电泳级SYBR Green I

电泳级SYBR Green I

产品及特点
SYBR Green I,EG是电泳级低毒高灵敏的花青类 DNA荧光染料，适用于各种核酸电泳分析。
1.低毒安全，其致突变性低于EB 数倍甚至数十倍。

2．高灵敏，SYBR Green 1与 dsDNA结合，荧光信号会增强80O-100o倍，至少可检出20 pg DNA，灵敏度高于EB染色法10-25倍。

3.适用范围广，可适用于多种电泳分析，包括琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳等。与基因的SuperBuffer-2兼容。

4．不影响其它修饰酶（Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）作用。5.操作简单，无须脱色或冲洗。

规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃闭光保仔，有效期一年。
自备试剂 电泳缓冲液（稀释用)
使用方法 使用方法之一:电泳前染色本方法是在上样时对DNA进行染色，只适于琼脂糖凝胶电泳。
1.用高纯度的无水 DMSO将10000×的SYBR Green Ⅰ稀释100倍成100×电泳前染色液。染色液可以在-20℃和闭光条件下可以保存一个月以上。
2．按常规方法制备胶，胶的厚度最好不要超过5mm，胶中不能含任何染料。
3.将100 X电泳前染色液与DNA样品（包括DNA Marker)按1:10的比例混合，室温放置10-15分钟，加上样液后上样。
4.上样后电泳。
5.在300 nm 的UV下观察。UV的功率最好为90w (15w x6)，手持UV一般功率不够，难以得到满意的灵敏度。除300 nm 外，SYBRGreen I还可以在500 nm和380 nm 的激发光下观察（如使用DarkReader蓝色可见光透色仪)。也可以用激光扫描仪记录电泳结果。

6.用配置了520-550 nm滤光片（一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。

注意:不要使用与EB兼容的红色滤光片(能阻挡520-550 nm 的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片，效果会更好。
7.后续Southern或Northern转膜或胶回收按常规操作进行。
使用方状之二:电泳中染色
本方法是将SYBR Green I加入到琼脂糖凝胶中，优点是不需要额外的染色处理,只适于琼脂糖凝胶电泳。
1.将10000xSYBR GreenI直接加入到融化的、但温度已经降低到50℃左右的琼脂糖凝胶中，使其终浓度在0.5-1X左右，混合均匀后倒胶，厚度最好不要超过5 mm。
2．按常规方法上样和电泳。
3.电泳后观察和照相处理同方法一。
注意:由于在琼脂糖凝胶中的SYBR GreenⅠ在加热融化时会大量分解，所以琼脂糖凝胶最好需要多少配多少。
使用方祛之三:电泳后染色

本方法是在电泳后对DNA进行染色，适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE，检测灵敏度可达 20 pg DNA，但该方法需要单独的染色处理。
1.按照常规方法进行电泳。
2.用pH 7.0-8.3的缓冲液（如:TAE，TBE或TE)将10000xSYBRGreen I稀释10000倍成1×电泳后染色液。
3.将电泳后染色液倒入合适的聚丙烯容器中，放入琼脂糖凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟。对聚丙烯酰胺凝胶，可取下一块玻璃板,然后将配好的电泳后染色液轻轻地倒在PAGE胶板上，让染色液均匀地覆盖整个PAGE胶板，静置染色30分钟。避免让染色液与玻璃表面接触。
4.观察和照相处理同方法一。
注意:电泳后染色液可以冷冻避光储存一个星期。反复使用次数取决于胶的大小(胶越大，非特异吸附产生的损耗就越大)，一般可重复使用4次。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！