随着医学的不断发展，吸入治疗已被推荐为哮喘、慢性阻塞性肺疾病（COPD）等呼吸道疾病治疗的首选方法，研究与开发新型的吸入性药物是治疗呼吸道疾病和部分全身作用药物的重要方向。吸入型药物具有吸收快、起效快及避免首过代谢的特点，近年来备受关注。然而，吸入性制剂药物通过肺部给药，避免了肝脏首过效应，直接作用于肺部组织，对其进行药物代谢特征研究选用肝细胞及其亚细胞组织并不完全适用，因其在肺部停留时间较长，通常认为应当考察其在肺部的代谢情况。1    肺中的药物代谢酶肺中也含有许多药物代谢酶，包括P450酶、水解酶、结合酶、单胺氧化酶、黄素单加氧酶等，其中肺 P450 酶在对异物的生物转化及吸入的化学致癌物的失活和肺毒素的解毒方面发挥了重要的作用。在肺中表达的 P450 酶包括 CYP1A、CYP2A、CYP2B、CYP2E、CYP2F和 CYP4B等。P450 酶在肺泡晶状体、杯状细胞、纤毛上皮细胞和血管上皮细胞仅有较低含量，但在无纤毛细支气管上皮细胞（clara细胞）和Ⅱ型肺细胞中，P450酶的分布可能是很高的，但是这种细胞在肺中很少，所以肺中 P450 酶的功能相对较弱。但是，黄素单加氧酶的一个亚型 FMO2 在肺中高度表达，但在肝脏中却没有表达，但其生物学意义目前尚不十分清楚。此外，除了上述的 I 相代谢酶外，肺中也存在一些Ⅱ相代谢酶如 UGTs 和 STs。另外，人类肺微粒体中还有一种依赖花生四烯酸的过氧化物酶——前列腺素H合成酶(PHS)，它可以使有些致癌的芳胺类化合物通过过氧化作用而被活化，此酶只在肺中存在。2    药物的肺代谢脏是机体重要的呼吸器官，参与药物的体内循环、局部吸收及代谢。同时，肺脏是气体交换的重要场所，也是一个完善的给药系统和药物作用的靶器官，直接影响吸人型药物在肺部的局部处置以及经全身循环吸收至肺部的药物处置。由于肺中所含的药物代谢酶的含量和活性较低，因此药物在肺中的代谢是有限的，已知只有为数不多的药物如茶碱可以在肺中代谢。肺与肝脏不同，是一种复杂的极不均匀的组织，肺是由 40 种以上不同类型的细胞所组成，在许多类型的细胞中，其代谢酶的活性和含量存在显著的差异。此外，肺还有另一个特点，即血流丰富且灌流速率高、表面积大，有利于药物或化学异物随血流和呼吸气体而扩散，这些解剖和生理学上的特性对药物在肺脏中分布和代谢都有一定的影响。3    IPHASE肺代谢产品及优势IPHASE凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验，开发出了不同种属动物的肺微粒体（Lung Microsomes）、肺S9（Lung S9 Fraction）、肺胞质液/肺细胞浆（Lung Cytosol）、肺匀浆等亚细胞模型产品，助力于药物的肺代谢研究。l  酶活高 酶活可对标或高于同类进口产品l  批量生产 采用批量生产方式，库充充足，可保证同一批次产品的供应l  货期短 国内现货，保障客户使用需求l  售后服务机制健全 有专业技术人员提供全方位服务l  可定制 可提供特定物种、特定模型和特定年龄等非常规样品的定制服务表1  IPHASE肺微粒体产品表2  IPHASE肺S9产品表3  IPHASE肺胞质液产品IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品，望广大科研工作者来电咨询。发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤8分 800元；8分＜IF≤10分 1000元；IF≥10分 2000元；注：礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

转运体在药物研发中的应用—热点问题—第一题    25%是怎么计算的?答：具体详见国家药监局药品审评中心颁布的【药物相互作用研究技术指导原则】胆汁清除率=胆汁排泄速度/血浆药物浓度                =胆汁流量*胆汁药物浓度/血浆药物浓度第二题    ABC囊泡试验AMP组底物摄入比ATP组高？答：出现这种情况需要考虑以下几种可能因素：1、评估在研药物是否高渗透性药物；2、药物与囊泡的孵育时间可能过短，需优化药物与囊泡的孵育时间；3、由于底物与囊泡反应终止后底物有可能从囊泡腔内流回缓冲液，囊泡悬液转移到过滤装置必须迅速，并且必须遵循一致的时间轴。第三题    针对口服多肽（分子量1 K左右)需要考察转运体的作用吗？答：国家药监局药品审评中心颁布的【药物相互作用研究技术指导原则】对口服多肽是否需要考察转运体介导的药物相互作用没有明确要求，建议可进行探索性的研究。第四题    在运用SLC转运体细胞的时候，最高浓度药物的摄取率比次高浓度药物的摄取率突然增加几十倍，是什么原因？答：1、各组间摄取率的比较是基于细胞总蛋白或细胞数量进行摄取率的归一化，因此必须保证每组总蛋白量的测定准确，建议每组裂解完细胞后镜下观察所有细胞是否裂解充分；2、高浓度药物是否存在对细胞的毒性作用，造成大量细胞死亡。3、药物与SLC转运体细胞孵育时间需要进行优化，建议检测不同孵育时间底物吸收情况绘制时间依赖曲线，以确定线性吸收的时间范围。第五题    SLC转运体细胞在药物作用前去掉培养液后，是否需要用反应缓冲液预孵育几分钟？答：建议用不含底物的反应缓冲液37℃预孵育5分钟。第六题    SLC转运体细胞药物作用终止后，用乙腈、甲醇等有机溶剂或反复冻融方法都可以裂解细胞吗？答：高浓度（如80%乙腈）有机溶剂和反复冻融方法都可导致细胞破裂，释放出细胞内蛋白和摄入的底物，但有机溶剂是否影响后续底物的检测，需要根据不同检测方法的要求有不同的考量。发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤8分 800元；8分＜IF≤10分 1000元；IF≥10分 2000元；注：礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

在临床应用中患者经常会同时使用多种药物，这些药物可能会产生药物-药物相互作用（Drug-drug interaction，DDI，简称药物相互作用），有可能导致严重不良反应或改变治疗效果。DDI 评估通常从体外试验开始，确定可能影响药物处置的因素以阐明潜在的 DDI 机制，并获得用于进一步研究的动力学参数，其主要内容包括：确定药物的主要消除途径；评估相关代谢酶和转运体对药物处置的贡献；考察药物对代谢酶和转运体的影响。长期以来，药物代谢酶一直是DDI研究的重点，近年来，随着分子生物学技术的发展，药物转运体研究取得重大进展，转运体在药物研究中的重要性也日益引起关注。1    什么是药物转运体？转运体（Transporter）是指贯穿于各组织细胞膜上介导内源性或外源性物质进出生物膜的跨膜蛋白。药物转运体是以药物为基质，存在于组织或器官的细胞膜表面，担当药物跨膜转运功能的蛋白质总称，主要包括两个超家族：ABC结合盒转运体超家族（ATP binding cassette superfamily，ABC）和溶质转运体超家族（solute carrier family，SLC），主导药物的跨膜转运过程，影响着药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄。ABC家族转运体由跨膜区和ATP结合区域组成，直接利用ATP分解产生的能量来进行物质的膜转运。药物转运与ATP酶活性直接相关，属于原发性主动转运类型。ABC转运蛋白分为七个亚型，即ABCA~G。SLC家族转运体包括65个家族458个转运蛋白，利用细胞内外电化学电位差或离子梯度提供能量跨膜运输底物。与药物转运相关主要包括SLC21基因亚家族、SLC22A基因亚家族、SLC15A基因亚家族和SLC47A基因亚家族。2    转运体研究的重要性转运体在人体全身组织中均有表达，通过影响药物的吸收、分布和消除而影响药物的药代动力学和药效学特征。转运体与代谢酶协同作用可以影响药物的处置和药理作用。药物也可以影响转运体的表达或活性，从而导致内源性（如肌酐、葡萄糖）或外源性物质的处置发生改变。在临床应用中，已发现有多种转运体与药物相互作用有关。介导药物外排的转运体主要包括P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）、 或多药耐药蛋白1（Multi-drug resistance 1 protein，MDR1）、乳腺癌耐药蛋白（Breast cancer resistance protein，BCRP），属于AT P结合盒转运体家族成员，可利用水解ATP的能量对药物及内源性物质进行转运。介导药物进入细胞的转运体可将底物摄取至靶位以发挥药效，属于溶质转运体家族成员，主要包括有机阴离子转运多肽（Organic anion transporting polypeptide， OATPs）、有机阴离子转运体（Organic anion transporter，OATs）、多药及毒性化合物外排转运体（Multidrug and toxin extrusion proteins，MATEs）、有机阳离子转运体（Organic cation transporter，OCTs）等。近年来，随着分子生物学技术的发展，药物转运体的研究取得了重大进展，多种药物已被证明是转运体的底物或抑制剂。如他汀类、青霉素、甲氨蝶呤等属于OATP1B1的底物，而环孢素、沙奎那韦、利福平及某些黄酮类化合物可抑制OATP1B1的转运功能；P-gp的底物多是疏水性阳离子，维拉帕米、环孢素A可竞争P-gp的结合位点，抑制或阻断P-gp的外排功能；BCRP的底物包括普伐他汀及多种植物雌激素，而雌二醇是BCRP的特异性抑制剂。综上所述，转运体可不同程度的影响药物的吸收、分布、排泄及药物相互作用，明确药物的转运机制有利于提高药物的安全性和有效性，指导临床合理用药，转运体的研究势在必行。3    IPHASE转运体相关产品IPHASE凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验，推出了ABC转运体囊泡和SLC转运体细胞产品，助力于药物的转运研究。表1 ABC转运体囊泡表2 SLC转运体细胞IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品，望广大科研工作者来电咨询。发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤8分 800元；8分＜IF≤10分 1000元；IF≥10分 2000元；注：礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

