线粒体染色试剂盒-绿色荧光
产品概述
M18线粒体染色试剂盒是利用BBcellProbeTM M系列探针进行线粒体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的M18线粒体染色探针为绿色荧光标记的线粒体探针,具有506/530nm的最大激发/发射波长。 M系列探针是对活细胞中的线粒体进行选择性染色的一类荧光染料,该系列探针可以选择性标记线粒体,只需要纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞。M系列探针可自由穿过细胞膜,适用于观察线粒体内部生物合成及相关发病机理。 M系列线粒体探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,还可以提供红色荧光的染色试剂盒。 M18绿色探针会受线粒体膜电位的影响,需要不受线粒体膜电位影响的荧光探针可以选择M16红色荧光探针和M17绿色荧光探针(相关产品BB-41293)的产品。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.染料短期2周内可以2-8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
1.流式细胞仪
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
适用样本
1.悬浮细胞
2.贴壁细胞
产品应用
1.流式细胞仪
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
试剂准备
1.PBS 缓冲液(pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X))
2.或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.M18染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5.染色后立即进行分析。
使用方法
1. 染色工作液配制:
根据样本数量,用染料稀释液将M18荧光染料10倍稀释,再用相应的培养基或者HBSS缓冲液50-250倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30分钟~2小时(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30分钟~2小时(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。
3. 观察结果:
在激光共聚焦显微镜/荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。
最大激发/发射波长为506/530nm。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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