您好,欢迎访问仪器信息网
注册
上海泽叶生物科技有限公司

关注

已关注

银牌5年 银牌

已认证

粉丝量 0

400-860-5168转4668

仪器信息网认证电话,请放心拨打

当前位置: 仪器信息网 > 泽叶生物 > 生物分子 > pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒

pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒

供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
规格: 1 kit
货号: ZY-6801M
CAS号:
报价: ¥4000
获取电话
留言咨询
产品介绍

pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒

产品编号产品名称规格价格(元)说明书
ZY-6801MpCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒1 kit4000
ZY-6801HpCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒1 kit4800


本试剂盒所包含的原核表达载体(pCold-SUMO-10His)是在pCold-SUMO载体基础上改造而成(专利),该载体启动子(CS Promoter)来源于南极嗜冷细菌,在低温下(15度)才能启动蛋白的表达。低温下细菌生长缓慢,使得蛋白合成速度减慢,从而最大限度的提高了蛋白正确折叠的几率,提高了蛋白可溶性表达,增强了活性蛋白的表达比率。该表达系统所包含的SUMO tag可以极大地提高小分子量蛋白的表达量,而且能进一步提高蛋白的可溶表达几率。另外,TEE信号肽可增强冷启动子调控下目的蛋白的高表达。
升级后的pCold-SUMO-10His载体,其SUMO蛋白标签含有10个组氨酸标签(10His tag),使其结合Ni-NTA的能力更强。与较早版本的pCold-SUMO表达系统相比,pCold-SUMO-10His表达系统在保留了原有系统的蛋白可溶性生产能力、高特异性剪切能力的情况下,显著提高了与Ni-NTA的结合能力。通过与Ni-NTA结合能力的提高,在以下三个方面改善了生产重组蛋白的性能:(1)提高了粗蛋白样品中目标蛋白的捕获能力,从而提高纯化产量;(2)在蛋白纯化过程中可以使用更高浓度的咪唑进行漂洗,去杂蛋白的能力明显提升,从而获得更高纯度的重组蛋白;(3)在重组蛋白酶切去除SUMO标签后,利用Ni-NTA去除SUMO标签更为彻底,获得纯度更高的无标签目标蛋白。
pcold-sumo 载体图谱

组分

组分名称数量保存
pCold-SUMO-10His Vector (200 ng/μl)50 μl-20℃
pCold-SUMO-10His-Positive Plasmid (20 ng/μl)20 μl
SUMO Protease (10 U/μl)100 μl
10×SUMO Buffer1 ml
rTEV Protease (10 U/μl)100 μl
20×rTEV Buffer1ml
1700X氯霉素(34mg/ml)1 ml
200X L-阿拉伯糖(100mg/ml)1 ml
1000X四环素(2mg/ml)1 ml
E.coli Transfer Reagent1.2 ml
Lyophilized Arctic (DE3) competent cells5支
Lyophilized BL21(DE3)Chaprone competent cells5支

主要特征

  • 冷启动子,低温诱导表达,最大限度地提高蛋白地可溶性

  • 分子伴侣可协助蛋白的正确折叠

  • 可大大的提高蛋白表达量

  • 两种宿主菌和两种蛋白酶可选,使实验方案更加灵活

应用

包涵体蛋白的最佳解决方法,提高蛋白的可溶性优化表达。

实例

pcold-sumo载体提高蛋白的可溶性表达Fig1 . M. 中分子量蛋白Marker 1. 未诱导
2. pET15b系统表达全菌体蛋白
3.pET15b系统表达上清液(可溶蛋白部分)
4.pCold-SUMO表达于BL21(DE3)全菌体蛋白
5.pCold-SUMO表达于BL21(DE3)上清液(可溶蛋白部分)
6.pCold-SUMO表达于BL21(DE3)chaprone全菌体蛋白
7.pCold-SUMO表达于BL21(DE3)chaprone上清液(可溶蛋白部分)
8.使用Ni-NTA Resin纯化SUMO融合蛋白
9.切除SUMO tag后的目的蛋白

泳道2和3表明使用pET系统表达几乎无可溶性蛋白表达,皆为包涵体;泳道4和5表明使用pCold-SUMO系统于BL21(DE3)菌中,可溶性蛋白表达约占40%;泳道6和7表明使用BL21(DE3)chaprone可进一步提高蛋白的可溶性表达。
pcold-sumo对照蛋白SUMO酶切Fig2. 分别用2 μl和5 μl的SUMO蛋白酶(C0801)对100 μg pCold-SUMO-10His-Positive Plasmid 表达所得对照蛋白进行酶切1h或3h,如图所示。M:Protein Marker,泳道1:纯化后的含SUMO标签的对照蛋白; 泳道2:2μl SUMO Protease 酶切1h产物;泳道3:5μl SUMO Protease 酶切1h产物; 泳道4:2μl SUMO Protease 酶切3h产物;泳道5:5μl SUMO Protease 酶切3h产物。

特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!



pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供C8A试剂盒;人补体成分c8α链检测试剂盒(ELISA方法)、RO52试剂盒;人e3泛素蛋白连接酶trim21检测试剂盒(ELISA方法)、PANX1试剂盒;人Pannexin-1蛋白检测试剂盒(ELISA方法)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。
工商信息

企业名称

上海泽叶生物科技有限公司

企业信息已认证

企业类型

信用代码

91310116MAJ8N934E

成立日期

2016-08-09

注册资本

100

经营范围

生物科技

联系我们
推荐产品
供应产品

上海泽叶生物科技有限公司

查看电话

沟通底价

提交后,商家将派代表为您专人服务

获取验证码

{{maxedution}}s后重新发送

获取多家报价,选型效率提升30%
立即咨询
点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》 且同意关注厂商展位
联系我们:

企业名称: 上海泽叶生物科技有限公司

企业地址: 上海市松江区国家经济开发区北松公路5629号聚科生物松江园区 联系人: 宛双凤 邮编: 200182 联系电话: 400-860-5168转4668

仪器信息网APP

展位手机站