H2S含量检测试剂盒（H2S Assay Kit）

H2S 含量测定试剂盒说明书

H2S Assay Kit

分光光度法 

规格： 50T/48S 

产品组成及保存条件： 

简介： 意义：H2S 是一种新型气态信号分子，存在于脑内的神经递质，生理浓度的 H2S 对神经系统海马的 长时程增强功能具有重要的调节作用，并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要 的病理生理效应。 原理：H2S 与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝，亚甲基蓝在 665nm 处 有最大吸收峰，通过测定其吸光值可计算 H2S 含量。 

需自备的仪器和耗材： 天平、低温离心机、可见分光光度计、比色皿、蒸馏水。 

使用说明：

 一、 样品处理： 

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液 ES01 体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入 1mL 提取液 ES01）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10 4 个）：提取液 ES01 体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建 议 500 万细胞加入 1mL 提取液 ES01），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。 3. 血清（浆）：直接测定。

二、 测定步骤：（取 1.5ml 离心管，按照下表操作）

三、H2S 含量计算公式： 

标准曲线回归方程为：y = 0.0044x，R2 = 0.9988 

1. 组织样品： a. 按照蛋白浓度计算： H2S (μmol/mg prot) = A665 ÷ 0.0044 × V 反总 ÷ (V 样×Cpr) × 10-3 = 0.727 × A665÷Cpr b. 按照样本重量计算： H2S (μmol/g) = A665 ÷ 0.0044 × V 反总 ÷ (V 样 ÷ V 样总 × W) × 10-3 = 0.727 × A665 ÷ W 2. 液体样本： H2S (μmol/L) = A665 ÷ 0.0044 × V 反总÷V 样 = 727 × A665 3. 细胞样本： H2S (μmol/104 cell) = A665 ÷ 0.0044 ×V 反总 ÷(V 样÷V 样总×细胞数量(万个) × 10-3 = 0.727×A665÷细胞数量（万个） 注：V 反总：反应总体积，0.8mL；V 样：反应中样品体积，0.25mL；V 样总：加入提取液体积， 1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL。