PCR级绿如蓝染料，20×

PCR级绿如蓝染料，20×

产品及特点
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定，并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、Lc Green、EvaGreen一样，是第三代饱和型荧光染料，在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应，具有下列特点:
1.饱和浓度不抑制PCR反应，因此得到的荧光信号更强。
2.抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green IR
3.饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系，可以用于精细的Tm测定实验，如High-resolutionmelting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR GreenI接近，可以使用SYBR Green I 的光学设置参数。
5.不能渗透进入细胞内，毒性和致突变性远低于SYBR Green I。

6.可以用于qPCR、高分辨DNA溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。

规格及成分

运输及保存 常温运输、-20℃避光保存，有效期一年。

自备试剂 PCR试剂、DNA模板、引物、超纯水。

使用方法
先将本产品放置在室温融化，然后震荡10秒钟，短暂离心后待用。下面以50 uL的标准PCR反应体系为例说明其使用:
1.在一干净的PCR管中，加入下列成分:
10 X PCR Buffer (No Mg2+)      5 uL
MgCl50 mM                            2.5 uL
dNTP 10 mM                           l uL
本产品(PCR级绿如蓝染料)          2.5 uL
Taq DNA聚合酶                       1-5 U

DNA模板                               适量
PCR引物                                 5-50 pmol each
补水到                                     50 uL
2．放入荧光PCR仪中进行qPCR，并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I完全一样。
注意事项:
1.如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系统,需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”;使用LightCycler时，最好在PCR体系中再加入终浓度为0.5 mg/mL的BSA 以降低仪罃对染料和模板的非特异吸附。

2．如果使用化学修饰过的 Taq DNA 聚合酶，可能需要减低KCl 的浓度并提高Tris 的浓度。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！