细胞周期检测试剂盒Plus

细胞周期检测试剂盒Plus

订购信息

产品描述

细胞周期检测试剂盒升级版（Cell Cycle Assay Kit Plus）采用RedNucleus I染色法检测细胞周期，RedNucleus I是一种远红外核酸染料，具有细胞膜透性，可快速进入活细胞，特异结合DNA，对活细胞进行周期检测，且无需RNase的消化。与传统的碘化丙啶染色（PI staining）方法相比，细胞无需破膜或固定，操作更加简便。

RedNucleus I是一种双链DNA的荧光染料，与双链DNA结合后的荧光强度和双链DNA的含量成正比。可通过流式细胞仪测定细胞内DNA含量，然后根据DNA含量的分布情况，进行细胞周期分析。RedNucleus I 染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。此外，RedNucleus I与Horizon BV / BUV、FITC和R-PE等染料兼容，可在样品染色后进行周期检测。

本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期检测，如果用于组织的细胞周期检测，则必须先把组织消化成单细胞状态。

产品组分

运输与保存

蓝冰运输。-20℃保存，组分B需避光保存。有效期24个月。【注】：短期使用请保存于4℃。

操作步骤

1.细胞样品的准备：

（1）（此步骤是针对贴壁细胞，若为悬浮细胞，可直接进行第2步）用胰酶消化细胞，加入细胞培养液，轻轻吹散细胞后，收集到离心管内。

（2）1000 g左右离心3-5 min，沉淀细胞。小心吸除上清，加入约1 mL冰浴预冷的1×的染色缓冲液（将10×的染色缓冲液用diH2O 按1：10 稀释），重悬细胞。重复一次。

（3）1000 g左右离心3-5 min，沉淀细胞。弃上清后，加入1 mL 培养基重悬细胞（对于固定细胞，也可用1×PBS 重悬）。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

2.染色：

（1）每管细胞样品中加入4 μL 的RedNucleus I 染色液，缓慢并充分混匀，室温避光孵育20 min（或在37 ℃避光孵育5-10 min）。

3.流式检测和分析：

（1）用流式细胞仪在638 nm 处激发，推荐在RL3或FL4 通道检测，也可使用RL1、RL2通道检测。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。

注意事项

1.该产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.本产品适用于活细胞和固定细胞周期检测。如需固定，推荐使用冰浴预冷75-80% 的乙醇过夜固定细胞。

3.荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！