为加强学术交流，促进行业发展，IPHASE/汇智和源将于2022年12月21日召开转运体在药物研发中的应用线上交流会，沟通交流ATP-结合盒 (ABC) 转运体囊泡，SLC转运体细胞等介导药物代谢的原理与使用方法，届时诚挚邀请各位专家、合作伙伴、行业朋友莅临交流，汇智和源期待您的参加！汇智和源将携手专业技术同事与大家交流赶紧搬好小板凳一起get行业干货吧！举    办    时    间2022年12月21日 19:00-20:00联    系    电    话15910545801报    名    方    式关注公众号【IPHASE】获取报名方式发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤8分 800元；8分＜IF≤10分 1000元；IF≥10分 2000元；注：礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

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近日，广东江门中医药职业学院/国家中药现代化工程技术研究中心江门健康产品分中心温宝莹老师，使用IPHASE品牌产品：大鼠肝微粒体、大鼠肝S9、人肝微粒体、人肝S9、人肝胞质液在《药学学报》期刊发表文章《广陈皮黄酮类主成分分析及其代谢转化研究》。发    文    章    得    奖     励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤8分 800元；8分＜IF≤10分 1000元；IF≥10分 2000元；注：礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

众所周知，肝脏是药物代谢的主要器官。但是，随着分子生物学如蛋白质分离纯化技术、免疫抗体标记及cDNA技术的发展和应用，越来越多的药物代谢酶在肝外组织和器官中被发现。再加上药物代谢研究的不断深入，人们逐渐发现有些药物在肝内和肝外都有代谢，而有些药物的部分代谢过程仅在肝外的特定组织进行，如维生素D3的1位羟化仅于肾脏中代谢，更加证实了肝外组织在药物代谢过程中发挥着重要作用。1    药物的肾脏代谢除了维持水和电解质平衡的生理功能以及排泄内源性和外源性物质外，肾脏也是Ⅰ相和Ⅱ相代谢生物转化的重要器官。肾脏中的药物代谢酶主要分布于肾皮质和肾髓质中，尤其是肾皮质中酶的种类更丰富。图1 肾脏的解剖结构示意图（来源：百度图片）肾中的Ⅰ相代谢酶主要有P450 酶、脱氢酶及各种单加氧酶等，但其含量或活性均明显低于肝脏药酶，所以药物在肾脏中的 I 相代谢处于次要地位。肾中的药物代谢酶主要是Ⅱ相代谢酶，如葡萄糖醛酸转移酶硫酸转移酶、谷胱甘肽-S-转移酶、N-乙酰化酶和氨基酸结合酶等，因此Ⅱ相代谢在药物的肾代谢中占据主要的地位。表 1 肾脏中主要代谢酶的分布情况注：“√”代表有该酶分布；“×”代表没有该酶分布。来源：王广基, 刘晓东, 柳晓泉. 药物代谢动力学[M]. 化学工业出版社, 2005.肾脏是机体重要的排泄器官，药物进入机体后，以原形或者代谢物经肾脏排泄。药物在肾脏中的代谢促进了药物靶向性组织分布系统的发展，药物的靶向性组织分布避免了药物的一些副作用。药物在肾中代谢后，可以使其排泄和重吸收发生改变。除了甲基化代谢物外，大多数结合反应会产生极性更强的代谢物而被迅速排出体外。由于肾脏是药物的主要消除器官，肾功能的改变将会直接影响到药物经肾脏的代谢和排泄，对于肾功能障碍的病人，在用药时应格外谨慎，制订相应的给药方案。2    IPHASE肾脏代谢产品及优势IPHASE凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验，开发出了不同种属动物的肾微粒体、肾S9、肾胞质液、肾匀浆等产品，助力于药物的肾脏代谢研究。l 酶活高  酶活可对标或高于同类进口产品l 批量生产  采用批量生产方式，库充充足，可保证同一批次产品的供应l 货期短  国内现货，保障客户使用需求l 售后服务机制健全  有专业技术人员提供全方位服务l 可定制  可提供特定物种、特定模型和特定年龄等非常规样品的定制服务表2  IPHASE肾微粒体产品表3  IPHASE肾S9产品表4  IPHASE肾胞质液产品发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤10分 800元；10分＜IF≤15分 1000元；IF≥15分 2000元；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关     于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

在药物体外代谢研究时，可能用到多种猴（食蟹猴cynomolgus，恒河猴rhesus，狨猴marmoset等）相关产品，猴属于国家二级保护动物，使用猴制品需要办理权限内出售、购买、利用国家重点保护陆生野生动物及其制品审批，国内办理审批在各个省级林业部门办理（上海浦东新区单位在浦东新区林业部门办理，广东省下放到各个市级林业部门办理），IPHASE/汇智和源致力于为创新药企和药物研发机构（CRO）提供高品质的生物试剂，也可以全程帮助客户办理制品审批，批件中会体现使用单位名称，可以作为合规溯源文件，附在实验报告后，各省办理的批件可以互认。一    猴办怔制品目录表组织            产品肝组织   悬浮肝细胞，贴壁肝细胞，肝微粒体，肝S9，肝胞质液，肝组织肠组织   肠微粒体，肠S9，肠胞质液，肠组织肾组织   肾微粒体，肾S9，肾胞质液，肾组织肺组织   肺微粒体，肺S9，肺胞质液，肺组织脑组织   脑组织匀浆，脑脊液，脑组织皮肤组织   皮肤微粒体，皮肤S9，皮肤组织血制品   外周血，血清，血浆，外周血单个核细胞PBMC，外周血免疫细胞脾脏组织   脾脏单个核细胞SMC，脾脏免疫细胞，脾脏组织骨髓           骨髓单个核细胞BMMC，骨髓免疫细胞，骨髓眼部组织   房水，玻璃体液，角膜，虹膜，巩膜等组织唾液           唾液粪便          粪便尿液           尿液其他组织   其他生物学样品二    北京市园林局办理流程http://banshi.beijing.gov.cn/pubtask/task/1/110000000000/77d0e1cf-e842-4630-a18f-62eea09d421c.htmllocationCode=110000000000#apply-main办怔需要您提供：1、营业执照盖章扫描件2、双方合同盖章版3、实验方案和目的盖章版（注意需体现产品用量 实验研究方向）办理时限：资料准备齐全提交后 20 个工作日批件效期：6 个月三    注意事项1、批件有效期 6 个月，批件拿到后发货，实验开展时间晚于拿到批件时间；2、半年内可能购买的猴相关产品（微粒体、S9、胞质液、肝细胞、血清、血浆、组织等）可一次申请，避免重复办怔，多申请一点实际购买少一点不影响后期办怔；3、如果单次购买多个不同产品，使用方案则应该针对不同产品编写；4、批件不同省份互认，只需要从一方办理即可；实验方案和目的模板 项目名称：利用 XXX 产品进行 XXX 研究项目说明：简要介绍实验内容，实验原理实验材料与设备：列出实验用到的材料与设备实验方案：概括写出实验流程，对于申报产品的使用量等。单位名称：XXXXXX日期：XXXX-XX-XX四    IPHASE汇智和源办怔优势：1    快速长期帮全国各大创新药企CRO等单位办理批件，帮助客户审核实验方案和目的，北京市园林局人性化办公，快速拿证。2    全面IPHASE/汇智和源有自己的大小实验动物中心，可为客户提供最全面的猴制品。3    专业公司拥有十几年药物研发服务经验，可为小分子药和大分子药研发机构提供专业的体内体外药物研发服务和产品，ADME系列产品目前已经成为国内最全面的供应商。4    批件效期更长北京申请批件效期6个月，其他省很多只有3个月。5    单次办理多个产品单次申请可以同时办理多个产品审批。发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤10分 800元；10分＜IF≤15分 1000元；IF≥15分 2000元；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关     于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    IPHASE 小课堂—什么是辅助性 T 细胞?辅助性T细胞（Th），其细胞表面特异性表达CD4，又叫CD4+Th细胞，主要功能是为免疫系统的其他细胞提供辅助功能。CD4+Th细胞有不同的亚群，包括有Th1、Th2、Th17和调节性T细胞，每个亚群都由一组特定的细胞因子和转录因子活化，并以它们分泌的细胞因子和发挥的效应功能为特征。CD4+T细胞在识别和清除细胞内病原体（病毒和细菌）方面起着重要作用，并能够促进体液免疫，活化免疫细胞（如B细胞以及细胞毒性T淋巴细胞），调节免疫应答。图 1 辅助 T 细胞的发展史2    如何获取 CD4+T 细胞？那么要如何获取 CD4+T 细胞呢？目前，主要有两种方法可供选择，一是通过流式细胞术获取，另一种是通过免疫磁珠分选。IPHASE 细胞免疫研发部门根据 CD4+T 细胞的特性，研制出人/小鼠的 CD4+T 淋巴细胞分选试剂盒。表 1 IPHASE CD4+T 细胞分选试剂盒产品3    产品原理CD4+T 细胞分选产品是以免疫学、细胞生物学以及磁力学为基础研制，依据抗原抗体特异性结合、纳米级超顺磁性微珠上偶联高度特异性单克隆抗体，对细胞进行特异性分选。IPHASE CD4+T 分选细胞产品原理如下图：图 2 IPHASE 人/小鼠 CD4+T 细胞分选试剂盒原理4    CD4+T 细胞分选试剂盒产品优势（1） 粒径小：分选磁珠为纳米级磁珠，是目前能做到的对细胞影响最小的磁珠；（2） 纯度高：分选后细胞均可达到 90%以上；图 3 IPHASE 人 CD4+T 细胞分选试剂盒分选后纯度（3） 活率高：分选后细胞冻存再复苏后的细胞活率也可达到 90%以上；（4） 效率高：分选后靶细胞得率 90%甚至更高，数据媲美知名进口品牌；（5） 高效：磁分离时间短，5 分钟分出靶细胞；（6） 成功率高：操作简单，步骤详细，小白也可成功分出目的细胞。5    CD4+T 细胞产品此外，基于成熟的免疫细胞分选技术，IPHASE 还为客户提供人以及小鼠的 CD4+T 细胞，CD4+T 细胞产品纯度高，复苏活率高，不携带磁珠，满足各方向研究需求。表 2 人以及小鼠 CD4+T 细胞产品发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，500元礼品；5分＜IF≤8分 800元；8分＜IF≤10分 1000元；IF≥10分 2000元；注：礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

