糜蛋白酶活性检测试剂盒 紫外分光光度法

糜蛋白酶活性检测试剂盒说明书

紫外分光光度法

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前溶于 4 mL 甲醇中，再用水定容至 25 mL。可分装后-20℃保存，避免反复冻融。

产品说明：

糜蛋白酶，又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似，但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化，对脓性和非脓性痰液均有效；也用于创伤或手术后伤口愈合，如白内障摘除。糜蛋白酶催化 BTEE 水解，产物在 256nm 有特征光吸收；通过测定 256nm 光吸收增加速率，来计算糜蛋白酶活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

（1）组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）1：5-10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清即粗酶液。

（2）血清（浆）：直接检测。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至256nm，蒸馏水调零。

2、 试剂一置于25℃水浴中保温30min。

3、 样本测定：

将上述试剂分别加入 1mL 石英比色皿后充分混匀，于 256nm 处测定初始吸光值 A1，然后迅速将比色皿连同反应液放入 25℃水浴锅中水浴 3min，然后迅速拿出擦干测定 3min 的吸光度 A2，计算 ΔA=A2-A1。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！