生物素抗体标记试剂盒

生物素抗体标记试剂盒

Biotin Conjugation Kit

产品规格: 标记 100ug-1mg 抗体

CAS: 9026-00-0

保存条件: 2-8℃保存，一年有效。勿冻存。

产品介绍:

  生物素－亲和素系统（Biotin-Avidin—System，BAS）是一种应用非常广泛的生物反应放大系统。生物 素与亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用，，生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及 多级放大效应，使 BAS 免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。生物素标记抗体是目前广泛用于免疫病理、细 胞化学、病理学及临床免疫中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。在碱性条件下，活化的 生物素与蛋白质的自由氨基结合，生成标记的生物素化蛋白。 本试剂盒中的荧光素采用高质量进口的生物素（Biotin），生物素标记抗体的原理是利用生物素上的 -NHS 基团和抗体上游离的-NH2 发生化学形成 Biotin-抗体结合物。一般一个 IgG 分子可结合 2-8 个分子 的 Biotin。 

产品组份：

注意事项：

1. 试剂盒保存在 2-8℃, 勿冻存。

2. 试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒，会使液体或干粉试剂沾到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理，

以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。

3. Biotin 需现用现配，溶解后的 Biotin 不能长期保存。

4. 纯化柱中的缓冲液含有毒性成分叠氮化钠（NaN3）,使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触。

5. DMSO 属微毒类，对人体皮肤有渗透性，对眼又刺激作用，使用时避免与皮肤，眼睛和黏膜接触。

6. 标记前抗体的透析，浓缩和浓度测定等操作都会造成抗体量的损失，因此标记前准备抗体时需根据具

体情况考虑最适宜的抗体量。

标记操作步骤：

1． 抗体准备

1.1． 建议抗体浓度在 1-2mg/ml 之间。

1.2． 抗体中不要含有 BSA 或其它蛋白质成分。

1.3． 抗体缓冲液中不要含有氨基的盐（如：Tris，NaN3等），pH 在 6.5-8.5 为宜。

2. 抗体标记

2.1． 取出 Biotin 离心数秒，将管中 Biotin 干粉甩至管底；

2.2． 管中加入 50ul DMSO 用移液枪反复吹打或 vortex 混匀至 Biotin 完全溶解；

2.3． 抗体中加入适量调整缓冲液（每 100ul 抗体中加入 10ul 调整缓冲液）；

2.4． 将溶解后的 Biotin 加入抗体中（每 100ug 抗体中加入 4.0ul Biotin）, 用移液枪反复吹打或 vortex混匀。

2.5． 将抗体-Biotin 混合物置水平摇床或旋转混匀仪，在摇动状态下室温避光（反应管可包裹锡箔纸）反应 1h。

注： 如果需要较高 Biotin 偶联比，可适当延长抗体和 Biotin 偶联时间。

3. 游离 Biotin 去除

3.1． 取出纯化柱，将纯化柱 3000rpm 离心 2min。

3.2． 暂时保留收集管中的缓冲液。

3.3． 将纯化柱移至新的收集管上，吸取抗体-Biotin 偶联物置纯化柱中填料的表面。如果样品体积小于50ul，应先用 3.2 保留的缓冲液将液体量补足 50ul。上样体积最大不要超过 100ul。

3.4． 待样品渗入填料后，3000rpm 离心 2min。

3.5． 将抗体-Biotin 标记物 4℃保存待用，终产品可 4℃可保存 1 年。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！