酸性磷酸酶（ACP）检测试剂盒

产品概述

酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒检测原理是酸性磷酸酶(ACP)水解磷酸苯二钠，产生酚和无机磷，经碱处理后酚能与4-AAP反应，产物经氧化生成红色醌类化合物。红色越多，说明酸性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过分光光度比色法测定510nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。 本试剂盒主要用于检测血清中前列腺酸性磷酸酶活性，也可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

分光光度计

适用样本

血清血浆/组织/细胞

产品应用

分光光度计

仪器准备

1.分光光度计

2.恒温水浴锅

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.比色皿

6.冰盒

试剂准备

1.纯水

耗材准备

1.试管

2.吸头

3.离心管

使用注意事项

1.待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。

2.建议每次测定时都做标准曲线，以使标准更准确，另外标准品需避免反复冻融。

3.可以使用酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定。

4.所测样本的值高于标准曲线的上限，应用ACP检测液稀释样品后重新测定。

5.待测样品中酸性磷酸酶活性较低时，可适当延长孵育时间至30min。

使用方法

一、准备样品：

1、 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。

2、 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要可用PBS或生理盐水进行适当匀浆（一般细胞数量在106以上，组织应在100mg以上），低速3000-4000g离心取上清，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。

3、 高活性样品：如果样品中含有较高活性的酸性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，也可以采用试剂C：ACP 检测液稀释。

4、 植物样本：取适量的植物组织加入少量生理盐水或PBS，充分捣碎或研磨，静置30min，用纱布或滤纸过滤，4000g离心20min，取上清并测量体积，-20℃冻存，用于酸性磷酸酯酶的检测。

二、标准品准备：

取适量的试剂A苯酚(10mM)和蒸馏水，按下表稀释成0、0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM、0.5mM。

三、ACP加样

按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。

如果样品中的酸性磷酸酯酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最hao能设置2平行管，求平均值。

分光光度计测定510nm吸光度。

以空白孔调零，读取标准孔和各待测孔的吸光度。

酶标仪检测时上表中试剂等比例调整即可。

一般应在数小时检测完毕。

四、计算

ACP活性单位的定义：

在该实验条件下，每分钟每ml酶液产生1nmol酚(nmol/ml•min)为一个活性单位。

标准曲线绘制：

以各标准管吸光度值为纵坐标，相应的酚含量为横坐标绘制酚含量-吸光度值曲线，即为标准曲线。

计算：

根据测得的各待测样品的吸光度，于标准曲线上查出相应的酚含量，乘以稀释倍数后，换算为”nmol/ml•min”的活性单位。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！