植物核糖体蛋白提取试剂盒

产品概述

植物核糖体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速提取得到植物核糖体。 本试剂盒适用于提取新鲜植物叶片样本的核糖体，用于冻存样本的提取时核糖体回收率较低。 核糖体提取试剂盒提取的核糖体具有生物活性，可以用于核糖体功能研究、核糖体蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用非酶法的快速提取方法，可以在一小时内快速提取得到核糖体，但是回收率比酶法核糖体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系选择其他货号的试剂盒，酶法提取得到的核糖体回收率会有增加，但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。 本试剂盒提取得到的为真核型的核糖体，需要叶绿体线粒体等原核型核糖体提取的请选择其它货号的试剂盒。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

植物

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。

使用方法

1. 提取液准备：

每200 μl冷的总蛋白提取液中加入1 μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 取500 mg-1 g新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。用手术剪刀尽可能剪碎。

3. 加入2 ml 试剂A，用匀浆机/匀浆器/组织搅碎机充分匀浆。

4. 将匀浆液用100 μm细胞筛过滤。

5. 将滤液在500×g条件下离心5分钟，弃沉淀，收集上清。

6. 将上清在1000×g条件下离心10分钟，弃沉淀，收集上清。

7. 在上清中加入0.5 ml提取液B，充分混匀。

8. 置振荡器振荡20分钟。

9. 在2000×g力离心5分钟。弃沉淀，收集上清。

10. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀，收集上清。

11. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀，收集上清。

12. 将上清在4℃，100000×g力条件下离心60分钟。弃上清，收集沉淀。

13. 弃上清，在沉淀中加入100μl核糖体蛋白提取液C，充分混匀。

14. 在4℃条件下振荡20-30分钟。

15. 在4℃，10000×g条件下离心5分钟。

16. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核糖体蛋白。

17. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！