Ames试验建立以来，在全球范围内应用了近五十年，是评价化合物致突变性的一种经典方法。随着人们对Ames试验认同度的不断提高，Ames试验已成为遗传毒理学不可或缺的一个检测项目，广泛应用于食品、药品、化学品、化妆品、农药、医疗器械、消毒产品、环境等多个领域。IPHASE/汇智和源综合多年Ames试剂盒研发和技术服务的经验，将试验过程和试剂盒使用中的常见问题进行了总结，供大家参考。第一题    要开展Ames试验，如何选择溶媒/赋形剂？答：不同剂量浓度样品的制备是开展Ames试验的前提，制备符合试验要求的样品也有一些行业要求需要遵守。第一,溶媒/赋形剂的选择原则是其不与受试物发生反应，对菌株和S9没有毒性，没有诱变性；第二，首选蒸馏水，对于不溶于水的受试物可选择其它溶媒/赋形剂，若受试物对水不稳定，应选用不含水的有机溶剂或赋形剂；第三，若选用有机溶剂作为溶媒，首选DMSO，也可选其它溶媒，若选用的是不常用的溶媒或赋形剂，应有资料说明其理由，且若选用有机溶剂做为溶媒，每平板最高添加量不超过0.1mL。第二题    Ames试验的最高剂量组应如何确定？答：Ames试验最高剂量组的确定取决于受试物对试验菌株的毒性和受试物的溶解度。建议先进行预实验测定受试样品的毒性和溶解度，应根据受试样品对细菌的毒性和在配制的最终混合物种的溶解度确定受试样品的最高剂量组。可将回变菌落数的减少、背景菌苔体积变小或处理后细菌存活率降低等作为细菌毒性的指征。第三题     Ames试验组别如何设置？答：Ames试验通常需要包含未处理对照组（自发对照组）、阳性对照组（标准诱变剂对照组）溶媒对照组和样品剂量组四个组别的试验。需要注意的是，若溶解样品使用的溶媒和标准诱变剂使用的溶媒不一致时，还需加做DMSO的对照，且样品剂量组数量不同领域的要求会存在一定差异，需关注具体参照的标准或导则。第四题    为什么要在有和没有代谢活化系统的情况下试验？答：代谢活化系统是诱导S9和辅因子的混合溶液。诱导S9本身是经药物诱导后的动物肝脏的组分，诱导的目的是让酶活得以放大。加代谢活化系统组评估的是代谢产物的遗传毒性，而不加代谢活化系统组评估的是原药的遗传毒性。对于未知化合物，因不确定是其自身，还是其代谢产物会有遗传毒性，故需在这两种情况下同时进行试验。第五题    Ames试剂盒可以检测几个样品？答：Ames试剂盒可完成一个样品的Ames检测。Ames试剂盒（5菌版/正式试验）规格为250皿/盒，可在有和无代谢活化系统、5个菌株、三个平行的情况下进行对照组（未处理对照组、溶媒对照组、阳性对照组）和样品的5个剂量组的遗传毒性检测；Ames试剂盒（2菌版/预实验）规格为150皿/盒，可在有和无代谢活化系统、2个菌株、三个平行的情况下进行对照组（未处理对照组、溶媒对照组、阳性对照组）和样品的8个剂量组的遗传毒性检测；微量波动Ames试剂盒的规格我96孔*16板，可在有和无代谢活化系统、2个菌株、48孔/处理组的情况下进行对照组（未处理对照组、溶媒对照组、阳性对照组）和样品的5个剂量组的遗传毒性检测。第六题    试剂盒中菌株可不可以传代培养？答：不建议对试剂盒中的菌株进行传代培养。原因主要有以下三点：第一，Ames试剂盒中菌株是以冻存菌液形式提供，可满足Ames试验要求，收到货后无需进行其它处理，可直接用于试验；第二，因Ames试剂盒中菌株均为营养缺陷型菌株，频繁处理可能使得其某些特性丢失；第三，Ames试验对菌株不但有浓度的要求，而且有自发和阳性突变菌落数的要求，国标或指导原则中虽然写的较为简单，但真正要达到其要求却很难。第七题    Ames试剂盒是否可分多次去使用？答：Ames试剂盒试剂盒中菌株和S9复合物不建议反复冻融使用，如需分次多次试验，建议按照菌株分次进行。Ames试剂盒中菌株为营养缺陷型菌株，且以冻存菌液形式提供，反复冻融一方面可能会导致其某些特性丢失，另一方面也会直接导致自发回变数和阳性诱变剂回变数达不到标准或指导原则要求。S9复合物在Ames试验中是作为代谢活化系统，而发生代谢主要是酶的参与，反复冻融会导致酶活降低，可能会导致试验结果的假阴性。第八题    当受试物（如某些抗生素）对细菌有高毒性时是否还需进行Ames试验？有没有其它验证方法？答：当受试物对细菌有高毒性时，仍应进行Ames试验，因为致突变性可能出现在较低的、毒性较小的浓度。为了减少具有潜在遗传毒性的化合物产生假阴性结果的风险，遗传毒性的研究通常需要多个试验的组合。任何一项遗传毒性试验中的阳性结果并不一定能说明化合物对人类真正具有遗传毒性或致癌性的危险。故可以加做其它试验，如基因突变试验、染色体畸变试验。第九题    在实验的过程中，可能会因为化合物的溶解性不好，导致无法区分是菌落还是沉淀，该如何处理？答：常规的要求是平皿中可以有未溶解的化合物，但是沉淀的存在不能影响到菌落计数。若这种情况无法避免，可以培养48h后先进行一次菌落观察和计数，并继续培养至72h，若生长则可判定为菌落，也可挑取菌落接种至培养基培养观察是否生长。第十题    试验过程中加S9组比不加S9组菌落数要高，是否正常？答：这种情况属正常现象，但即使偏高也会在国标或导则的要求范围内。可能是因为肝S9本身有痕量的氨基酸成分，可为会菌提供营养。十一题    受试物浓度低未检出遗传毒性还是本身无遗传毒性？该如何判断？答：一方面，Ames试验的要求是，若试验结果为阴性，需进行验证，即需改变试验条件进行重复试验。另一方面，为了减少假阴性结果的风险，遗传毒性的研究通常需要多个试验的组合，可补做基因突变、染色体畸变、微核等其它试验。十二题    医疗器械：浸提溶剂为什么选择水？按照标准应该选择生理盐水或DMSO。答：关于医疗器械的浸提属于样品前处理的过程，试剂盒中未提供，需自行进行准备。试剂盒适用于多个领域的Ames检测，具体到每个领域，可能会有一定差异。发    文    章    得    奖    励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，200元礼品；5分＜IF≤10分 300元；10分＜IF≤15分 500元；IF≥15分 1000元；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

IPHASE/汇智和源全新升级T淋巴细胞增殖试剂盒，为T淋巴细胞（CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞）体外刺激增殖提供简单、高效、便于操作的方法。从单细胞悬液中免疫分选出的高纯度淋巴细胞亚群在体外经信号分子特异性刺激，即可模拟体内淋巴细胞增殖过程，获得数量足够多的淋巴细胞，供细胞免疫研究领域后期使用。表 1  IPHASE/汇智和源T细胞刺激增殖试剂盒1    产品原理T细胞是淋巴细胞中最主要的两大群体之一，可以识别自己与非己，是机体适应性免疫应答的最主要效应细胞之一，更是体内抗癌的主力军。T细胞在体内发生特异性免疫应答的过程是抗原提呈细胞将抗原加工处理后，与MHC分子形成抗原肽-MHC复合物，提呈给T细胞，活化T细胞，启动机体的抗原特异性免疫应答。图1 T细胞识别抗原T细胞的体外刺激与增殖原理上模拟了其在体内增殖的机制。①   T淋巴细胞刺激的双信号T淋巴细胞体外的刺激需要CD3以及CD28同时存在，单独有CD3存在时，T细胞处于静息状态，只有在CD3以及CD28同时存在时，才能够激活T细胞。②   细胞因子的存在，是T细胞增殖的必备因素。2    产品特点简单易操作：无需包板，即可完成对细胞的刺激。图 2刺激因子刺激3天后，T细胞形成细胞簇分选后纯度高：经分选后的CD3+T细胞纯度高。图 3试剂盒分选后T细胞纯度增殖效率高：高效的刺激方式，更高的细胞得率；图 4 细胞刺激增殖倍数细胞活率高：刺激温和，原料严选，对细胞无毒性，增殖后细胞活率持续在90%以上；图 5细胞增殖过程中活率监测应用范围广：刺激增殖后的细胞可用于肿瘤杀伤、细胞转染以及RNA提取等验证。IPHASE/汇智和源T细胞体外增殖试剂盒为客户提供操作更简单、步骤更清晰的体外淋巴细胞增殖产品，对原材料厂家进行了对比筛选，优化了各个操作细节，为研究学者的前期研究提供成功的保证。3    IPHASE细胞增殖相关产品发    文    章    得    奖   励凡使用本公司产品，在国内及国际刊物上发表论文（论文发表日起一年内），并注明产品属于北京汇智和源/IPHASE所有，即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同，给予不同金额奖品：非SCI论文及IF≤5分，200元礼品；5分＜IF≤10分 300元；10分＜IF≤15分 500元；IF≥15分 1000元；活动多多，礼品丰厚，快来参与吧！关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

