大鼠脐带间充质干细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

大鼠脐带间充质干细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠脐带间充质干细胞采用组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠脐带间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠脐带间充质干细胞分离自脐带；脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构。原来是由羊膜包卷着卵黄囊和尿膜的柄状伸长部而形成的。脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。当卵黄囊及其血管退化，脐动脉和脐静脉就发达起来，在这些间隙中可以看到疏松的胶状的间充质。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿来的废物运送至胎盘，脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。最后由子宫静脉将来自胎儿的代谢废物运走，某种激素和抗体等也通过脐带从母体移交给胎儿。脐带中含有大量的干细胞，干细胞是生命的种子，它会分化成机体的各种细胞，结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体；这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。间充质干细胞（MSC）是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下，可分化为多种造血细胞以外的组织细胞，并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用；目前，多用于风湿免疫疾病的治疗。间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子，促进造血干细胞（HSC）的增殖与分化。MSCs还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用，可减轻移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相关并发症。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

H-Sar-NH2.HCl  5325-64-4  C3H8N2O.HCl

Formyl-DL-Trp-OH  16108-03-5  C12H12N2O3

H-Ser-OBzl.HCl  1738-72-3  C10H13O3N.HCl

Boc-D-Lys(Z)-OH  55878-47-2  C19H28N2O6

Fmoc-D-Cha-OH  144701-25-7  C24H27NO4

AMC(7-Amino-4-methylcoumarin)  26093-31-2  C10H9NO2

Z-Glu-OBzl  3705-42-8  C20H21NO6

Boc-GABA-OH  57294-38-9  C9H17NO4

Boc-Phe(3-Cl)-OH  114873-03-9  C14H18ClNO4

H-Lys(Boc)-OH  2418-95-3  C11H22N2O4

Boc-β-Ala-OH  3303-84-2  C8H15NO4

H-HoTyr-OH.HBr  141899-12-9  C10H13NO3.HBr

H-D-Ala-OBzl.TosOH  41036-32-2  C10H13NO2.C7H8SO

Z-Phe(4-F)-OH  17543-58-7  C17H16NO4F

Z-D-Glu(OtBu)-OH  51644-83-8  C17H23NO6

小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(PM4)ELISA试剂盒 ，英文名： PM4 ELISA Kit

犬血栓前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T

犬纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)免疫试剂盒 Dog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1 ELISA kit

英文名称humanHistamineELISAKIT人组胺(Histamine)规格：96T/48T

超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒5次

RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA试剂盒大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠脐带间充质干细胞小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat somatostatin (SS) ELISA Kit 大鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒

HumanCollagenaseIELISAKit 人胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCeruloplasmin,CP/CERELISA试剂盒人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒规格：96T/48T

转基因玉米MON810品系试剂盒20次

HumanSerotonin,STELISAKit人血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猪α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human ai murine typhus aibody (ai-typhus-Ab) ELISA Kit 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)ELISA试剂盒

Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit 猪白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAgIa(HumanangiotensinIIreceptoypeIa)ELISAKit人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型规格：48T/96T

血液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性试剂盒20次

MouseypsinELISAKit小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA试剂盒规格：96T/48T