深加工食品DNA提取试剂盒（深加工食品DNAout）

深加工食品DNA提取试剂盒（深加工食品DNAout）

产品及特点 由于食品成分复杂，除含有多种原料组分外，还含有盐、糖、油、色素等食品添加剂，加工过程中的煎、炸、煮、烤等工艺也会使原料中的DNA会受到不同程度的损坏。因此，从加工食品中提取DNA比从原材料中提取DNA相对的困难。本试剂盒采用独特的缓冲液系统，特别适合从深加工食品中提取DNA。它具有下列特点：
1. DNA 更加纯净，可直接用于PCR、荧光定量PCR等分子生物学实验。。
2. 无需酚/氯仿抽提，使用安全快捷方便。
3. 从100 mg样品中即可获得足够用于PCR检测的DNA量；
4. 可最大限度去除深加工食品中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。
5. 本产品仅供科研使用。

规格及成分：

运输及保存 常温运输和保存、Proteinase K溶液 （10mg/mL）-20℃保存，有效期一年。
自备试剂
无水乙醇，异丙醇， 精提酵母tRNA溶液B
使用方法 

注意：针对酱油含有较多焦糖色素、番茄酱pH值过低等不利于DNA提取的特点，在正式进入试剂盒提取之前，应对提取样品进行预处理。特殊样品请咨询后进行提取；如果溶液A中出现沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用；所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。酱油样品预处理：取酱油30mL，加入60mL无水乙醇混匀，置冰（-20℃）放置10min后10,000rpm离心10min。弃上清，在沉淀中加入30ml 0.1M Tris-HCl溶液（pH8.0），用力摇匀，全部转移至100mL烧杯中，磁力搅拌器搅拌2h。分装至1.5mL离心管中，12,000rpm离心10min。弃上清，加入1.5mL 0.1M TrisHCl溶液（pH8.0），涡旋振荡至块状打散，12,000rpm离心10min。弃上清，沉淀中的焦糖色素及盐等小分子已全部去除，可直接用于DNA提取。
TE Buffer，
1×，pH8.0 15 mL
0.1M Tris-HCl溶液（pH8.0）。
番茄酱样品预处理：取番茄酱液态加工样品1.5mL于离心管中，10,000rpm离心15min。弃上清，用1mL 0.1M Tris-HCl溶液（pH8.0）洗涤样品3次，振荡混匀后10,000rpm离心15min。弃上清，留沉淀待用。
1. 称取研碎的深加工食品100mg或上述预处理的样品，加500µL深加工食品DNA提取溶液A和40µL的Proteinase K溶液(10mg/mL)，旋涡振荡1min。
2. 56℃孵育1h。孵育过程中每15min振荡一次。
3. 加入200µL深加工食品DNA提取溶液B，涡旋振荡1min，室温静10min。
4. 12,000rpm离心5min，将上清转移至新的离心管中。
5. 向上清液中加入0.7倍体积的异丙醇，充分混匀。（如500µL的水相溶液加350µL异丙醇），12,000rpm离心3min，弃上清，保留沉淀（此步沉淀可能看不见）。注意加异丙醇沉淀后，弃上清应小心，防止把DNA倒出。
6. 可选步骤：在步骤5加异丙醇之前，向上清液中加入1μL 精提酵母tRNA溶液B（酱油、番茄酱必加），再加入异丙醇。
7. 加入700µL70%乙醇，涡旋振荡5sec，12,000rpm离心2min，弃上清。
8. 重复操作步骤7。
9. 开盖倒置，室温5-10min，彻底晾干残余的乙醇，乙醇的残留会影响后续的酶反应（PCR、荧光定量PCR等）实验。
10. 加入20-50μL TE Buffer，旋涡振荡1min，最终得到DNA溶液。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！