IPHASE/汇智和源 微核试验检测方法—流式细胞术

微核（micronucleus,简称MCN），也叫卫星核，是真核生物细胞在有丝分裂后期由于染色体片断丧失着丝粒从而游离于细胞质中的一种异常结构，是染色体畸变的一种表现形式。微核是细胞有丝分裂后期染色体有规律地进入子细胞形成细胞核时，仍留在细胞质中的整条染色单体或染色体的无着丝粒断片或环。这些片段或染色体在分裂末期不能进入主核，在子细胞进入下一次分裂间期时，便浓缩成主核之外的小核，即微核。目前有辐射、化学诱变剂等较多理化因素可引起染色体断裂，且均可导致细胞分裂从而产生微核现象。

一、 微核试验的简介

微核试验是一种建立在细胞水平上分析DNA损伤的技术，其目的是以微核作为遗传毒性检测终点，用于检测染色体断裂剂及非整倍体诱导剂，是目前公认的筛选致突变物的主要方法之一，在化合物遗传毒性评价系统中占据着重要的地位。

阴性对照

阳性对照

微核试验可分为体外微核及体内微核试验，体外微核试验常以CHL、V79及CHO-K1细胞作为试验系统，而体内微核试验使用较多的是啮齿类动物的嗜多染红细胞（PCE）或者网织红细胞（RET)。PCE或RET是有丝分裂后期的红细胞由幼年发展为成熟红细胞过程中的一个阶段，此时红细胞的主核已排出，而微核仍保留在细胞质中并十分易于辨认。因此，嗜多染红细胞或网织红细胞是体内微核试验的首选细胞群。

图片来源：小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的形成（Cole et al，1979，1981）

二、 流式体内微核检测

除了人工阅片等常规检测方法外，流式细胞术等自动化检测方法也被用于微核检测。流式细胞术(Flow cytometry)检测方法是20世纪70年代发展起来的定量测定细胞和亚细胞成分的方法。该方法通过流式细胞仪以激光束为光源，将待测样品进行荧光染色，然后在液体载体里将单个细胞通过激光束产生的荧光信号转变为电信号，最终通过仪表显示来达到定量测定的目的。

利用流式细胞术进行体内微核鉴定则是由于与成熟的红细胞相比，未成熟的网织红细胞仍然含有RNA和某些表面蛋白质（比如转铁蛋白受体，也称为CD71），因此可用RNase降解RNA以排除RNA的干扰，且不同抗体可用于区分不同细胞或成分，如CD71抗体可区分网织红细胞和成熟红细胞，CD61抗体可用于排除血小板的干扰，而后可用PI染液对DNA进行染色，从而轻易鉴别出微核。流式体内微核检测流程如下：

三、IPHASE相关产品

流式细胞术微核检测具有检测速度快、结果客观可靠及可满足高通量检测要求等特点，因此，IPHASE作为体外研究生物试剂引领者，凭借先进的设备，专业的技术人员和多年研发的经验，现正在开发小鼠体内微核试验流式检测试剂盒。小鼠染毒处理后，于不同时间点收集外周血，便可用该试剂盒进行流式微核检测。试剂盒提供了用于小鼠外周血流式微核检测的主要试剂，包括抗凝剂、RNase溶液、CD71、CD61荧光抗体、生物标准品及PI染液等，且试剂盒各组成成分均经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性好。

与体内微核检测试验一样，体外微核检测在预测致癌危险性、检测非整倍体诱发剂及其它遗传危害方面也具有重要的地位。IPHASE现已开发出了包括采用人工阅片方法的体外微核试验试剂盒在内的一系列专门用于体外遗传毒性研究的产品，助力广大客户进行体外遗传毒理学研究。

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省去诱导S9制备、试剂配制的时间，大大缩短了实验周期。

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试剂盒各成分均经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性高。

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试剂盒稳定性强、易于运输和保存。

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应用范围广，可用于食品、药品、化妆品、化学品、医疗器械、农药等的遗传毒性研究。

IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品，望广大科研工作者来电咨询，咨询热线400-127-6686。

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