植物膜蛋白/叶绿体蛋白提取试剂盒

产品概述

叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。 叶绿体蛋白/膜蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取叶绿体蛋白和植物膜蛋白，提取过程简单方便，可在一小时内提取得到高质量的叶绿体蛋白和膜蛋白。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份，包括细胞质膜、叶绿体膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

植物

产品特点

1.使用方便。

2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

? 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

? 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法

1. 提取液准备：

每500ul冷的蛋白提取液C和D中分别加入1ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取新鲜植物样本叶片，用纯水或PBS洗净擦干后去除叶梗和粗脉。

3. 用手术剪刀尽可能剪碎。

每500mg-1g新鲜植物叶片样本中加入2ml提取液A，用匀浆机充分匀浆或用Dounce匀浆器充分匀浆。

4. 将匀浆用100um细胞筛过滤。

5. 将滤液800g力离心3分钟。将上清（I）移入另一干净离心管，留沉淀（I）待用。

6. 将上清（I）2000g力离心10分钟。收集沉淀（II）。将上清（II）吸出加入沉淀（I）中重悬沉淀（I），留重悬液（A）进行步骤11待用。

7. 在步骤7沉淀（II）中加入200ul提取液B，充分混匀后，在2-8℃振荡20分钟。

8. 将提取液在4℃，12000×g条件下离心5分钟，取上清，弃沉淀。

9. 即得叶绿体蛋白。

10. 在重悬液（A）中加入80ul提取液C，充分混匀，置2-8℃振荡1-2小时。

11. 在37℃水浴10分钟。

12. 在37℃，1000×g离心2分钟。

13. 此时溶液分为两层，小心移除上层，保留下层溶液，下层体积大约50ul左右。

14. 在下层液体中加入1-2倍体积的溶解液D，充分溶解，即得植物膜蛋白样品。

15. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或调整相应的浓度后直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！