平行样本的检测具有很好的重复性和稳定性，且TB染色和AOPI染色具有高度统一性。在各稀释浓度中，各稀释浓度的C.V均值小于3%。另外，通过线性实验的PI计算，在TB染色和AOPI染色中，其PI分别为0.345和0.361，说明CytScop®Mini进行细胞计数具有很好的精确性。

通过线性回归分析，可以看到，不论是TB染色还是AOPI染色，在倍比稀释实验中均具有很好的线性相关关系（R²＞0.999），更说明在所稀释范围内计数结果的一致性；同时细胞样品具有更小的PI，说明CytScop®Mini对细胞样品的计数更符合比例原则，对细胞样品的测试具有很好的适应性。

对细胞样品各稀释浓度的活率进行分析，发现在0.2M-10M的浓度范围内，在不同的稀释浓度下，活率变化不超过3%，单因素方差分析P＜0.05，活率无显著性差异。

综上，CytScop®Mini智能细胞分析仪在0.2M-10M的范围内，仪器对细胞计数具有很高的准确性和精确性，体现了CytScop®Mini精准的细胞计数性能。

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