7-AAD染色试剂盒

产品概述

7-Aminoactinomycin D，简称7-AAD，是一种核酸染料，与DNA结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI相似，可被488nm氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。 7-AAD是一种非渗透性荧光染料，可以用来检测无活性的细胞。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜，染料一旦进入细胞，它将结合到细胞内DNA分子上，形成具有高荧光性的加成物，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞仪。 7-AAD最大激发波长为546nm，最da发射波长为647nm，可在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。

保存温度

-20℃避光

注意事项

1.染料长期不用-20℃保存。避免反复冻融。

2.染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

4.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

6个月

检测方法

1.流式细胞仪

2.荧光显微镜

适用样本

1.悬浮细胞

2.贴壁细胞

产品应用

1.流式细胞仪

2.荧光显微镜

试剂准备

1.PBS 缓冲液（pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X））

2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

1.染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

2.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。

3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

4.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。

5.染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

6.染色后立即进行分析。

7.7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。

使用方法

1. 染色工作液的配制：

根据样品数用相应的培养基或合适的缓冲液（如HBSS）将7-AAD染色液100倍-200倍稀释，配制成染色工作液。

2. 根据自身样本选择合适的步骤制备细胞样本。7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。

3. 离心收集细胞，用500μl染色工作液重悬细胞。

4. 孵育15-60分钟。

5. 用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。染料-DNA复合物的最da激发波长为545nm，最da发射波长为650nm。可以用488nm波长激发。流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！