MMLV逆转录酶，200U/uL

MMLV逆转录酶，200U/uL

产品及特点 该酶是突变型的 MMLV 逆转录 DNA 聚合酶，从表达 Moloney MurineLeukemia Virus （莫洛尼氏鼠白血病病）reverse transcriptase 基因(pol基因)的 E.coli 细胞中分离纯化而得，由一个分子量为 76.1 KDa 的单亚基组成，可催化以单链 DNA、RNA 或 DNA：RNA 杂交链为模板的互补 DNA 链的聚合反应。跟野生型相比,它没有 RNase H 活性。

1. 延伸性能好，没有 RNase H 活性，可合成长达 12.5 Kb 的全长 cDNA

2. 本产品提供的 MMLV 酶含 RNase Inhibitor，用户不需要单独准备。
3. 本产品提供的含 dNTP 的 4×MMLV Buffer，用户不需要单独准备。
4. 最佳反应温度为 42℃，但在 50℃时仍有活性，70℃10 分钟能使其失活。

5. 能以 Cy3-，Cy5-，rhodamine-， aminoallyl-，fluorescein 等标记的nucleotides 为底物。

6. 可用于 first strand cDNA 合成，second strand cDNA 合成，DNAlabeling，RNA primer extension 等。

7. 与 PCR 兼容，RT 产物可以用于 PCR 和 Real-time PCR。

8. 能被金属螯合剂，无机磷酸，焦磷酸和多胺抑制。

规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，有限期一年

使用方法 一：合成 PCR 用的 1st-strand cDNA

1. 按下表配制 RT 反应体系:

2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。

3. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃（5 分钟）。

4. 加入 1 μL (=200 U) MMLV 逆转录酶（含 RI），终体积为 20μL。

5. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟， 然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。

6. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以 直接作为 PCR 模板使用，不需要纯化。

二：合成建文库用的 1st-strand cDNA

1. 按下表配制 RT 反应体系:

2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。

3. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃（5 分钟）。

4. 加入 1 μL (=200 U) MMLV 逆转录酶（含 RI），终体积为 20μL。

5. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟， 然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。

6. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以 用于第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！