PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)

PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)

订购信息

产品描述

PikoGreen是一种极为灵敏的双链DNA荧光染料，仅与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25 pg/mL的dsDNA。与传统DNA定量方法相比，具有如下优点：

1. 灵敏：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省样品。

2. 特异性强：只结合dsDNA，特异性强，不受样品常规污染影响。传统紫外吸光法容易受样品中存在的单链DNA，蛋白，RNA等影响。

3. 耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。

    4. 线性范围宽：PikoGreen dsDNA染料测定DNA浓度，在100 pg/mL~100 ng/mL范围内呈良好线性。

    5. 方便操作：在样品中加入染料，染色5~6 min，然后读数即可，且适用于96和384孔板。与大多数基于荧光的酶标仪兼容。

本产品可适用于各种DNA样品分析、PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

产品组分

保存方法

冰袋运输，4℃避光干燥保存，保质期6个月。如果较长时间不用，建议把组分C与组分D放置于-20℃保存。

使用方法

（以96孔板为例）

1．使用前，将产品从储存条件下取出恢复至室温。PikoGreen提供的是DMSO溶液，在4℃存放时成固体，可37℃水浴溶解。每个组分应充分震荡或涡旋混匀、离心，以免造成不必要的试剂损耗。

2．分别吸取19.6 mL组分A， 200 μL组分B， 200 μL组分C配制成20 mL1×PikoGreen工作液。新配工作液应在1 h内使用，工作液存放重新使用时须重悬，以免染料沉淀，工作液存放24 h，会轻微影响定量结果。

3．每个样品，吸取200 μL 的工作液至黑色的96孔板微孔中。为确保结果精确可靠，建议每个测试样品和

DNA标样分别做平行的3个复孔。黑色的检测板可以减少各测试样品间的荧光干扰。

4．96孔板微孔中，分别加入dsDNA标样或待测样品各10 μL，并用移液器轻轻混匀。

5．将微孔板室温避光孵育10分钟，在Ex(nm)：350,  Em(nm)：460处用酶标仪测量荧光值。

6．制作标准曲线，计算样品浓度。

注意事项

1. 为了得到最佳结果，请使用精确校准的移液器和去RNA酶的枪头、试管以及检测板。

2. 建议检测时每个DNA标样和未知样品都设定3个复孔。如果检测时不只一块96孔板，建议每块96孔板都设定一条标准曲线，尽量减少检测板之间的误差。

3. 为得到最佳结果，检测板应在一小时内读取完毕。如果将反应液重新储存并在24 h内读取数据，结果的精确性会有轻微损失。

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！