Tli(exo-) DNA聚合酶

Tli(exo-) DNA聚合酶

Tli (exo-) DNA聚合酶，又名Vent (exo-) DNA 聚合酶，来源于Thermococcus litoralis，经基因工程改造而得，去除了3′-5′核酸外切酶校读活性，其保真度有所降低，大约比Taq DNA聚合酶高2倍。该酶在95℃温育1小时后，仍具有90%以上的聚合酶活性。Tli (exo-) DNA Polymerase 与Vent (exo-) DNA Polymerase性质和使用方法完全相同，纯化自重组E. coli菌株，其携带D141A/E143A突变。

主要特征和应用

引物延伸

高温环状测序

高温双脱氧测序

组分

组分名称 数量

Tli (exo-) DNA Polymerase (5 U/μl) 100 μl

10×HG PCR Buffer 1 1 ml×2

单位定义

一个活力单位即在在74°C条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

使用方法

按下表配制反应液:

Tli (exo-) DNA Polymerase(5 U/μl)             0.25 μl

10×HG PCR Buffer 1                                       5 μl

dNTP Mixture (2.5 mM each)                         4 μl

*1模板DNA                                                   *X μl

上游引物（10 μM）                                       2 μl

下游引物（10 μM）                                       2 μl

ddH2O                                                Up to 50 μl

*1模板DNA用量参数(50 μl反应体系):Genomic DNA 100-1000 ng ; Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl PCR扩增循环参数 

循环数 温度 时间

1st Cycle 95°C 2min

25-35 Cycles 95°C 10s

Tm 20s

72°C 2kb/min

Last Cycle 72°C 2min

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！