Nauta染色法神经组织染色试剂盒

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‍Nauta染色法神经组织染色试剂盒

产品及特点 本试剂盒是采用 Nauta 染色法神经组织染色法，专门用于神经纤维染色，它 有下列特点：

1. 即开即用，操作简便。

2. 产品稳定性好、可以长期保存、染色后不易褪色。

3. 本产品只能用于科研。

规格及成分

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂 切片、10%甲醛液、0.5%磷钼酸、高锰酸钾水溶液、1%草酸、对苯二酚液、还原、蒸馏水、明胶、无水乙醇。

使用方法

1. 组织固定于 10%甲醛液。
2. 冰冻切片厚 30-50μm 切片置入 10%甲醛液内，根据需要可将切片切成不同的厚度（25-50μm），然后加以选择，如一时来不及处理，冰箱内可较长时间贮存而不变质。
3. 镀银时每次 5-20 片，略水洗后按以下步骤处理：①浸入 0.5%磷钼酸水溶液15-30 min。②切片速洗后转入 0.025%-0.05%高锰酸钾水溶液，分别以切片试处理 5min、10min 及 15 min，这一步是抑制未溃变纤维的关健。时间
过短抑制不足，时间过长则使溃变纤维不易银染而受到抑制。如用 0.025%浓度的高锰酸钾，则时间变动的幅度较大，比较容易掌握。此外，切片的厚薄亦与作用的时间有关。一般情况下，长时间固定的组织，处理时间需短些。③在
等量的 1%草酸和对苯二酚液内消色，至少 2 min。虽然可能不到 1 min 即消色，但给以加倍的时间会使消色作用彻底。
4. 经蒸馏水充分洗涤。。
5. 经 Nauta 染色法神经组织染色溶液 A 染色 15-30 min，再经水洗两次。以后均应逐片处理.。
6. 切片在 Nauta 染色法神经组织染色溶液 B 内应不停地揺荡 45-60 sec。
7. 切片直接递入还原液（10%甲醛 13.5 mL，1％枸椽酸液 13. 5 mL，95%乙醇 45 mL，蒸馏水 400 mL），约 1 min，切片还原为棕色，至 2 min 为止。此时不断轻摇，勿使切片沉底不动。
8. 切片速经水洗，浸于 Nauta 染色法神经组织染色溶液 C 1 min，再用蒸馏水洗数次。
9. 用 Albrecht 明胶-乙醇法封片。Albrecht 明胶-乙醇封片法，入等量 1. 5%明胶及 80%乙醇约 5 min，将切片捞于载玻片上，使用新滤纸略吸干。入 95%乙醇最后凝固明胶.。
10. 脱水、透明、封片。 结果 粗细不一的溃变纤维均染成黑色，背景黄褐色。但有一些正常轴索呈黑色。溃变纤维所终止的细胞可见有溃变的细胞周围或树突周围纤维。胞体及树突近侧端染成淡褐色。

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