为加强国内生物科学研究者的学术交流，促进生物科学的进一步发展，IPHASE/汇智和源将于2022年11月8日召开IPHASE课堂-Ames试剂盒常见问题解答，届时诚挚邀请各位专家、合作伙伴、行业朋友莅临交流，汇智和源期待您的参加！汇智和源将携手专业技术同事与大家交流赶紧搬好小板凳一起get行业干货吧！举    办    时    间：2022年11月8日 19:00-20:00报    名    方    式：关注公众号【IPHASE】扫码进群关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    细胞免疫治疗2012年，美国的急性淋巴细胞白血病患者艾米丽参与了CAR-T的Ⅰ期临床试验，在经历了一系列的治疗危机后，彻底清除了体内的癌细胞。并且直至2021年，艾米丽的体内依旧没有出现癌症复发。全球第一个成功治愈癌症的案例为CAR-T疗法提供了宝贵的经验，艾米丽的成功治愈，使细胞免疫疗法迅速成为全球科学家的研究热点，随后，越来越多的该疗法被批准上市，国内对于细胞免疫疗法的研究也越来越深入。CAR-T细胞疗法的本质是分离外周血中的T细胞，之后通过基因改造，导入能够特异性识别肿瘤抗原的CAR基因，将带有特异性抗原识别结构域及T细胞激活信号的遗传物质转入T细胞，并在体外扩增，使回输的T细胞直接与肿瘤细胞表面的特异性抗原相结合而被激活。无论CAR-T细胞治疗产品如何优化更新，T细胞的体外激活与扩增过程，都是T细胞治疗产业规模化生产的重要、必不可少的环节。对于T淋巴细胞体外刺激增殖方向的研究，IPHASE/汇智和源推出了一系列产品以及完善的细胞增殖方案，为生命科学研究提供国内优质的前端科研产品。2    T细胞刺激增殖试剂IPHASE/汇智和源T细胞体外增殖产品为客户提供操作更简单、步骤更清晰的体外淋巴细胞增殖产品，主要对原材料厂家进行了细致的对比筛选验证，优化了各个操作细节，为研究学者的前期研究提供成功的保证。表 1 IPHASE/汇智和源T细胞刺激增殖试剂3    免疫细胞4    IPHASE免疫细胞产品优势细胞活率高：最大程度保证细胞的原始状态，分离后的新鲜细胞或冻存复苏后的活率均在90%以上。细胞纯度高：分选纯化后的免疫细胞纯度高，所有细胞产品纯度均在90%以上。产品安全性高、无传染源：IPHASE严格把控全血/组织样本来源，确保无传染源，为客户提供更安全、更放心的实验材料。细胞来源清晰、可溯源：具备完全合规的采购流程以及全血生物安全证书，免除客户使用的后顾之忧。5    免疫细胞分选试剂盒此外，IPHASE/汇智和源针对免疫细胞研究还提供高效免疫磁珠分选试剂盒表格 2 IPHASE/汇智和源免疫细胞分选产品6    IPHASE分选试剂盒产品优势纳米级磁珠：粒径小；活率高：分选后细胞活率均在90%以上，媲美进口龙头产品；纯度高：分选后靶细胞纯度可达90%~98%；高效：省时省力，5分钟磁性分离出靶细胞；操作简单：实验小白也能快速得到目的细胞；得率高：分选得率均在90%以上，最大程度富集靶细胞，供后续研究使用。IPHASE致力于提供高品质的生物试剂产品，助力科研之路。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1   血液、全血和人工全血血液是流动在人的血管和心脏中的一种红色不透明的黏稠液体。血液由血浆和血细胞组成，具有运输、调节机体温度、防御、调节渗透压和维持酸碱平衡等功能。全血是将机体内血液采集到采血袋内所形成的混合物，主要包括血细胞和血浆。人工全血，顾名思义，即人造全血，是人为的将血液中的主要成分进行组合而成的混合物，最大限度的反应了全血的特性。2    IPHASE人工全血全血主要由血浆和血细胞组成，内源性物质主要存在于血浆中，在血细胞中含量却相对较少，基于这一特点，IPHASE/汇智和源通过反复离心，洗涤的方法，得到了较为纯净的血细胞，并将血细胞与人工血浆按照一定比例组合，最终形成了较为成熟的人工全血产品，并在多个领域得到了应用。无干扰：制备工艺成熟，有效去除了内源性物质干扰。 高相似度：保留了全血中血细胞组分，组分更接近真实全血。可溯源：可提供质控报告，满足溯源性要求。 可量产：成分清晰，可满足大批量订购需求。可定制：可根据实际需求，定制特定种属人工全血产品。3    人工全血的应用3.1 生物样品分析在创新药物研发过程中，生物基质（如血清、血浆、血液、尿液、唾液等）中药物浓度测定是一个重要的方面，其数据可用于支持新活性物的应用和仿制药及已授权药物的变更申请。但是，当待测物为内源性物质时，如果分析方法不能区分药物部分和相应的内源性部分，则会影响到待测物测定的准确度。此时，若无法获得无干扰的真实生物基质，替代基质（简化基质、人造基质或经净化的基质）即为不错的选择。IPHASE/汇智和源人工全血以全血为基础，不但最大限度的模拟了真实全血的细胞组成，而且还去除了真实全血中内源性物质的干扰，是市面上与全血最接近的替代基质。若需进行全血中内源性物质的检测，IPHASE/汇智和源人工全血将是最优选择。3.2 基质标准物质/质控品的制备标准物质是一种已经确定了具有一个或多个足够均匀的特性值的物质或材料，是分析测量行业中的“标尺”，在校准测量仪器和装置、评价测量分析方法、测量物质或材料特性值、考核分析人员操作技术水平、生产过程质量控制等领域起着不可或缺的作用。质控品是实验室自己制备，供自己内部使用，用于评价分析方法稳定性、考核分析人员操作水平、实验室质量控制等的物质。 然而，如需制备基质标准物质/质控品，合格的基质选择是其关键步骤，尤其是需制备内源性物质干扰较严重的基质标准物质/质控品时，选择高质量的人工基质将会是一个新的思路。制备全血基质标准物资/质控品，IPHASE/汇智和源人工全血即为大家提供了一个很好的解决方案。4    IPHASE替代生物基质产品凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验，IPHASE/汇智和源开发出了多种类型的替代生物基质产品，且可提供特殊替代生物基质的定制服务。IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。此外，IPHASE/汇智和源可提供特殊产品的定制服务，欢迎广大科研工作者来电咨询，咨询热线400-127-6686。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

为加强国内生物科学研究者的学术交流，促进生物科学的进一步发展，IPHASE/汇智和源将于2022年11月8日召开IPHASE课堂-Ames试剂盒常见问题解答，届时诚挚邀请各位专家、合作伙伴、行业朋友莅临交流，汇智和源期待您的参加！汇智和源将携手专业技术同事与大家交流赶紧搬好小板凳一起get行业干货吧！举    办    时    间：2022年11月8日 19:00-20:00报    名   方    式：关注公众号【IPHASE】扫码进群关    于     我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    羊驼的研究价值羊驼（Vicugna）为偶蹄目、骆驼科的动物。羊驼性情温顺，伶俐而通人性，除野生种外，还有相当数量的驯良种。世界上现有约300万只。1993年比利时布鲁赛尔自由大学免疫学家Hamers-Casterman教授等人研究证实在骆驼（骆驼科，包括单峰骆驼和羊驼）的血清中存在一种与传统抗体结构不同的新型抗体，即仅有两条重链组成的特殊抗体--重链抗体，可通过重链上的一个可变区识别抗原，这个可变区可以单独稳定的在体外存在，且具有完整的抗原识别能力，其分子量只有15kD左右，是传统抗体分子量的1/10，被称为驼类单域抗体或纳米抗体。驼类单域抗体的优点有分子小、稳定性高、免疫原性低、易于人源化、易于连接以及多种给药途径等，这一系列优势在新药研发方面具有极大的潜力，受到研究学者的广泛关注。以上种种羊驼/骆驼的特征都暗示着，该物种作为一种疾病研究模型的重大应用价值。2    羊驼/骆驼PBMC产品介绍IPHASE/汇智和源为满足国内外市场关于骆驼种属的研究，基于企业自身产品研发基础以及专业的研发人员，开发出高质量的羊驼/骆驼外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC）提取、纯化的方法。该方法的原理主要是根据骆驼属单个核细胞的体积、形态和比重与外周血内其它细胞不同。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。IPHASE/汇智和源成熟的动物PBMC分离技术，保证细胞分离过程中不受损害、不被刺激，后期的纯化技术保证骆驼单个核细胞的纯度以及活率等技术指标，适用于后期的细胞培养、抗体制备等其他研究。3    羊驼/骆驼PBMC产品优势l细胞活率高IPHASE科研人员严谨的态度以及深厚的产品研发经验是骆驼PBMC产品质量的保障，实验所使用的分离试剂无菌、低内毒素，对细胞无伤害刺激，操作人员具备多年PBMC细胞分离经验，最大程度保证细胞的原始状态，分离后的新鲜细胞或冻存复苏后的活率可达90%以上。l 细胞纯度高IPHASE独有的细胞纯化技术，能够很大程度去除其他成分，保障羊驼/骆驼PBMC细胞的高纯度，降低其他成分对实验的干扰。l 产品安全性高、无传染源IPHASE严格把控羊驼/骆驼全血来源，保证实验骆驼均经过相关传染源检测，为客户提供更安全、更放心的实验材料。l 细胞来源清晰、可溯源IPHASE/汇智和源分离羊驼/骆驼使用的全血均由正规动物中心提供采集，具备完全合规的采购流程以及全血生物安全证书，免除客户使用的后顾之忧。4    PBMC产品库外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC）一直是免疫学以及临床医学等领域研究的重要样本类型，国内外研究学者会对其进行很多实验验证，如免疫细胞分选以及细胞培养等。IPHASE/汇智和源通过对不同种属动物的外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC）进行系统而详细的研究，形成了稳定而强大的PBMC产品库，主要有人、猴、大鼠、小鼠、犬、兔、猪等种属。5    PBMC产品库部分产品展示此外，IPHASE/汇智和源PBMC产品库，不仅可提供新鲜以及冻存两种形式的细胞，还可根据客户需求提供大规格产品，满足客户使用需求。IPHASE/汇智和源高质量新产品羊驼/骆驼PBMC完美解决了科研人员的使用需求，详细技术咨询：400-127-6686，或登录IPHASE官网https://www.iphasebio.com进行查询。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

