细胞核染色试剂 DAPI

产品概述

DAPI染色试剂用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。 DAPI (diamidino-2-phenylindole) 能与双链DNA小槽，特别是AT碱基结合，也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双链DNA结合时，荧光强度增强20倍，而与单链DNA结合则无荧光增强现象，因此是一种简易、快速和敏感地检测DNA的方法。 DAPI的荧光强度较Hoechst低，但荧光稳定性优于Hoechst；其特异性较溴化乙啶和碘化丙啶高。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度

-20℃ 避光

注意事项

1.染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。

2.染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

有效期

6个月

检测方法

荧光显微镜/激光共聚焦

适用样本

动物细胞

产品应用

荧光显微镜/激光共聚焦

仪器准备

1.荧光显微镜/激光共聚焦

2.离心机

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液 2.HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

5.本染色液可用于培养细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。

6.根据样本情况和下游的检测仪器选择合适的染色方法，只要在染色时染色工作液能充分覆盖细胞样本即可。

7.活细胞原位染色可能需要较长时间，可将染液加入培养基后避光孵育1-4小时，或更长时间。

8.以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例，细胞染色不需要固定，也可以固定后染色，其他方法请参阅相关资料。

使用方法

1. 染色工作液的配制：

根据样品数用PBS将DAPI染色液10-100倍稀释，配制成染色工作液。

2. 细胞涂片的制备：

贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中，让培养细胞长于玻片上，然后用药物诱导细胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。

对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，500-1000g离心5分钟收集细胞，用PBS洗2次，收集调整细胞数为1X105/ml，涂片或用离心涂片，用4%多聚甲醛固定5min；

3. 用PBS洗涤涂片两次。

4. 加适量染色工作液于涂片上，室温避光染色5-20分钟。

5. 用荧光显微镜检测结果。染料-DNA复合物的zui大激发波长为360nm，zui大发射波长为454nm。

结果分析 ：

置于荧光显微镜下用360nm激发光观察结果：DAPI染色呈蓝白色荧光。

早期凋亡细胞呈现核浓缩，染色加深，或核染色质呈新月形聚集于核膜一边；晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆形小体，并被细胞膜所包绕，即凋亡小体。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！