一管式 DNA 胶回收试剂

一管式 DNA 胶回收试剂

Magic Gel DNAback 

产品及特点 本产品是开发的性的 DNA 胶回收试剂，是全世界的可以直接从溶化的琼脂糖凝胶中沉淀回收单双链 DNA 的产品，也堪称快速的胶回收试剂，操作时间只有玻璃奶式和柱式胶回收方法的 1/3 左右。本产品也可以用于单双链 RNA 胶回收。

1. 超快，整个过程不到 15 分钟(对一个样品而言)，由溶胶（3分钟），放置（2 分钟），沉淀（5 分钟）和两次洗涤（各 1-2分钟）几步组成。

2. 纯度高，回收产物可以直接用于连接、酶切、PCR、测序等各种反应，不影响后续酶反应。

3. 回收率高，一般大于 50%。

4. 适用范围广，可用于回收普通琼脂糖凝胶能够分离的 DNA 片段（一般在 100 bp-50 Kb 之间），而柱式同类产品几乎都不能回收 50 Kb 的超大片段。

5. 一管式操作，不需要任何样品转移步骤，使大片段 DNA 保持完整，同时减少了污染的可能。

6. 既可用于回收单双链 DNA，又可用于回收单双链 RNA。

7. 扩容性好，可以在一个离心管中（包括 15 mL 或 50 mL 离心管）进行大规模回收，没有大吸附量的限制；而柱式胶回收试剂都受大吸附量的限制。

8. 本产品足够 50 次 0.1g 琼脂糖凝胶的胶回收。

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。

溶液 B 呈红色，如果颜色发生变化，则表示 pH 已经改变，请弃之不用。溶液 C 为无色液体，会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀，用前无需溶化，避开沉淀直接取上清液使用。

自备试剂 TE 或超纯水

使用方法 1. 从琼脂凝胶上切下目的 DNA 片段，放入 1.5 mL 离心管中。尽可能多地去掉不含 DNA 的胶。如果方便好称重以便估计需要的通用溶胶液（空的 1.5 mL 离心管 EP 约 0.9 克，一片普通胶片的重量在 0.05-0.1 克左右）。

2. 按 0.1 克胶加 300 uL 通用溶胶液的比例加入通用溶胶液，65℃保温 3 分钟使胶融化。其间可用摇晃几次以促进凝胶融化。如果放量使用，溶化胶的时间可能需要延长。

3. 待胶完全溶化后，按 0.1 克胶加 100 uL 核酸沉淀液的比例加入核酸沉淀液, 充分混匀。如果回收 20 Kb 以上的 DNA 片段，混匀时需要温和震荡；对 20 Kb 以下的 DNA 片段，可以剧烈震荡。

4. 室温静置至少 2 分钟，此时管内将出现大量红色颗粒状沉淀。此步十分关键，不能省略而直接离心。

5. 13000 g 室温离心 5 分钟后, 小心吸弃上清，管底将有黄豆大小的红色沉淀。

6. 加入 0.8 mL 核酸沉淀洗涤液，充分震荡混匀。注意：核酸沉淀洗涤液瓶底有晶体状沉淀，用前无需溶解，但取用核酸沉淀洗涤液时需要避开沉淀。

7. 13000 g 室温离心 2 分钟，小心吸弃上清，管底将有芝麻大小的白色沉淀。

8. 再用 0.2 mL 核酸沉淀洗涤液重复第 6-7 步一次，管底还有芝麻大小的白色沉淀。

9. 小心吸弃上清后即得纯化的 DNA 沉淀，加入少量 TE 或水，充分吹打溶解。后还会有少量白色不溶沉淀，属于正常现象。疑难解答 Q：电泳为何不能检测到回收的 DNA？

A：，其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失，三是通用溶胶液和核酸沉淀液的 pH 发生改变。

Q：电泳时为何有残留荧光物在加样孔中？

A：可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的 DNA，吸取 DNA ，只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。本公司一般使用

OXOID 的琼脂糖，得到的 DNA 可以用于常见的分子生物学后续反应。

Q：本产品和贵公司的 Magic Solution DNABACK 有何区别？A：其姊妹产品 Magic Solution DNABACK 没有通用溶胶液，主要用于从 PCR 或其他酶反应中快速沉淀回收单双链 DNA 和 RNA，

达到浓缩、除盐、去引物等目的。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！