超快蛋白银染试剂盒

超快蛋白银染试剂盒

产品及特点 蛋白质银染的原理是银离子(Ag+）可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合 物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使 Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成 黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色，其灵敏度比考马斯亮蓝高 100 倍。 但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐， 尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本产品，其特点如下：

1. 超快，整个过程只需要不到 60 分钟。

2. 操作简单，只有固定（30 分钟）、染色（10 分钟）和显影（10 分钟）三步。

3. 灵敏度比考马斯亮蓝染色高 100 倍，能检测到 10ng 的蛋白质条带。

4. 三个成分中的两个都是现用现配，可重复性好。

5. 本规格可配制 1000mL 蛋白银染溶液 A（染色液），实际使用次数根据 PAGE 胶大小不同而不同。

规格及成分

运输及保存 常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂 去离子水，乙醇和乙酸。

使用方法 一：配制银染固定液 100 mL （对 mini PAGE 胶）

1. 将自备的40mL 无水乙醇、10mL 乙酸和50 mL去离子水充分混合即可使用。 本试剂盒不含这些成分。

二：配制溶液 A

2. 需要配制的蛋白银染溶液 A（染色液）的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关，一 般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制 100mL 蛋白银染 溶液 A。如果配制的蛋白银染溶液 A 的体积不是 100mL，则需按比例改变各 成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液 A 需要 新鲜配制。

三：配制蛋白银染溶液 B

3. 需要配制的蛋白银染溶液 B（显色液）的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关，一 般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制 100mL 蛋白银染 溶液 B。如果配制的蛋白银染溶液 B 的体积不是 100mL，则需按比例改变各 成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。

四：银染

4. PAGE 电泳或 SDS-PAGE 电泳结束后，将胶转移到装有 100 mL 银染固定液 的瓷盘中，摇晃 30 分钟以去除干扰银染的成分（如甘氨酸、SDS、DTT、甘 油等）。注：此步很重要，否则银染背景很高。

5. 用 100 mL 自备的去离子水漂洗 2 次，每次 2 分钟。

6. 将 PAGE 胶转移到适当体积的蛋白银染溶液 A 中，使蛋白银染溶液 A 在轻柔 摇晃过程中能够淹没 PAGE 胶。室温摇晃处理 10 分钟。

7. 倒掉蛋白银染溶液 A，用 100 mL 自备的去离子水快速漂洗 2 次，每次半分钟。

8. 将 PAGE 胶转移到适当体积的蛋白银染溶液 B 中，使蛋白银染溶液 B 在轻柔 摇晃过程中能够淹没 PAGE 胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现（一般需要 10 分钟左右）。

9. 迅速将 PAGE 胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深，如果有 必要保存胶，可以用自备的 5%的乙酸终止显色。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！