乙酰胆碱酯酶（AChE）检测试剂盒

产品概述

胆碱酯酶是胆碱能神经递质乙酰胆碱的水解酶，直接参与神经功能调节、肌肉运动、大脑思维、记忆等重要功能。胆碱酯酶活力有改变时，以上各组织器官功能也会有改变。另外，有机磷农药是胆碱酯酶的特异性抑制剂，它通过各种途径进入机体后可抑制胆碱酯酶的活性。 乙酰胆碱酯酶（AChE）检测试剂盒利用乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase）水解乙酰胆碱生成胆碱及乙酸，胆碱可以与巯基显色剂反应生成TNB（对称三硝基苯，Sym-Trinitrobenzene）黄色化合物，根据颜色深浅进行比色定量，水解产物胆碱的数量可反应胆碱酯酶的活力。 本试剂盒适用于测定各种动物组织、血清（浆）、全血等样本中乙酰胆碱酯酶的活力。 本试剂盒灵敏度高，微量样本即可测出乙酰胆碱酯酶的水平；方法简便快速，准确稳定；无需气相色谱等高级仪器，只要一般的分光光度计即可。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

分光光度计

适用样本

血清血浆/尿液/组织/细胞

产品应用

分光光度计

仪器准备

1.可见分光光度计

2.恒温水浴锅

3.离心机

4.漩涡混匀器

5.移液器

试剂准备

1.纯水

耗材准备

1.离心管

2.吸头

使用注意事项

1.试剂D打开后装在空的小塑料瓶内（附空瓶一只）；

2.试剂E 天冷时会有沉淀或混浊，需在37℃水浴加热至透明后即可使用。

使用方法

试剂配制

1. 试剂A标准品工作液的配制：

取试剂A标准品一支加试剂F：生理盐水10ml混匀，即得1umol/ml标准品工作液，现用现配；

2. 底物缓冲液的配制：

使用前每支试剂B粉剂加试剂F：生理盐水20ml，制备成底物缓冲液；2-8℃可保存2周。

3. 显色工作液的配制：

使用前将试剂C：试剂F生理盐水=1:9稀释，制备成显色工作液；现用现配，也可一次配制30ml，避光2-8℃可保存3个月。

操作步骤：

(一)、样本前处理

组织样本：

准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10min，取上清待测（同时取部分上清测定蛋白浓度）；血清（浆）：取不抗凝或抗凝全血1000~1500转/分，离心8min，取上层血清（浆）。一般测定时用生理盐水按1:9比例将血清（浆）稀释（具体稀释浓度以预实验结果为准）；

全血样本：

取0.1ml抗凝全血加纯水至10ml，即按1:99稀释，充分混匀；

（三）、计算公式：

A、 组织匀浆中乙酰胆碱酯酶的计算：

1. 单位定义：

每毫克组织蛋白在37℃保温6min，水解反应体系中1umol 基质为1个活力单位；

2. 计算公式：

组织匀浆中酶活力 = 测定OD值 – 对照OD值 X 标准品浓度 ÷待测样本蛋白浓度

（U/mgprot） 标准OD值 - 空白OD值 （1umol/ml） （mgprot/ml）

B、血清(浆)中乙酰胆碱酯酶的计算：

1. 单位定义：

每毫升血清样本在37℃保温6min，水解反应体系中1umol 基质为1个活力单位；

2. 计算公式：

血清（浆）中酶活力 = 测定OD值 – 对照OD值 X 标准品浓度 X待测样本测试前（U/ml） 标准OD值 - 空白OD值 （1umol/ml） 稀释倍数

1. 计算举例：

取10倍稀释后的血清0.03ml测乙酰胆碱酯酶的活力，测得对照管OD值为0.086，测定管OD值为0.498，标准管OD值为0.190，空白管为0.032，标准管浓度为1umol/ml，则计算结果如下：

血清（浆）酶活力 = 0.498 – 0.086 X 标准品浓度 X 10 =26.08 U/ml（U/ml） 0.190 – 0.032 （1umol/ml）

C、全血中乙酰胆碱酯酶的计算：

1. 单位定义：

每毫升全血在37℃保温6min，水解反应体系中1umol 基质为1个活力单位；

2. 计算公式：

全血中酶活力 = 测定OD值 – 对照OD值 X 标准品浓度 X待测样本测试前（U/ml） 标准OD值 - 空白OD值 （1umol/ml） 稀释倍数

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！