近日，中国药科大学张彩，使用IPHASE品牌产品Ⅰ相代谢稳定性试剂盒-ICR/CD-1 小鼠肝微粒体、CYP450酶代谢表型研究试剂盒-CYP1A2、CYP450酶代谢表型研究试剂盒-CYP3A4、CYP450酶代谢表型研究试剂盒（重组酶法/7种酶）在《Phytotherapy Research》期刊发表文章《Transcriptomics and metabolomics reveal the role of CYP1A2 in psoralen/isopsoralen-induced metabolic activation and hepatotoxicity》。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

近日，海军军医大学肖思佳，使用IPHASE品牌产品CYP450酶代谢表型研究试剂盒（重组酶法/7种酶）在《Metabolites》期刊发表文章《Comprehensive Metabolic Profiling of Euphorbiasteroid in Rats by Integrating UPLC-Q/TOF-MS and NMR as Well as Microbial Biotransformation》。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

“小眼睛，大世界”，眼是人类感官中最重要的器官，是采集信息的最重要的窗口。眼睛虽小，细分的疾病却很多，有些眼科疾病可能会造成失明。我国是眼科疾病的高发区，常见眼疾包括屈光不正（如近视、远视、老花眼及散光）、结膜炎、干眼症、白内障、睑缘炎、视网膜疾病、斜视、弱视、青光眼及葡萄膜炎等。其中，白内障是致盲的首要病因，在60岁以上的人群中发病率高达80%~90%；非致盲类疾病中屈光不正正逐渐成为社会日益关注的焦点问题，20岁以下人群近视率接近70%，且还在进一步增加。随着国民健康意识的提升，除了“看得见”，“看的清、看的舒服”已成为刚需，越来越多的新创企业和生物公司也加入到了眼科药的研发行列，眼科药物开发正面临前所未有的机遇。但是，眼是一个十分复杂的器官，有着特殊的生理结构和屏障系统，外源药物很难进入眼内靶组织发挥药效，这给眼科药物开发带来了挑战。1    眼的结构眼由眼球壁和内容物构成。眼球壁由三层组织构成，外层为纤维膜（包括眼前部透明的角膜、后部白色的巩膜及中间起连接作用的角膜缘），中层为葡萄膜（由虹膜、睫状体和脉络膜组成），内层为视网膜。眼内容物包括房水、晶状体和玻璃体，与角膜了一起构成眼的屈光系统。其中晶状体是眼内重要的透明实体组织，它位于虹膜后、玻璃体前，被晶状体悬韧带固定于睫状体之前。晶状体之前的眼结构称为眼前段，约占眼球的1/3，由角膜、结膜、虹膜、睫状体、晶状体和房水组成；晶状体之后的眼结构为眼后段，约占眼的2/3，由巩膜、脉络膜、视网膜及充满玻璃体液的玻璃体组成。图1 眼的解剖结构（来源：百度图片）眼还具有特殊的屏障系统，可选择性的控制内、外源性物质的通透性，具有维持眼内环境平衡的作用。眼屏障系统分为静态屏障和动态屏障。静态屏障包括：角膜屏障、血-房水屏障（BAB）、血-视网膜屏障（BRB），一般将BAB和BRB统称为血-眼屏障。动态屏障包括结膜和脉络膜的血液/淋巴液循环，泪液、房水的引流和周转等，这是局部外用药物眼内生物利用度低的重要原因之一。此外，眼组织毛细血管内皮细胞表达的外排转运体，如P-糖蛋白、多耐药蛋白、乳腺癌耐药蛋白等，对药物吸收也是一种重要屏障。2    试验动物选择新药开发过程中一般都要开展人体药代动力学研究，但对于眼科药物，连续从人体眼组织采集样品进行生物分析，既不符合伦理也不可行，常采用动物眼组织分布研究来外推或替代人眼药代动力学研究。兔、猴和人具有相似的眼解剖结构，是眼药代动力学研究最常采用的动物。由于兔易获得、成本低，小分子药物常采用兔开展药代动力学研究；大分子药物受免疫原性及严重炎症反应影响，常采用猴开展药代动力学研究。由于动物和人存在种属差异，任何动物模型都不可能完全模拟药物在人体内的作用，建议采用多种模型组合验证药物的疗效。眼部用药药效学试验关键是选择合适的动物模型和药效学指标，证明药物在靶组织中达到有效的治疗浓度。动物模型应关注与人体的相关性和局限性，包括：（1）动物眼部解剖和生理结构与人的相似性和差异性；（2）与人疾病的病理生理学的相似性和差异性，包括发病机制、疾病进程和临床表现等方面；（3）药物与人和动物靶点结合和占位的差异；（4）药物在动物和人体药代动力学方面的差异，如蛋白结合率、黑色素结合率差异等。选择的药效学指标应能够较好的测定及预测药物的疗效，尽量涵盖一些临床试验不能监测的指标，如病理学指标等。表1 眼科给药选择实验动物的优缺点比较来源：孙云霞, 李和平, 廖琴. 眼部给药的非临床安全性评价实践与挑战[J]. 中南药学, 2018, 16(10):6.3    IPHASE产品IPHASE根据眼科药物研发的需求，筛选出了符合试验要求的各种空白基质，为试验的顺利进行提供了保障。l  种类齐全，有完善的供应商体系，可覆盖各种动物种属l  有实验动物中心，具备大小动物实验动物使用许可证，SPF级屏障环境及普通环境l  有经验丰富的实验动物专家，可定制化采集客户所需空白基质l  完善的质量控制系统，产品质量稳定，产量充足，溯源性好关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    自然杀伤（NK）细胞优势近年来，人类 NK 细胞因其在生物学基础研究的重要研究进展和肿瘤治疗临床应用中的的巨大潜力而备受科学界和产业界的广泛关注。 NK细胞主要来源于骨髓造血干细胞中的CD34+淋巴细胞，约占外周血淋巴细胞总数的10%~20%。NK细胞虽然来源于淋巴细胞，但是与T/B淋巴细胞不同，NK细胞属于固有免疫，不依赖MHC分子即可发挥杀伤肿瘤细胞的功能，能够杀灭发生免疫逃逸的肿瘤细胞。NK细胞杀伤靶细胞的三种机制如下：目前对于NK细胞的研究表明，在细胞治疗的应用中与T细胞相比，NK细胞具有更多优势：（1）NK细胞的抗肿瘤谱更广；（2）NK细胞在体内存活时间短，副作用发生率低；（3）NK细胞治疗不会产生移植物抗宿主病，安全性高；（4）NK细胞获取来源更广泛，可获取数量庞大。2    IPHASE高质量NK细胞分选试剂盒基于NK细胞在细胞治疗领域的种种优势，IPHASE研发了富集高纯度NK细胞的免疫磁珠分选试剂盒。该试剂盒以免疫学、细胞生物学以及磁力学为基础，经过原料筛选、反应体系以及反应条件优化等研究过程，最终形成能够分选出高纯度、高得率的分选试剂盒产品。IPHASE 自然是杀伤（NK）细胞分选试剂盒原理IPHASE分选后NK细胞纯度与国外某知名品牌对比，纯度一致，具体数据如下图。3    IPHASE自然杀伤(NK)细胞分选试剂盒优势（1）分选后NK细胞纯度高，可达95%以上；（2）分选NK细胞得率高，可达90%以上；（3）分选得到的NK细胞活率高，冻存前后细胞活率均在95%左右，满足NK细胞的后续研究需求。IPHASE的NK细胞分选试剂盒以及相关产品收到了诸多研究学者以及业内人士的好评，是国内生命科学领域研究的佼佼者，致力于提供高品质的生物试剂产品，助力科研之路。4    IPHASE 自然杀伤（NK）细胞分选相关产品:关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

