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糖蛋白富集试剂盒

供货周期: 一周
品牌: 博尔森
规格: 50T
货号: BES20626BO
CAS号:
报价: ¥3000
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产品介绍

糖蛋白富集试剂盒

产品概述

糖蛋白富集试剂盒可以选择性的对糖蛋白进行富集和纯化。 本试剂盒利用糖蛋白亲和纯化柱与糖蛋白之间的共价配位作用实现分离纯化。纯化柱填料采用无定形硅胶填料,具有键合相稳定,键合率高等特点,平均粒径为50 微米,亲和层析介质可以用于各种样本糖蛋白的分离纯化富集。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完!

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

动物细胞/组织

产品特点

本试剂盒纯化柱参数:

特点:基团脱落少,结合特异性强

配基密度:20μmol/ml

吸附载量:1mg Con A /柱

最da流速:300cm/h

pH范围:3-10,在位清洗时pH范围可到2-13

使用温度:4℃~常温

保存温度:+4~8℃

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.匀浆机/匀浆器

4.涡旋混匀器

5.移液器

6.冰箱

7.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。

? 蛋白样品中不可含Tris。

? 蛋白样品不可以含有三乙醇胺类的物质。

? 蛋白样品中可以含有二价阳离子、非离子表面活性剂。

? 上样蛋白样品pH值必须高于8,最hao在8-9,蛋白浓度在0.25-0.5mg/ml。

? 洗涤细胞和组织是不能用Tris缓冲液。

? 每个新柱的最da载量约为1mg糖蛋白,使用过的柱子经过再生反复使用的,载量会有下降。

? 用蛋白柱进行糖蛋白富集,需要离心操作时可以将蛋白柱置于一个50ml离心管离心即可。

? zui终蛋白样品用于2D电泳前需脱盐。

使用方法

一、蛋白样品的准备:

以下为由细胞和组织制备蛋白样品的参考步骤。

其它方法得到的蛋白样品稀释至蛋白浓度为0.25-0.5mg/ml后直接上样即可,确保蛋白样品的pH值高于8,并且蛋白样品中不含Tris和高浓度糖。

可以用试剂盒中的洗柱液、裂解液、洗涤液稀释蛋白样品。

细胞裂解:

1. 提取液制备:

每500μl冷的裂解液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。

2. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。

3. 用冷生理盐水洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每5×106个细胞或100mg组织样本中加入500μl冷的蛋白裂解液,混匀后,用匀浆器充分匀浆,至无明显肉眼可见固体。

5. 将匀浆液在4℃条件下振荡15-30分钟。

6. 在4℃,14000g条件下离心15分钟。

7. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白裂解液。

二、柱平衡:

加入500μl洗柱液洗柱,重力作用下或4℃下500×g力离心1分钟甩干吸附柱。

再次加入500μl洗柱液洗柱,重力作用下或4℃下500×g力离心1分钟甩干吸附柱。

三、上样:

将以上蛋白裂解液或其它待富集蛋白样品加入吸附柱,重力作用下或4℃下500×g力离心1分钟甩干吸附柱。

四、洗柱:

加入300μl洗涤液洗柱,重力作用下或4℃下500×g力离心1分钟甩干吸附柱。

重复两次。

五、洗脱:

加入300μl糖蛋白洗脱液,重力作用下或4℃下1000×g力离心1分钟甩干吸附柱,收集洗脱液。

再次加入300μl糖蛋白洗脱液,重力作用下或4℃下1000×g力离心1分钟甩干吸附柱,收集洗脱液,合并两次的洗脱液,即得到糖蛋白。

六、柱保存和柱再生:

载量大幅降低后,需要再生使用的柱子,可以用1ml 0.1M Tris-HCl(pH5.0)缓冲液洗柱,然后用300μl 0.5M NaOH含2M NaCl流洗,zui后用500μl 20%乙醇洗即可。然后在柱中加入20%乙醇溶液密封,置2-8℃保存。

再生使用时,加入500μl pH8.5磷酸盐缓冲液,浸泡蛋白柱填料30分钟,然后用2ml pH8.5磷酸盐缓冲液洗柱即可。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


糖蛋白富集试剂盒信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于糖蛋白富集试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应糖蛋白富集试剂盒外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供Influenza A H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin、Influenza A H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008)、C1QB Protein, Human, Recombinant (His Tag)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。
工商信息

企业名称

上海博尔森生物科技有限公司

企业信息已认证

企业类型

信用代码

91310117MA1J4K3L3L

成立日期

2020-09-02

注册资本

100

经营范围

一般项目:从事生物科技、医药科技领域內的技术开发、技术咨询、技术服务;仪器仪表、实验室设备及耗材、玻璃制品、电子产品、第一类医疗器械、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)销售;货物或技术进出口(国家禁止或涉及行政审批的货物和技术进出口除外)

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