过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒（钼酸铵比色法）

产品概述

过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒原理是利用CAT分解过氧化氢H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止，剩余的过氧化氢与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物，在405nm处测定其变化量，可计算出过氧化氢酶CAT的活力。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度

2-8℃避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

分光光度计

适用样本

血清、血浆、组织

仪器准备

1. 分光光度计

2. 恒温水浴锅

3. 涡旋混匀器

4. 离心机

5. 移液器

6. 冰箱

7. 冰盒

试剂准备

纯水

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

1. 测定血清和血浆时，如果样本不溶血，每批样本只需要随机挑选2个样本做空白或者用双蒸水代替样本做空白；如果样本溶血的话，必须每个样本做空白对照。

2. 测定全血时，必须每个样本都设定空白对照；

3. 测定组织匀浆时，如果样本不是高脂，每批样本只需随机挑选2个样本做空白或者用双蒸水代替样本做空白；如果样本高脂的话，必须每个样本做空白对照；

4. 所有实验用水均需使用纯水或双蒸水。

5. 需使用一次性塑料试管，若没有，使用较新的玻璃管并彻底洗刷干净。

6. 试剂D天冷后会凝固，待 37℃水浴变澄清时再使用。

使用方法

一、血清（浆）操作表

1、 操作表：

充分混匀，蒸馏水调零，405nm，0.5cm光径，测各管吸光度值。

2、 CAT活力计算：

血清中CAT活力计算：

（1）单位定义：每毫升血清或血浆中每秒钟分解 1umol 过氧化氢的量为一个活力单位。

（2）计算公式：

血清（浆）CAT活力= （ 空白管OD值—测定管OD值）×271 × 1 x 样本测试前

（U/ml） 60× 取样量（ml） 稀释倍数

【注】：

271为斜率的倒数。

二、全血的检测

1. 1:99溶血液的制备：取50ul全血加双蒸水至5ml充分混匀后静置10min，待测；

2. 操作表：

充分混匀，蒸馏水调零，405nm，0.5cm光径，测各管吸光度值。

3.血红蛋白中CAT活力计算：

（1）单位定义：每毫克血红蛋白每秒钟分解 1umol 过氧化氢的量为一个活力单位。

（2）计算公式：

溶血液中CAT活力= （ 空白管OD值+自身对照管OD值—测定管OD值）× 271× 1 ÷ 血红蛋白含量

（U/mg Hb） 60× 取样量 （mgHb/ml）

【注】：

271为斜率的倒数。

三、组织样本的检测：

1. 组织匀浆液的制备：

准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9加入9倍体积的生理盐水，冰浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500转/分，离心10min；取上清，再用生理盐水稀释至最jia取样浓度，待测；（稀释浓度可摸索5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.125%）

2. 操作表：

充分混匀，蒸馏水调零，405nm，0.5cm光径，测各管吸光度值。

【注】：

一般样本没有高脂等导致显著差异情况，空白管可换成双蒸水，做1~2管空白即可。

如需做样本自身对照，则试剂盒测定样本数量减少至48样。

3. 组织中CAT活力计算：

（1）单位定义：每毫克组织蛋白每秒钟分解 1umol 过氧化氢的量为一个活力单位。

（2）计算公式：

组织匀浆中CAT活力= （ 空白管OD值—测定管OD值）× 271 × 1 ÷ 待测样本蛋白浓度

（U / mgprot） 60×取样量 （mgprot / ml）

【注】：

271为斜率的倒数。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！