组织活性氮（RNS）检测试剂盒-绿色荧光

产品概述

活性氮（reactive nitrogen species，RNS）是指NO与包括活性氧在内的化合物相互作用,生成一系列包括ONOO•及其质子形式过氧亚硝酸(HOONO)等具有高度氧化活性的自由基和硝基类化合物,这些与活性氧相对应的以NO为中心的衍生物称为活性氮。活性氮主要包括氮氧化物一氧化氮（NO）和二氧化氮（NO2）、过氧化亚硝酰阴离子（ONOO•）、亚硝酰氢（HNO）、亚硝酸根离子（NO2-）和氨等。 组织活性氮检测试剂盒是一种利用荧光探针O52进行活性氮检测的试剂盒。 在活性氮存在的条件下，O52探针与活性氮反应生成强荧光物质O52F，O52F发出的绿色荧光强度与组织内活性氮水平成正比，检测O52F的荧光就可以知道组织内活性氮的水平。O52F的荧光最da激发波长是490nm，最da发射波长是516nm。 在激发波长488 nm，发射波长516 nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测O52F 荧光，从而测定组织内活性氮水平。 除了本试剂盒的绿色荧光检测方法，还可以提供红色荧光、紫色荧光的活性氮检测试剂盒产品。 还可以为您提供各种细胞样本、冰冻切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度

-20℃ 避光

注意事项

1.避免反复冻融。

2.可以根据需要分装后冻存。

3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

有效期

6个月

检测方法

荧光分光光度计或荧光酶标仪

适用样本

新鲜组织

产品特点

1.使用方便：可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；

2.背景低，灵敏度高；

3.线性范围宽，使用方便。

仪器准备

1.荧光分光光度计或荧光酶标仪，

2.离心机

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

PBS缓冲液或者HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

4.荧光检测专用黑色96孔板

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.O52染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。

4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。

使用方法

试剂准备：

根据样本数量，用纯水将O52探针10倍稀释，配制成探针工作液。充分混匀，备用。

样本处理：

1. 刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。

2. 准确称取50 mg或100 mg组织样本，加入500 μl-1 ml匀浆缓冲液A，用匀浆机/匀浆器充分匀浆。

样本检测：

1. 在96孔板中加入190微升匀浆上清液、10微升O52探针工作液，用移液器吹打，使之充分混匀。

2. 在37℃避光孵育30分钟。

3. 置于酶标仪中，后于激发波长为488 nm、发射波长530 nm检测荧光强度。

蛋白定量：

1. 另取50微升上清匀浆液，用PBS大约稀释20-30倍。

2. 取100微升进行蛋白定量，测定蛋白浓度（mg/ml）。

结果处理：

以荧光强度（RFU）/蛋白浓度（毫克蛋白）表示组织活性氮强度。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！