RIPA裂解液（不含triton x-100）

产品概述

RIPA裂解液采用优质原料配制，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。 本RIPA裂解液成分为25mM Tris•HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根据相应实验要求添加自己需要的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

1年

检测方法

WB、IP等

适用样本

细胞、组织

产品应用

WB、IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒 7.匀浆机/匀浆器

试剂准备

1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

离心管

吸头

一次性手套

使用注意事项

1.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。

2.整个过程须保持样品处于低温状态。

3.本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

4.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

5.禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

6.最hao使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

7.避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用方法

A． 细胞裂解

1. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液（每106个细胞，大约10mg或10ul压积，加100ul RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一个75 cm2培养瓶加1 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。

4. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。

5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

B． 组织裂解

1. 取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

2. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。

3. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！