细胞系:细胞系与细胞株特性与应用:
细胞系可以连续传代培养,通常可以无限期地保持下去,具有无限繁殖能力。
细胞系在基础生物学研究、药物筛选、毒性测试等领域广泛应用,常用于探究细胞的生物学特性、疾病机制以及药物开发等方面。
著名的例子包括HeLa细胞系,它来自于1951年Henrietta Lacks的宫颈癌组织,被广泛用于医学研究,但也引发了一系列伦理和法律问题。
细胞株:
细胞株具有较高的同质性,细胞在传代培养的过程中能够保持较稳定的性状和功能。
细胞株常用于特定的实验或应用中,因为它们具有一些特定的生物学特性或标志,这些特性或标志在培养期间必须始终存在。
人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO
英文名称 | NCI-N87-EGFP-LUC | 生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11312 | 种属 | 人 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 温度 | 液氮 |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | 培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
商品介绍:
细胞名称:人胃癌细胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO
细胞别称;NCI-N87-EGFP-LUC;人胃癌细胞-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记;NCI-N87-绿色荧光蛋白-荧光素酶标记
种属来源;人
组织来源;胃
生长特性;贴壁生长
形态特征;上皮细胞样
特别注意;NCI-N87-LUC-EGFP细胞培养过程中会长空泡,属于正常现象
puro药筛浓度;NCI-N87细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中建议使用0.2ug/ml浓度puro维持
背景简介;NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。 它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc, L-myc, myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B 2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达: N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 或胃泌激素释放肽。据报道NCI-N87 细胞的植板率为4.3%。Luciferase NCI-N87细胞稳定表达萤火虫荧光素酶和绿色荧光蛋白。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。NCI-N87细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
STR位点;Amelogenin:X,Y;CSF1PO:8,12;D13S317:8,11;D16S539:9,13;D18S51:17;D19S433:14,14.2;D21S11:30;D2S1338:23,24;D3S1358:14;D5S818:12,13;D7S820:10,11;D8S1179:14;FGA:20,21;TH01:9;TPOX:9,11;vWA:15,16;
保藏机构;ATCC; CRL-5822;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
产品规格;1x106cells/T25细胞培养瓶
培养基;90%RPMI-1640+10%FBS
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
细胞系培养步骤:
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏:
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展,为科学研究提供了大量的细胞样本。
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏:
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展,为科学研究提供了大量的细胞样本
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