蛋白胶中量回收试剂盒

蛋白胶中量回收试剂盒

Protein Gel Midi-Extraction Kit

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的中量蛋白胶回收法。

产品特点：
1．简单，不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2．适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3．每次可以处理1g的PAGE胶(具体多少蛋白质取决于上样的浓度)。
4．回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小，洗脱时间相关)。
5．跟后续的实验兼容，包括2-D电泳、质谱测序等。

产品组成：

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1．按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2．切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)。
?注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3．将切下的、重量不超过1 克的胶块转移到30mL塑料注射器中。
4．用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去，使之变成细小的碎片，用自备的15mL塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。
5．加入1mL溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将将要使用的溶液B放在冰箱预冷。
6．10000g离心10分钟，转移上清到新的10-15mL的塑料离心管中，注意不要吸取碎胶。
7．加入5倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。
8．-20℃放置至少10-30分钟。
9．室温12000g(注意：一定要检查使用的离心管是否能够耐受次离心力，如果不能建议将溶液分到1.5mL的塑料离心管中再进行离心处理)离心5-20分钟，弃上清。
10．室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！