PEG6000-NaCl溶液(20%,无菌)

PEG6000-NaCl 溶液(20%,无菌)

PEG6000-NaCl solution (20% sterile-filtered)

产品规格：10ml‍

保存条件: 2-8℃保存，有效期 6 个月。

产品简介：

   聚乙二醇(Polyethylene glycol ,PEG)有众多品种，常见的有 PEG400、PEG1500、PEG4000、PEG6000、 PEG8000 等，聚乙二醇系列产品无毒、无刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份有良 好的相溶性，具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等，在化妆品、制药、化 纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着极为广泛的应用。依相 对分子质量不同而性质不同，从无色无臭黏稠液体至蜡状固体。分子量 200～600 者常温下是液体，分子 量在 600 以上者就逐渐变为半固体状，随着平均分子量的不同，性质也有差异。从无色无臭粘稠液体至蜡 状固体。随着分子量的增大，其吸湿能力相应降低。其中 PEG4000 和 PEG6000 常用于促进细胞融合或原 生质体融合并有助于生物体(如酵母菌)在转化中摄入 DNA。 

  PEG6000-NaCl 溶液(20%,无菌)主要由 PEG6000（CAS 号 25322-68-3）、氯化钠等组成，其作用原理 是能够改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，两细胞接口处在双分 子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用下，细胞发生融合，该试剂经严格无菌处理。

本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料：

1. MEM 培养基、胎牛血清

2. CO2 培养箱、离心机

3. HAT、HT、A Media Supplement

4. 胰蛋白酶消化液

使用方法：

1. 如果变成胶冻状，可 37~60℃水浴使其变成溶液。

2. 如果用于杂交则按如下步骤：将杂交前体细胞以相同数量（5×10⁴/ml）接种，以适当的培养基培养细胞，待细胞贴壁扩展至汇合成片（80%汇合率）的密度。吸干培养液，加入 2ml PEG6000-NaCl溶液(20%,无菌)，轻轻转动 1min 使 PEG6000 溶液覆盖所有细胞。静置 1min，加入 5ml 完全 MEM培养液以稀释 PEG6000 溶液，吸干净稀释的 PEG6000 溶液，再用 5ml MEM 培养液洗涤被 PEG处理的细胞。吸干净洗液，加入 5ml MEM 培养液，37℃，5%CO2 培养过夜。24~48h 后先吸去培养液，加入胰酶消化液处理细胞，待细胞消化后吸除胰酶消化液，用 HAT 选择培养剔除 HPRT 和TK 缺陷细胞。弃上清液，用补加 1×HT 和 1×A 的完全培养液重新悬浮细胞。融合 12~24h 后进行异核体分析，杂交前体细胞在 4~5 天内发生死亡，对于大多数融合前体细胞而言，10~14 天可见杂交细胞克隆。

注意事项：

1. 应注意无菌操作，避免被微生物污染。

2. PEG6000 溶液(20%,无菌)较为粘稠时，可 37~60℃水浴使其变成溶液。

3. 体外培养的单层贴壁细胞或悬浮细胞均可做融合，但成功概率较大的是单层贴壁细胞。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！