羟自由基检测试剂盒
产品概述
Fenton反应是最常见的产生羟自由基的化学反应,H2O2的量和Fenton反应产生的OH.量成正比,当给予电子受体后,用griess试剂显色,形成红色物质,其呈色与OH的多少成正比关系。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
3个月
检测方法
分光光度计
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.移液器
4.漩涡混匀器
试剂准备
1.冰乙酸
2.纯水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
使用注意事项
1.必须每一只管子单独做,并且反应时间精确控制在1min;
2.必须严格按照操作表顺序加入试剂,不可配置混合试剂;
3.检测样本溶剂或介质可为生理盐水、纯水,但不能为磷酸缓冲液、无水乙醇等;
4.此法检测灵敏度较高,检测血清(浆)和组织以外的样本时,最hao先取原液及不同浓度稀释后的样本,例如5倍形式液或10倍稀释液做预试;如果样本管颜色太浅可将样本用其溶剂继续稀释至颜色较深为止。
使用方法
试剂配制
1. 0.03%标准品工作液的配制:
按试剂 A储备液:纯水=1:99配制,用多少配多少;
2. 底物工作液配制:
(1)如果样本为抑制羟自由基,即样本管吸光度小于对照管吸光度,底物工作液的配制方法如下:
按试剂 B底物储备液:纯水=1:99配制,用多少配多少;
(2)如果样本为产生羟自由基,即样本管吸光度大于对照管吸光度,底物工作液的配制方法如下:
按试剂 B底物储备液:纯水=1:299配制,用多少配多少;
3. 试剂C1工作液配制:按试剂C1:纯水=1:9配制;
4. 试剂C工作液配制:按试剂C1工作液:试剂C2=1:1配制;用多少配多少;剩余的2-8℃;
5. 试剂D工作液的配制:
用时将试剂D加纯水稀释至100ml即可,2-8℃保存;若有结晶,则37℃水浴至完全溶解后在加纯水稀释;
6. 显色剂的配制:试剂D工作液:试剂E:试剂F:冰乙酸=8:3:3:2,用多少配多少。
注:1.抑制羟自由基的物质:血清(浆)、各种组织匀浆液等;
2.产生羟自由基的物质:中性白细胞、某些药物、部分植物等。
(三)、计算公式:
血清(浆)中抑制羟自由基能力的计算:
1. 定义:
每ml血清(浆)在37℃反应1min,使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为
1个抑制羟自由基能力单位;
2. 计算公式:
抑制羟自由基能力 = (对照OD值-样本OD值)/(标准OD值-空白OD值)
(U/ml) X 标准品浓度(8.824mmol/L)X (1ml/取样量) X
样本测试前的稀释倍数
组织样本中抑制羟自由基能力的计算:
1. 定义:
每mg组织蛋白在37℃反应1min,使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为
1个抑制羟自由基能力单位;
2. 计算公式:
抑制羟自由基能力 = (对照OD值-样本OD值)/(标准OD值-空白OD值)
(U/mgprot) X 标准品浓度(8.824mmol/L)÷{待测样本蛋白浓度(mgprot/ml)X 取样量(0.2ml)}
溶血液样本中抑制羟自由基能力的计算:
1. 定义:
每mg血红蛋白在37℃反应1min,使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为
1个抑制羟自由基能力单位;
2. 计算公式:
抑制羟自由基能力 = (对照OD值-样本OD值)/(标准OD值-空白OD值)
(U/mgHb) X 标准品浓度(8.824mmol/L)X (1ml/取样量) X
样本测试前的稀释倍数÷血红蛋白浓度(mgHb/ml)
产生羟自由基能力的计算公式:
1. 定义:
每ml或每mg物质或每立方厘米内106个细胞在本反应体系中使体系中H2O2浓
度增加1mmol/L为1个产生羟自由基能力单位;
2. 计算公式:
产生羟自由基能力 = (样本OD值-对照OD值)/(标准OD值-空白OD值)
(U/ml) X 标准品浓度(8.824mmol/L)X (1ml/取样量) X
样本测试前的稀释倍数
【注】: 必须每一只管子单独做;
反应时间精确在1min。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
羟自由基检测试剂盒信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于羟自由基检测试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应羟自由基检测试剂盒外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供Human KRAS / K-Ras (G12D & Q61H) Protein (His Tag)、14?3?3/YWHAQ Protein, Human, Recombinant (GST Tag)、Human KRAS / K-Ras (G12D & Q61H) Protein (His Tag)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。