膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）

产品概述

膜蛋白提取试剂盒（双向电泳用）是一种快速高效的高产膜蛋白提取试剂盒。 膜蛋白提取试剂盒可以从细胞组织样本中提取膜蛋白，可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。 提取的蛋白样品中不含盐，可以直接用于等电聚焦、双向电泳等。如下游实验不需要直接用于等电聚焦、双向电泳，可选用 用于Western Blotting、普通蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验的其他试剂盒。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

双向电泳

适用样本

动物细胞/组织

产品特点

1、 使用方便。

2、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

3、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

产品应用

双向电泳

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法

1. 提取液制备：

每500ul冷的提取液A中加入5ul提取液B 和2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 取5-10×106个以上细胞，在4℃，500g条件下离心3-5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

或者取50mg-100mg组织样本，用冷PBS洗干净，然后用手术剪刀尽可能剪碎，加400ul冷的试剂 A，用组织匀浆机/器匀浆至无明显肉眼可见固体。

3. 洗涤后的细胞样品中加入400ul冷的试剂 A，充分混匀。

4. 在2-8℃条件下振荡20-30分钟，至细胞充分裂解，细胞沉淀明显减少。

5. 在2-8℃低温下12000g离心5分钟，取上清。

6. 在37℃水浴10分钟。

7. 在37℃， 1000g离心3分钟。

8. 此时液体分为2层，小心移除上层溶液，留管底部下层，大约50ul液体。

9. 用50ul-200ul膜蛋白溶解液溶解该下层液体，即得膜蛋白样品。

10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！