细胞增殖之单一细胞增殖精准追踪者-EDU试剂盒

菲恩生物

2024/08/01 15:40

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细胞增殖是生命重要的活动。细胞增殖的过程中，DNA会进行复制，因此可以通过检测DNA复制来检测细胞增殖的情况。通过检测DNA复制来判断细胞增殖的方法主要有2种，分别是Brdu法和EDU法。

菲恩生物FN-Click EdU细胞增殖检测试剂盒在Brdu法基础上进行换代升级，帮助您更快，更好，更准确检测到单一细胞的增殖。

Brdu法和EDU法比较
	BrdU	EDU
检测分子	大	很小
检测方式	免疫反应	化学反应
是否影响其他标记	是	否
DNA变性	变性	不变性
实验时间	长	短
灵敏度	一般	灵敏
是否高通量	否	是

一、原理简介

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名5-乙炔基-2-脱氧尿苷，是胸腺嘧啶脱氧核苷类似物，EdU可以在DNA合成过程中替代胸腺嘧啶脱氧核苷掺入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针，通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应（Click reaction）。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记，从而可以使用适当的荧光检测设备检测到增殖的细胞。

二、产品优势

BrdU和EDU试剂盒都可以精准的检测到单一细胞的增殖。与BrdU检测方法相比， EdU试剂盒优势如下：

1.反应迅速：无需复杂抗体反应，2.5小时内完成检测。

2.检测灵敏：能精准捕捉单个增殖细胞。

3.操作简便：试剂盒配套完善，使用便捷。

4.结果精准：小分子易扩散，无需DNA变性，保持细胞核清晰完整。

5.兼容性强：可与其他抗体或荧光蛋白共染，实现多参数检测。

三、实验过程

EDU实验可以分为做荧光成像实验和流式实验，依据具体的实验情况选择实验方法。

EDU荧光成像流程如下：

EDU荧光成像流程

EDU流式实验流程如下：

EDU流式实验流程

四、菲恩生物 FN-Click EdU试剂盒结果展示

1.用于流式检测的试剂盒

Test：HL-60 cells were treated with 10 μM EDU for 4 hours.
Negative：HL-60 cells without EDU.

用于流式检测的试剂盒检测结果

2.用于荧光成像的试剂盒

Test：Hela cells were treated with 10 μM EDU for 3 hours.
Negative：Hela cells without EDU.

用于荧光成像的试剂盒检测结果

五、常见问题与建议

1.整个细胞都有EdU信号或背景信号很强：

可能原因：染色后洗涤不充分，导致非特异性染色。
建议：在染色后，务必充分洗涤细胞，以去除未结合的EdU和荧光染料，减少背景信号。

2.无阳性信号：

可能原因：EdU浓度过低或孵育时间不足，导致细胞摄取的EdU量不足以形成可检测的荧光信号。
建议：增加EdU浓度或延长孵育时间，确保细胞摄取足够的EdU。此外，不同的细胞类型可能需要不同的孵育时间，应根据细胞类型进行调整。

3.信号不均匀或局部过强：

可能原因：细胞分布不均匀或染色过程中存在局部浓度差异。
建议：在铺板时确保细胞分布均匀，避免细胞过密或过疏。同时，在染色过程中注意操作的一致性，避免局部浓度过高或过低。

菲恩生物EDU细胞增殖相关ELISA试剂盒检测工具

货号	产品名称	规格	应用
FNCK112	FN-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(红色，FineTest®647)	50T/200T	细胞增殖
FNCK111	FN-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(红色，FineTest®594)	50T/200T	细胞增殖
FNCK110	FN-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(绿色，FineTest®488)	50T/200T	细胞增殖
FNCK108	FN-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒(红色，FineTest®647)	50T/200T	细胞增殖
FNCK107	FN-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒(绿色，FineTest®488)	50T/200T	细胞增殖