血浆是血液的重要组成部分，其主要成分是水、血浆蛋白、葡萄糖、激素、矿物离子以及多种水解酶等。在新药研发过程中，血浆除了可作为空白基质，考察分析方法的准确性和可靠性外，更重要的作用是作为试验系统，研究化合物在血浆中的稳定性和药物与血浆蛋白的结合情况，为成药性研究提供数据支持。1    血浆在ADME研究中的应用1.1血浆在蛋白结合研究中的应用药物蛋白结合率的测定是新药开发过程中的一项重要工作，药物的血浆蛋白结合程度不但会影响到药物的处置特征，而且还和药物的药理作用息息相关。普遍认为，只有游离药物才能被组织摄取、被清除器官消除，并且能结合到药理作用靶点或是组织蛋白来控制其药理作用的发生，而结合的药物需先从药物-蛋白结合物中解离才能进入上述过程。血浆中与药物结合的蛋白主要有白蛋白（Albumin，65KDa）、脂蛋白（Lipoprotein，200~3400 KDa）、a1-酸性糖蛋白（Alpha acid glucoprotein，44KDa）。血浆蛋白不但可维持血液渗透压平衡，而且还可通过特异性/非特异性结合的方式转运外源或内源性的物质。白蛋白是血浆中含量最高的蛋白，是主要的药物结合蛋白。通常，白蛋白对酸性药物具有更高的亲和力。血浆中a1-酸性糖蛋白的含量小于0.1g/L，碱性药物更倾向于与a1-酸性糖蛋白结合。脂蛋白的主要生理作用是合成及转运内源性脂肪酸，如甘油三酯、磷脂和胆固醇等，但也发现其在极端亲脂性和/或碱性药物的蛋白结合中发挥着重要作用。此外，各种特异性的蛋白也参与了血浆中某些内源性化合物（包括激素）的蛋白结合和转运。1.2 血浆在稳定性研究中的应用在血浆中存在着多种水解酶，如胆碱酯酶、醛缩酶、脂肪酶、脱氢肽酶、碱性和酸性磷酸酶等，倘若待研究的化合物对这些酶中的一种具有亲和力，并且在合适的位置上具有可被水解的基团，那么该化合物在血浆中就能被分解，从而影响生物测试结论的准确性或者使其在体内达不到有效的治疗浓度，故评价药物的血浆稳定性至关重要。 一些含有特定官能团的化合物在血液中易分解，这些官能团主要有酯基、酰胺、内酯、氨基甲酸酯、内酰胺、磺酰胺以及肽类结构等。而不稳定的化合物常常具有较高的清除率和较短的半衰期，从而导致体内药动学和药效学性质不佳。如果在新药研发过程中只关注化合物的肝代谢稳定性而忽视其血浆稳定性，就可能无法有效地解决化合物的体内稳定性问题。2    影响血浆特性的主要因素高质量的血浆供应是确保试验结果稳定、可靠的前提，血浆的特性是影响ADME研究的主要因素。① 动物种属差异。不同种属动物的血浆存在较大差异。② 性别差异。同一种属雌雄动物血浆中的蛋白浓度存在差异。③ 年龄差异。血浆容量及其组成随年龄而改变，不同年龄的动物其血浆容量和蛋白含量可能会存在差异，故年龄是影响血浆特性的一个重要生理因素。④健康状态。动物的健康状态会严重影响到血浆中蛋白的含量，如机体某些组织发生病变，可能会导致血浆中某些蛋白含量的下降。3    IPHASE产品优势IPHASE/汇智和源根据血浆蛋白结合试验和血浆稳定性试验的特点，筛选出了符合试验要求的专属血浆，为试验的顺利进行提供了保障。l 多种属本公司可提供猴、犬、大鼠、小鼠等种属不同抗凝剂的血浆，满足客户需求。l 特定采血方式本公司提供的血浆均通过心脏采集的血液分离而来，更适用于血浆蛋白结合试验。l 安全性采集血浆的动物均经过传染源的检测，使用更安全、放心。l 溯源性本公司血浆产品均可提供溯源性证明，为客户免除了后顾之忧。l 质控数据齐全本公司使用阳性药来评估血浆质量，保证了试验结果的准确性和稳定性。表1 华法林在不同种属血浆中的蛋白结合率表2 阳性药在血浆质量评估中的使用l 可定制除常规种属血浆外，本公司还可根据客户需求，提供特殊种属血浆的定制服务。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态，并保持细胞特性。通过冷冻方式保存细胞，可以在需要时进行复苏及继续培养。最佳的冷冻条件是尽可能地降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤。除了我们知道的 缓慢冷冻，液氮低温保存，快速复苏外，冻存液的选择也非常重要。1    产品简介汇智和源无血清细胞冻存液，优化了其配方组分，能够更大程度的减少细胞在冻存、复苏时的损伤。本品不含血清，降低了DMSO的含量，属于即用型细胞冻存液，无需配制，直接在细胞中加入适量的冻存液即可。对于PBMC细胞、干细胞或T淋巴细胞等细胞具有较好的保护能力，让你轻松拥有高活率的细胞。2    产品优势成分：不含血清，降低了DMSO含量高效：长期冻存后复苏的细胞，仍然可以达到满意的复苏率方便：即用型，无需额外配制安全：无微生物污染风险，批次稳定3     冻存流程1、冻存管、梯度冻存盒放进4℃冰箱提前预冷；2、将要进行冻存的PBMC细胞、干细胞或T淋巴细胞等细胞， 350g 离心 7 分钟，弃去上清并收集细胞。3、加入汇智和源无血清细胞冻存液，吸管轻轻吹打，重悬细胞。计数并调整细胞浓度；4、将细胞悬液分装于无菌冻存管中，每管加1mL细胞悬液，旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；5、冻存：细胞放入梯度冻存盒，先在-20℃放1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜，再转入液氮罐。4    细胞冻存的注意事项1、缓慢冷冻，细胞逐步脱水，不会因产生大的冰晶而受到损害2、细胞在-20C冰箱内放置时间不可超过1小时，以防止冰晶过大而破坏细胞。3、保存在-80°C冰箱中的时间不要超过24h，放入液氮中保存；4、冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成支原体污染；5、定期检查液氮储备，保证细胞全部浸在液面下。5    相关产品关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

目前，体外模拟T细胞活化的双信号作用，联合使用CD3和CD28抗体刺激T细胞，是进行T细胞激活和扩增最广泛的方法。针对T细胞激活与扩增，汇智和源研发团队研制以免疫学为基础以及纳米磁珠技术为核心，研制出能够高效刺激T淋巴细胞增值的免疫磁珠产品。图1：IPHASE CD3/CD28 beads 刺激淋巴细胞原理IPHASE CD3/CD28 beads分离刺激人淋巴细胞流程图2：IPHASE CD3/CD28 beads 分选刺激淋巴细胞扩增流程IPHASE CD3/CD28 beads刺激T淋巴细胞增值培养3天后，开始形成细胞簇。IPHASE CD3/CD28 beads分离刺激人淋巴细胞增值率：注：横坐标为刺激培养天数由对比图可以看出，IPHASE CD3/CD28 beads 刺激培养T淋巴细胞扩增与国内某其他厂家产品相比，T淋巴细胞增值率明显高于其他厂家产品。T细胞刺激增值其他IPHASE相关产品关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

原代肝细胞二维（2D）培养具有操作简单、费用低等优点，是目前体外药物代谢和毒性评估广泛使用的细胞模型。由于2D培养不能模拟体内微环境和细胞生长状态，2D细胞模型在组织结构、基因表达以及生物学特性等方面与体内细胞相去甚远。三维（3D）细胞培养可提供与体内相似的支架系统，创建与体内类似的生长环境，具有与来源组织十分接近的结构特征和功能特性。肝细胞3D培养模型必将在未来药物代谢、毒性评估以及疾病细胞模型中逐步取代2D肝细胞模型。1    3D培养简介1.1  3D细胞培养定义3D细胞培养是指将具有三维结构的材料与细胞在体外共同培养,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长，构成三维的细胞载体复合物。3D培养类似于细胞在体内的生长方式，既能保留体内细胞微环境的物质及结构基础，又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。1.2  3D细胞培养优势 体外模拟复杂的组织结构，接近体内细胞生长环境，实现真实的细胞生 物学功能。准确建立靶组织模型，有效预测病程和药物反应。少量细胞可实现快速生长，兼容自动化仪器，降低成本。1.3  3D细胞培养方式无支架培养：悬滴培养，磁悬浮培养，超低粘附培养面培养等。支架培养：天然支架，合成支架。2    原代肝细胞3D培养模型2.1 肝细胞球聚体培养模型肝细胞球聚体培养是通过无支架3D培养方式，接种培养的肝细胞可形成直径达100-200µm球状聚集体。肝细胞球聚体与机体肝组织在结构和功能上十分相似，都是由胶原、弹性蛋白、蛋白多糖和糖蛋白所构建的立体网络结构支持和调节，球聚体内部可出现类胆管结构，用核磁共振光谱扫描肝细胞球聚体，球聚体代谢产物谱与体内肝脏最相似，而与2D培养的肝细胞差异很大。此外，肝细胞存活时间和肝特异性功能（如细胞色素P450活性和白蛋白合成等）维持时间都比2D培养的肝细胞显著延长。最近一项研究表明人原代肝细胞经球聚体培养后存活时间超过5周，且CYP酶活性几乎没有变化。肝细胞球聚体在蛋白质组水平上与在体肝脏非常相似，负责药物吸收、分布、代谢和排泄的酶能持续表达14天以上。2D培养的肝细胞最多存活7-10天左右，而肝细胞球聚体超长的存活时间非常适用于药物的肝毒性评估。最近报道了一种由肝细胞和非实质细胞组成的球聚体反复暴露于化学物质28天后，显示其对肝毒性的敏感性增加，这些结果表明重复暴露对检测肝毒性的重要性。2.2 肝细胞三明治培养模型在体外通过在两层胶原或Matrigel内培养肝细胞可以重构体内结构，称为三明治培养。三明治培养的肝细胞能广泛形成胆汁毛细管网状结构，而且可以长时间保持肝脏特异性功能，同时具转运胆汁酸和维持钠离子-牛胆酸共同转运多肽的功能。三明治培养的肝细胞代谢酶活力可维持2周左右，且无代谢退化现象。在2D培养的大鼠肝细胞中，细胞色素CYP3A仅在d1表达，而在三明治培养的肝细胞中却可表达2周左右，且表达量随着培养时间的延长而显著增加。肝细胞三明治培养的另一个主要特点是能激活需经过代谢才具遗传毒性的化合物，且该活性能维持2周左右，而2D培养的肝细胞在最初接种培养几个小时后丧失这种能力。虽然无细胞体系（如肝S9）能代谢化合物成遗传毒形式，但在代谢过程中扰乱了化合物的激活/去毒平衡，因此与完整细胞体系的代谢产物谱差异很大。三明治培养的肝细胞比肝S9表现出更真实的遗传毒效应。3    IPHASE原代肝细胞产品IPHASE/汇智和源凭借多年的技术能力和技术经验的积累，现已形成猴、犬、大鼠、小鼠等原代肝细胞产品，并且在已有原代肝细胞产品的基础上，聚焦研发肝细胞球聚体和三明治培养肝细胞等3D细胞模型，为广大客户提供更为合适的体外药物评价细胞模型。4    IPHASE原代肝细胞优势l  安全性IPHASE/汇智和源分离原代肝细胞所用动物均经过传染源检测，使用安全、更放心。l  纯度高IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞经分离纯化后纯度高，状态好。l  活性好IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞，复苏存活率可达90%以上，所有种属原代肝细胞均经过体外代谢质控，代谢活性强。5    相关产品关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

