双缩脲法蛋白含量检测试剂盒

双缩脲法蛋白含量检测试剂盒

Biuret method of Protein Assay Kit

产品信息：

本试剂盒有效期一年

产品简介:

蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。在强碱性溶液中，双缩脲与 CuSO₄ 可以形成紫色络合 物，其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来进行蛋白质定量 检测。 该方法适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料；蛋白质浓度测定范围为 1~10mg/ml 。

注意事项：

1. 样品蛋白浓度须在 1~10mg/mL 范围内，低于 1mg/mL 不能用此法，高于 10mg/mL 须做相应稀释。因此测定前用 1~2 个样做预实验，确保蛋白浓度在 1~10mg/mL 范围内。

2. 待测样品蛋白提取可用生理盐水、双蒸水或不含蛋白的 PBS 提取。该法受硫酸铵、Tris 缓冲液干扰，提取液中应不含这些物质；否则改用 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。

3．为得到更为精确的蛋白浓度结果，每个蛋白样品均需做复孔。

4．需自备酶标仪，测定波长为 540 nm；酶标仪需与 96 孔酶标板配套使用。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

一．样品蛋白质提取:

（1）组织样品：按照质量体积比（W/V）1:5-1:10 向组织样品中加入提取液（蒸馏水、PBS 或生理盐水均可，需自备），进行冰浴匀浆，然后 10000rpm，4℃离心 10min，取上清置于冰上待测。

（2）细胞样品：按照 5*106个细胞加入 1ml 提取液，冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3s，间隔 7s，总时间 3min）；然后 10000rpm，4℃离心 10min，取上清置于冰上待测。

（3）液体样品：澄清无色液体样品可以直接进行测定。

二．样品蛋白质浓度测定:

（1）按下表进行试剂配制：

（2）将各试剂分别进行混匀，然后室温静置 15min

（3）分别吸取 200uL 加入 96 孔板中，测定 540nm 处的吸光度

三．样品蛋白质浓度计算：

（1）组织样品：

C 蛋白质（mg/g 鲜重）= C 标准品÷(A 标准品－A 空白对照)×(A 待测样品－A 空白对照) × V 总÷W样品

（2）细胞样品：

C 蛋白质（mg/10⁴cell）= C 标准品÷(A 标准品－A 空白对照)×(A 待测样品－A 空白对照) × V 总÷Q 细胞相对数

（3）液体样品：

C 蛋白质（mg/mL）= C 标准品÷(A 标准品－A 空白对照)×(A 待测样品－A 空白对照)

C 标准品：5mg/mL；

V 总：样本总体积，ml；

W 样品：样品鲜重，g；

Q 细胞相对数：细胞总数 /10⁴

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！