柱式冻存血液DNA提取试剂盒（柱式冻存血液DNAout）

柱式冻存血液DNA提取试剂盒（柱式冻存血液DNAout）

产品及特点 血液 DNA 是重要的研究材料，但是血液 DNA 在常温下存放的时间很短，因此很多血液样品都是冻凝存放。由于冻存过程中形成的冰晶会刺破细胞膜，释放出DNA，因此从冻存血液中高效提取 DNA 一直是个棘手的问题。本产品就是开发的专门用于从冻存血液中提取 DNA 的试剂盒，它具有下列特点：
1. 适用于各种动物血液，包括禽类和昆虫。
2. 微量提取，每次可处理 400 μL 血液。
3. DNA 完整性好，纯化后长度在 20-50 Kb 之间。
4. DNA 纯净，OD260/OD280 在 1.8-2.0 之间，可直接用于 PCR、酶切、杂交等实验。DNA 产量一般在 10 μg/mL 血液。

5. 操作简单，整个过程约 20 分钟，室温操作，适合大规模样品处理。

规格及成分

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂 氯仿

使用方法

1. 从-20℃或更低的冰箱中取出血液样品，室温下静置融化。
2. 将 400 μL 解冻的血液转移到一个 1.5 mL 的塑料离心管中，加入 400 μL 溶液 A，充分震荡混匀。如果是禽类血液，则少加 10 倍，只加 40 μL。

3. 在混合液中加入 400 μL 溶液 B 和 200 μL 氯仿（自备），振荡 1 分钟。由于离心管比较满，所以需要确保管底溶液转动起来，否则只是液面振动而已。4. 4℃12000 g 离心 10 分钟，小心将上清转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中。

注意：最好不要室温离心，如果室温离心，则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚，只能得到很少的上清。
5. 将约 0.7-0.8 mL 上清转移到 10-15 mL 塑料离心管中（不要使用玻璃离心管，否则 DNA 会吸附到管壁上。常用的培养提质粒用的细菌的培养管即可）。
6. 加入 2.5 倍上清体积的溶液 C（2 mL），立即摇晃混匀。
7. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次 0.7 mL 左右，转移后静置 2-5 分钟，以使 DNA 与膜充分结合，然后室温 12000 g 离心 30 秒，弃收集管中的废液，然后再加入 0.7 mL，重复上述操作，直到全部混合液挂柱。
8. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 通用洗柱液，室温 12000 g 离心 30 秒，弃收集管中的废液。
9. 在离心吸附柱中再加入 0.3 mL 通用洗柱液，室温 12000 g 离心 30 秒，弃收集管中的废液。
10.室温 12000 g 离心 30 秒，去尽残留液体（此步骤十分重要，不要省略，否则残留的含乙醇的通用洗柱液将抑制后续的酶反应）。
11.将离心吸附柱置于一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 50 μL DNA 洗脱液 2.0，室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液 2.0 在 65℃预热后再使用，洗脱 DNA的效果更佳。
12.室温 12000 g 离心 30 秒，离心管底部溶液即 DNA 溶液，可立即使用或-20℃长期保存。
13.本产品所用离心吸附柱吸附能力比较强，如果再次用 DNA 洗脱液 2.0 洗脱，还能洗脱下一些血液 DNA。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！