正常细胞、凋亡细胞与坏死细胞检测试剂盒

产品概述

正常细胞/凋亡细胞/坏死细胞检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。染色液A可以透过正常细胞膜，而细胞凋亡后，细胞膜对染色液A的通透性增加，染色液B不能透过细胞膜，对正常细胞和凋亡细胞不能染色，而对坏死细胞可以染色。用两种染色液对细胞进行双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜即可对细胞状态进行检测。在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为：正常细胞为低蓝色/低红色（A+/B+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+），坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++）。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度

-20℃避光

注意事项

1.长期不用可以-20℃保存。

2.染色液避免反复冻融。多次冻融会导致失效。

3.染色液需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20℃保存。

4.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

1年

检测方法

1.流式细胞仪

2.激光共聚焦

3.荧光显微镜

适用样本

1.悬浮细胞

2.贴壁细胞

产品应用

1.流式细胞仪

2.激光共聚焦

3.荧光显微镜

试剂准备

1.PBS 缓冲液（pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X））

2.或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小，重悬细胞是动作要轻柔，避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。

3.染色液是光敏物质，在操作时请注意避光，尽量减少它们暴露在光下的时间。有必要时可以使用带盖子的冰盒或铝箔纸避光。

使用方法

1. 染色缓冲液的配制：

根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。 取100μL试剂C加900μL无菌去离子水稀释，混匀即成染色缓冲液。

2. 收集样本细胞，细胞数量在1X106个左右。

3. 用PBS洗涤细胞两次。

4. 用500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬。

5. 加入5-10ul染色液A。

6. 加入5-10ul染色液B。

7. 轻轻混匀后4℃避光孵育10-30分钟。

8. 用PBS洗涤细胞一次。

9. 用PBS重悬细胞。

10. 用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。染料A-DNA复合物的最da激发波长为350nm，最da发射波长为460nm，染料B-DNA复合物的最da激发和最da发射波长分别为488nm和615nm。

结果分析 ：

正常细胞为低蓝色/低红色（A+/B+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+），坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++）。

形态学：正常细胞核形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒；凋亡细胞的核呈亮蓝色，或核呈分叶状，碎片状。坏死细胞核红色。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！