原代肝细胞二维（2D）培养具有操作简单、费用低等优点，是目前体外药物代谢和毒性评估广泛使用的细胞模型。由于2D培养不能模拟体内微环境和细胞生长状态，2D细胞模型在组织结构、基因表达以及生物学特性等方面与体内细胞相去甚远。三维（3D）细胞培养可提供与体内相似的支架系统，创建与体内类似的生长环境，具有与来源组织十分接近的结构特征和功能特性。肝细胞3D培养模型必将在未来药物代谢、毒性评估以及疾病细胞模型中逐步取代2D肝细胞模型。1    3D培养简介1.1  3D细胞培养定义3D细胞培养是指将具有三维结构的材料与细胞在体外共同培养,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长，构成三维的细胞载体复合物。3D培养类似于细胞在体内的生长方式，既能保留体内细胞微环境的物质及结构基础，又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。1.2  3D细胞培养优势 体外模拟复杂的组织结构，接近体内细胞生长环境，实现真实的细胞生 物学功能。准确建立靶组织模型，有效预测病程和药物反应。少量细胞可实现快速生长，兼容自动化仪器，降低成本。1.3  3D细胞培养方式无支架培养：悬滴培养，磁悬浮培养，超低粘附培养面培养等。支架培养：天然支架，合成支架。2    原代肝细胞3D培养模型2.1 肝细胞球聚体培养模型肝细胞球聚体培养是通过无支架3D培养方式，接种培养的肝细胞可形成直径达100-200µm球状聚集体。肝细胞球聚体与机体肝组织在结构和功能上十分相似，都是由胶原、弹性蛋白、蛋白多糖和糖蛋白所构建的立体网络结构支持和调节，球聚体内部可出现类胆管结构，用核磁共振光谱扫描肝细胞球聚体，球聚体代谢产物谱与体内肝脏最相似，而与2D培养的肝细胞差异很大。此外，肝细胞存活时间和肝特异性功能（如细胞色素P450活性和白蛋白合成等）维持时间都比2D培养的肝细胞显著延长。最近一项研究表明人原代肝细胞经球聚体培养后存活时间超过5周，且CYP酶活性几乎没有变化。肝细胞球聚体在蛋白质组水平上与在体肝脏非常相似，负责药物吸收、分布、代谢和排泄的酶能持续表达14天以上。2D培养的肝细胞最多存活7-10天左右，而肝细胞球聚体超长的存活时间非常适用于药物的肝毒性评估。最近报道了一种由肝细胞和非实质细胞组成的球聚体反复暴露于化学物质28天后，显示其对肝毒性的敏感性增加，这些结果表明重复暴露对检测肝毒性的重要性。2.2 肝细胞三明治培养模型在体外通过在两层胶原或Matrigel内培养肝细胞可以重构体内结构，称为三明治培养。三明治培养的肝细胞能广泛形成胆汁毛细管网状结构，而且可以长时间保持肝脏特异性功能，同时具转运胆汁酸和维持钠离子-牛胆酸共同转运多肽的功能。三明治培养的肝细胞代谢酶活力可维持2周左右，且无代谢退化现象。在2D培养的大鼠肝细胞中，细胞色素CYP3A仅在d1表达，而在三明治培养的肝细胞中却可表达2周左右，且表达量随着培养时间的延长而显著增加。肝细胞三明治培养的另一个主要特点是能激活需经过代谢才具遗传毒性的化合物，且该活性能维持2周左右，而2D培养的肝细胞在最初接种培养几个小时后丧失这种能力。虽然无细胞体系（如肝S9）能代谢化合物成遗传毒形式，但在代谢过程中扰乱了化合物的激活/去毒平衡，因此与完整细胞体系的代谢产物谱差异很大。三明治培养的肝细胞比肝S9表现出更真实的遗传毒效应。3    IPHASE原代肝细胞产品IPHASE/汇智和源凭借多年的技术能力和技术经验的积累，现已形成猴、犬、大鼠、小鼠等原代肝细胞产品，并且在已有原代肝细胞产品的基础上，聚焦研发肝细胞球聚体和三明治培养肝细胞等3D细胞模型，为广大客户提供更为合适的体外药物评价细胞模型。4    IPHASE原代肝细胞优势l  安全性IPHASE/汇智和源分离原代肝细胞所用动物均经过传染源检测，使用安全、更放心。l  纯度高IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞经分离纯化后纯度高，状态好。l  活性好IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞，复苏存活率可达90%以上，所有种属原代肝细胞均经过体外代谢质控，代谢活性强。5    相关产品关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    微量波动Ames试验在药物发现与早期筛选阶段，微量波动Ames试验（Ames Fluctuation Test）可以在化合物用量较少的情况下，有效筛选排除具有遗传毒性的化合物。汇智和源针对微量波动Ames试验，开发出一套包含整个实验主要试剂的试剂盒——微量波动Ames试验试剂盒，试剂盒以微型96孔板形式进行细菌突变测试，适用于早期药物遗传毒性评估，可在测试化合物有限的情况下进行预筛选。2    IPHAES微量波动Ames试剂盒的优势自己配试剂：菌株稳定性差！试剂多！计数烦！费时间！易污染！等货期！微量波动Ames试验（Mini-Ames）试剂盒：全套试剂！活化菌株！定量配置！稳定准确！拿来即用！IPHAES微量波动Ames试剂盒：一次试验不用两周不用一周三天搞定3    IPHAES微量波动Ames试剂盒组分① 菌株 TA98，TA100② S9③ 阳性药等l  产品优势① 便捷性：省去诱导S9制备、菌株培养和鉴定、试剂配制时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期。② 准确性：试剂盒各成分均经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性高。③ 高效性：利用显色原理判断受试物的致突变性，大大减少计数工作。④ 稳定性：试剂盒稳定性强、易于运输和保存。⑤ 应用广：可用于食品、药品、化妆品、化学品、保健品、农药等的遗传毒性研究l  适用范围① 药物遗传毒性早期筛选② 化学品，农药，兽药等遗传毒性早期筛选③ 化合物开发的早期阶段或在测试材料供应有限或用于培训目的时进行预筛选4    相关产品参   考    资   料：[1]OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No.471,Adopted:21,July 1997).[2]Green M.H.L.,Muriel W.J.,Bridges B.A.. Use of a simplified fluctuation test to detect low levels of mutagens[J]. Green M.H.L.;Muriel W.J.;Bridges B.A.,1976,38(1).[3]Gatehouse D. Detection of mutagenic derivatives of cyclophosphamide and a variety of other mutagens in a "microtitre" fluctuation test, without microsomal activation.[J]. Mutation research,1978,53(3).关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    微量波动Ames试验简介1.1 Ames试验发展历程细菌回复突变试验（Bacterial Reverse Mutation Test) ，亦称Ames试验，于1975年由美国加利福尼亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室建立并不断发展完善，至今已成为世界范围内基因毒性测试中应用最为广泛的一种方法，通常是体外毒理学测试的第一步，广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。近几年，将M.H.L. Green等人创建的大肠杆菌回复突变试验引入其中，形成现在较为成熟的细菌回复突变试验（包括鼠伤寒沙门氏菌细菌回复突变试验和大肠杆菌细菌回复突变试验）。1976年Green等通过改良建立了Ames波动试验（Ames Fluctuation Test），它用液体培养基代替固体培养基，以观察培养管的浊度或pH指示剂的颜色变化代替菌落计数，其敏感性高于Ames试验。微量波动Ames试验试验（Micro-titre Fluctuation Ames Test）试验是在Ames波动试验的基础上发展而来的，由Gatehouse于1978年改良并不断推广，用96孔培养板进行试验，以观察pH指示剂的颜色变化指示结果，提高了灵敏度、并降低了化合物的用量。后来，Gee等通过开发新菌株，建立了AmesⅡ试验，Gee等开发的6种沙门氏菌株（TA7001～TA7006）在组氨酸合成操纵子上各有一个独特的点突变，这6种点突变包含了所有点突变的可能性，将6种菌株混合在一起（Tamix），即能够检测出所有可以诱发点突变的化合物，再配合一种传统Ames试验中采用的菌株TA98（用于检测移码突变），就可以检测出可以诱发点突变和移码突变的化合物。1.2 传统Ames试验与微量波动Ames试验比较传统 Ames 试验是对致癌物预测性最好的遗传毒性试验，是药物遗传毒性初筛的首选方法，也是QSAR构效关系建立的遗传毒性数据库的重要数据基础。传统的Ames平板渗入法采用半固体培养液，在有外源致突变物存在的情况下，组氨酸/色氨酸缺陷型菌株发生回复突变，回复为野生型，可在无组/色氨酸的培养基上生长，故可根据菌落形成数量，检查受试物是否为致突变物。然而，开展传统的Ames试验需4~5种菌株，试验过程涉及到培养大量的琼脂平板以及繁复的平板菌落计数等，耗费实验材料多，费时费力，且受试化合物用量大，敏感性低的缺点。相比传统的Ames试验方法，微量波动Ames试验采用了液态96孔板培养的方法，在微孔板中进行受试物和菌株的孵育，利用培养基中的特殊指示剂溴甲酚紫显色。当孔中有回复突变的菌株生长使培养基pH值降低时，指示剂由紫色变为黄色。外源化合物致突变能力越强，变色的孔数越多。通常，微量波动Ames试验选用TA98和TA100两种菌株作为测试菌株，试验结果可通过计数变色的孔数或用酶标仪直接读数，省去了平板菌落计数的繁琐和耗时的过程，且因其试验的全液体环境，使得试验灵敏度更高。1.3 微量波动Ames试验的优势l  高通量微量波动Ames试验过计数黄色孔的数量来反映受试物的致突变性，从而省去了平板制作和菌落计数等步骤，可实现高通量、自动化，具有节省耗材、节约药量、缩短试验周期、结果客观、适宜大量药物筛选的优点。l  高灵敏度波动试验比平板试验灵敏，其主要原因可能是：①在波动试验中细菌可在低浓度的诱变剂中处理较长时间；在平板试验中受测化学物将扩散至底层琼脂而被稀释，因此产生同样效应需更高的起始浓度，而有些化学物浓度增高后又会导致毒性效应。②液体培养有利于S9组份酶活性的正常发挥，在平板试验中可溶性酶扩散入底层琼脂会扰乱酶的代谢活力。l  化合物用量少Ames波动试验是用96孔板进行试验，化合物用量少，可作为新药开发的早期，受试物样品种类多、产量少或受试物较珍贵时评价遗传毒性的快速方法。2    IPHASE微量波动Ames试剂盒IPHASE/汇智和源顺应遗传毒理研究的需求，通过多年的开发和优化，推出了微量波动Ames试剂盒，为遗传毒理学研究提供了便捷的产品。图1 IPHASE微量波动Ames试验试剂盒试验结果2.1 微量波动Ames试剂盒组成 IPHASE/汇智和源微量波动Ames试剂盒由A盒和B盒两个包装组成，包含了进行试验所需的所有试剂和主要耗材，使用简单、便捷。2.2   微量波动Ames试剂盒优势l  便捷性 省去诱导S9制备、菌株培养和鉴定、试剂配制时间，可以直接使用，大大缩短了实验周期。l  准确性 试剂盒各成分均经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性高。l  高效性 利用显色原理判断受试物的致突变性，大大减少计数工作。l  稳定性 本试剂盒稳定性强、易于运输和保存。l  应用广 应用范围广，可用于食品、药品、化妆品、化学品、保健品、农药等的遗传毒性研究3    相关产品IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

