一站式RNA电泳套装

一站式RNA电泳套装

产品及特点 本产品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA 上样液、电泳液等在内的 RNA 电泳套装，专门用于 RNA 电泳分析。可以进行至少 10 次 mini 变性胶电泳。

1. 即开即用，用户不需要自己进行 RNase 灭活、高压灭菌、pH 调节等操作。

2. 与 Northern 杂交等后续反应兼容。

规格及成分

运输及保存 常温运输和保存，但 RNAon 长期需要-20℃保存，有效期一年。

自备试剂 EB (10 mg/mL)、DEPC 水。

使用方法 注意：所有器皿（三角瓶，电泳槽，枪头等）均需去除 RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的固相 RNase 清除剂。
一、配制琼脂糖甲醛变性胶（1.2%, 100 mL）
1. 在三角瓶中加入下列成份:
琼脂糖      1.2 -1.5 g
无菌水       87 mL
2. 将琼脂糖加热融化后，加入 10 mL 10×RNArun（注意：10×RNArun即 10×MOPS 电泳缓冲液，瓶子一旦打开，就很容易产生污染细菌，细菌大量繁殖后会释放大量 RNase，所以剩下的 10×RNArun 最好-20℃放置）。
3. 待胶冷却至 60oC 左右，再加下列成份:
甲醛          3.0 mL
自备 EB (10 mg/mL) 2-4 uL
注意：由于本试剂盒提供的 RNAon 中含 EB，所以也可以不加 EB，但效果较差。如果使用自备的其他染料，如 SYBR Green I，则不能同时使用其他染料，包括含 EB 的 RNAon，用户需要另购不含 EB 的 RNAon）。
4. 混匀后倒胶, 凝固半小时后即可以使用。
二、配制电泳液
5. 将 RNArun 用超纯水稀释十倍后即成电泳液，所需要的体积根据使用的电泳槽决定。
三、变性 RNA 样品
6. 在一干净的离心管中将 5-10 uL RNA 和 15 uL RNAon 混合，85℃保温10 分钟后冰浴 5-10 分钟，直接上样。注意：每一泳道至多可分析 30 ugRNA，通常用 10-20 ug 总 RNA 进行 Northern 杂交，可以检测高丰度mRNA（占 mRNA 总量的 0.1%以上）；如待测 RNA 含量极微，每个泳道需加 0.5-3.0 ug poly(A)+ RNA。
四、电泳
7. 电泳时，将凝胶预电泳 5 min（电压为 5 V/cm）。随后加样品和分子量对照(如果有的话)，以 3－4 V/cm 的电压电泳，直至染料迁移至胶下游的 3/4 处。
8. 电泳结束后，在 300 nm 紫外灯下拍照。
五、后续处理
9. 按标准方法进行 Northern 杂交等后续处理。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！