亚硝酸根离子（NO2-）检测试剂盒-绿色荧光

产品概述

亚硝酸根离子（NO2-）检测试剂盒是一种利用亚硝酸根离子（NO2-）特异性绿色荧光探针O57进行亚硝酸根离子检测的试剂盒。 O57可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的亚硝酸根离子（NO2-）氧化，产生绿色荧光产物。根据活细胞中绿色荧光的产生，可以判断细胞亚硝酸根离子（NO2-）含量的多少和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种快速简便的培养活细胞中亚硝酸根离子（NO2-）检测方法。 在激发波长488nm，发射波长526 nm附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测荧光，从而测定细胞内亚硝酸根离子（NO2-）水平。 除了本绿色荧光检测试剂盒外，还可以提供红色荧光的亚硝酸根离子（（NO2-）检测试剂。 可以提供各种颜色的总活性氧检测产品，以及不同颜色的各种类型活性氧、活性氮的特异性检测产品。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度

-20℃ 避光

注意事项

1.避免反复冻融。

2.可以根据需要分装后冻存。

3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

有效期

6个月

检测方法

1.流式细胞仪2.荧光显微镜3.激光共聚焦

适用样本

1.悬浮细胞

2.贴壁细胞

产品特点

1.使用方便：可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；

2.背景低，灵敏度高；

3.线性范围宽，使用方便。

仪器准备

1.激光共聚焦显微镜或荧光分光光度计或酶标仪或流式细胞仪，

2.离心机

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

PBS缓冲液或者HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

4.荧光检测专用黑色96孔板

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。

3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。

4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。

5.O57探针在光照和空气中易被氧化，注意避光密封保存。

6.对不同的细胞，应选择合适的孵育时间，以观察亚硝酸根离子的变化。

7.由于染色工作液稳定性比较差，染色工作液必须现配现用，并且在当天用完。

8.探针对湿度非常敏感，若是探针溶液每次取完需要量后，必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量，分装密封保存。不可使用含水的吸头。

9.试剂A母液请拧紧螺旋盖，避免受潮失效。

使用方法

O57探针标记：

1. O57溶液可在新鲜无血清培养基、HBSS缓冲液、PBS缓冲盐溶液稀释到所需浓度，1000倍稀释，以此染色工作液更换细胞培养基；也可直接向细胞孵育液体中加入O57探针溶液至所需浓度。

2. 依据细胞亚硝酸根离子含量的不同，孵育时间可选择15-60 分钟，在37℃或室温进行避光孵育。

3. 孵育结束后，用新鲜溶液清洗细胞。

4. 用相关仪器进行荧光检测。

荧光显微镜检测：

1. 对贴壁生长细胞或活组织，可直接在荧光显微镜下染色观察；

2. 对悬浮生长细胞，染色后取25-50μl细胞悬液滴到一张显微载玻片上，再盖上一张盖玻片。

3. 荧光显微镜检测。

流式细胞仪分析：

1. 对贴壁生长细胞，用胰酶消化制备成单细胞悬液；对悬浮生长细胞，直接收集细胞。用0.5~1 ml冰冷PBS重悬细胞（5~10万）。

2. 采用488nm波长激发，测定5256nm的发射，亚硝酸根离子强度高的细胞有较强的绿色荧光。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！