脂肪酶(LPS）活性检测试剂盒 微量法

脂肪酶（LPS）活性检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

标准品：临用前加入 1.435 mL 无水乙醇配成 125 μmol/mL 的油酸标准溶液，充分溶解。用前注意解冻溶解。

产品说明：

LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

研钵/匀浆器、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/酶标板（非聚苯乙烯材质）、可调式移液枪、甲苯、无水乙醇、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

组织样本：称取约 0.1g 样本，加试剂一 1.0mL 充分研磨，于 4℃，15000rpm 离心 30min，取上清液待测。血清样本：直接检测。

二、测定步骤

1、 可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至710nm，甲苯调零。

2、 试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。

3、 标准溶液的稀释：将125μmol/mL的油酸标准溶液用乙醇稀释为125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9μmol/mL的标准溶液待测。

4、 操作表：

反复震荡混匀；室温 4000rpm 离心 10 min，小心吸取上层溶液 0.2mL，加入微量玻璃比色皿/酶标板中，于 710nm处测定吸光值。记为 A 空白管、A 测定管、A 标准管，计算 ΔA 测定=A 测定管-A 空白管，ΔA 标准=A 标准管-A空白管。

三、LPS活性计算

注意事项：

1、 甲苯有毒，实验过程中需佩戴手套和口罩。

2、 实验过程中须远离火源。

3、 当吸光度大于1时，建议将样本稀释后测量。

4、 如果用酶标板进行试验，建议选用非聚苯乙烯材质的96孔板。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！