肝脏是药物代谢的重要器官，体外代谢模型多以肝脏为基础。常用的体外模型有肝微粒体、肝S9、肝胞质液、原代肝细胞、肝组织切片、重组人代谢酶等。其中，原代肝细胞因具有较好的体外试验重现性，基本维持了肝脏的代谢功能，特别是较好的保留了与体内一致的酶水平，成为了体外药物试验的“金标准”，广泛应用于药物代谢与毒理学研究中。1    原代肝细胞及其应用原代肝细胞(Primary hepatocytes)是指从动物肝脏取出后立即培养的肝细胞。原代肝细胞作为一种体外模型，具有其它体外模型不可替代的优点：①与体内环境保持一致，酶量和辅助因子水平都是正常的生理浓度，可以在接近生理状态的的情况下研究药物的代谢和毒性；②较好保留和维持了肝细胞的完整形态和肝细胞体外代谢活性，真实反应了体内的代谢情况。随着技术水平的不断提高，原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究：①探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究；②评价药物和外源性物质对肝脏中细胞色素P450酶诱导作用并探讨其诱导机制；③预测和解释药物与药物之间的相互作用；④研究药物的细胞毒性等。2    原代肝细胞分离肝细胞是高度分化的细胞，具有丰富的酶系及多种特异性功能，被广泛用于生物化学、实验性肝损伤、药代动力学、 毒理学和致癌作用等研究。然而，分离并培养出高活性的原代肝细胞成为了关键步骤，分离的原代肝细胞在体外是否能够存活目前，原代肝细胞分离常用的方法有直接剪切法、组织块消化法和两步胶原酶灌流法等。其中，两步胶原酶灌流法因其对肝细胞损伤作用较小，在胶原酶消化细胞前使用了螯合剂，提高了肝细胞的产量和活力，分离的肝细胞数量多且活力好，成为了分离原代肝细胞的经典方法。两步胶原酶灌注法先使用无钙灌流液灌注，无钙灌流液作为预灌液，可以将肝脏内的残留血液灌注出，除去或者减少细胞间的钙离子，以减少细胞间的粘着力。经无钙灌流液灌注后再使用含酶灌流液进行灌注把组织中的细胞释放出来。胶原酶在消化肝的同时解除了细胞间接触抑制或活化了潜在的蛋白激酶、生长因子或受体，使肝细胞能逐渐适应消化分离过程中所发生的细胞、外环境及细胞的各种改变，这些改变对离体肝细胞修复、生长及功能有重要的促进作用，有利于肝细胞的培养。3    IPHASE原代肝细胞产品IPHASE/汇智和源凭借多年的技术能力和技术经验的积累，不断摸索和优化原代肝细胞分离过程，现已形成猴、犬、大鼠、小鼠等原代肝细胞产品。4    IPHASE原代肝细胞优势l  安全性IPHASE/汇智和源分离原代肝细胞所用动物均经过传染源检测，使用安全、更放心。l  纯度高IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞经分离纯化后纯度高，状态好。l  活性好IPHASE/汇智和源生产的原代肝细胞，复苏存活率可达90%以上，所有种属原代肝细胞均经过体外代谢质控，代谢活性强。5    相关产品关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

1    细胞分选方法概述细胞学研究中一个很重要的课题就是细胞的分离纯化，尤其是需要对某种特定的细胞进行功能研究，如对细胞培养上清液通过ELISA分析检测细胞因子、细胞共培养检测细胞功能等，都需要得到高纯度的目的细胞。因此，高效地分离所需要的目的细胞是进行细胞功能研究的先决条件。细胞分选（cell sorting）是指根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术，它是对某一特定细胞进行生化分析和功能分析的前提和基础。常用的细胞分选方法主要有两大类：一类是基于细胞物理性质的密度梯度离心法（Density gradient centrifugation），另一类是基于免疫识别特性的方法，包括荧光激活细胞分选方法（Fluorescence-activated cell sorting，FACS）和磁性激活细胞分选法（Magnetic-activated cell separation，MACS）。密度梯度离心法是基于不同的细胞群之间存在沉降系数差异的原理建立起来的，在一定的离心力的作用下，不同种类的细胞会以各自不同的速度沉降，在密度梯度不同的区域上会形成区带。这种方法简单易行，但此种方法分离所得到的细胞纯度较低，且细胞表面的标志不明确，特异性较差，目前使用较少。流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是20世纪60年代后期发展起来的一种利用流式细胞仪（Flow cytometer）进行快速定量分析细胞亚群的物理化学特性，根据这些物理化学特性精确分选细胞的新技术，FCM主要包括流式分析和流式分选两部分。FACS最初于1972年提出，是指荧光驱动的细胞分选新技术，即利用分选型流式细胞仪分选标记有荧光素偶联抗体的细胞样品，通过荧光系统区分目的细胞和非目的细胞。流式细胞仪通过接受激光照射后液流内细胞的散射光信号和荧光信号反映细胞的物理化学特性，如细胞的大小、颗粒度以及抗原分子的表达情况等，目前已被广泛应用于生命科学及其相关领域的基础研究。流式细胞分选被认为是细胞分选的“金标准”，它分选所得的细胞纯度高、回收率高、且操作环境为全封闭型，不易被污染。但是，该方法所需设备比较昂贵，耗时，且需要高水平的技术支持以及专业的操作人员；且该方法在一段时间内只能分选一个细胞样品，若试验需要从不同的样品中分选目的细胞时这种方法不可行；同时，由于FACS对细胞刺激较大，因此对分选出的细胞活性有较大影响。磁性细胞分选（MACS）是20世纪70年代发展起来的，是用结合有抗体的免疫磁珠与样品细胞进行孵育，表达有相应抗原的细胞就会特异性的结合在包被有抗体的免疫磁性微粒上，当体系缓慢的经过磁场时，带有磁珠的细胞就会滞留在磁铁上，而非目的细胞由于未结合磁珠仍存在与混合细胞悬液中，从而达到分离纯化细胞的目的。MACS法是一种相对高效简便的细胞分选方法，所需设备简单，只需一块专用磁铁即可进行分选，操作较为简单，对操作人员的技术要求也不高，一般实验室都可进行磁性分选。磁性分选只是让细胞处于一个低磁场中，基本可以忽略对细胞的影响，分离得到的细胞具有较高的复苏率及细胞活性，对于下游应用影响较小，在保持细胞活性方面优于流式分选。磁性分选因其高灵敏度、高纯度、易操作、对目的细胞刺激较小等特性成为了细胞分选的方法，具有潜在的应用前景。2    相关产品IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验，推出了多领域、多种类的高端科研试剂，为药物早期研发提供筛选工具，为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段，为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品。关    于    我    们汇智和源，致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂，IPHASE为公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。