细菌总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）

产品概述

细菌总蛋白提取试剂盒（双向电泳用）可以从各种细菌样本中提取总蛋白，提取过程简单方便。 本试剂盒适用于各种革兰氏阳性菌和阴性菌样本。 该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白不含盐，可直接用于2D电泳。 如下游实验不需要直接用于等电聚焦、双向电泳等，可选用用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验的试剂盒。 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

细菌

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

? 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法

1. 提取液的准备：

根据所需要提取的样本量，每500 μl蛋白提取液中A加入5 μl试剂B和2 μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀。

2. 在 12000×g条件下将菌液离心5分钟，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体。

3. 用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。

4. 按每100 mg湿重菌体样本加入500 μl裂解液，吹打混匀，2-8℃振荡20-30分钟。

5. 在150 w-300 w，10 s超声/10 s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。

6. 在4℃， 12000×g条件下将菌液离心5分钟，将上清移入冷的干净离心管。

7. 即得到细菌总蛋白样品。

8. 将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。