血液线粒体和核DNA双提试剂盒

血液线粒体和核DNA双提试剂盒

Blood DNA Isolation Kit

本产品是基于经典离心法的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。

特点：
1. DNA纯净，OD260/OD280在1.8～2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA产量一般在30～50μg/mL全血。
2. 操作简单，整个过程约15分钟，室温操作，适合大规模样品处理。
3. 一次的血液处理量最多可达5mL，不需要柱子，不会发生其他同类产品经常发生的堵塞现象。
4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格只有其一半左右。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

产品组成：

保存条件：室温，有效期一年。

自备试剂：氯仿、异丙醇、75%乙醇。

使用方法：

1. 在装有抗凝血液的离心管中，按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000～10000g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3. 将沉淀重悬于1/2体积（按最初血液的体积计算）的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000～10000g室温离心2分钟。
4. 小心弃去上清，沉淀即为去除了红细胞和白细胞胞浆的白细胞细胞核。
5. 在白细胞细胞核中加入0.6mL溶液A（溶液A用前需要充分摇匀），用移液枪轻柔吹打混匀（剧烈吹打会打断DNA）。
6. 68℃水浴10分钟（此步可省略，但产量略有降低）。
7. 加入0.2mL氯仿和0.3mL溶液B，立即小心颠倒混匀。
8. 室温13000-15000g离心3分钟，小心将上清（约0.7mL）转移至一新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入等体积异丙醇（自备），轻柔颠倒混匀5-8次，此时一般会出现絮状DNA沉淀。DNA可以用下列方法之一回收。
10. 方法一：可以用枪头将絮状DNA 挑出，放在1mL 75%乙醇中几十秒使其中的盐离子进入乙醇中，然后再挑出DNA，在空气中放半分钟使乙醇挥发，再转移到0.1-0.3mL自备的TE缓冲液中溶解过夜（大分子的DNA 需要长时间才能彻底溶解）。
11. 方法二：室温13000-15000g离心1分钟，去尽上清。在DNA沉淀中加入75%乙醇，震荡后室温13000～15000g离心1分钟，去尽上清（含盐离子）。重复75%乙醇洗涤一次。短暂离心，去尽残留75%乙醇（此步十分重要，不要省略，否则乙醇会影响DNA的溶解和后续的使用），最后在DNA 沉淀中加入0.1～0.3mL自备的TE缓冲液过夜溶解DNA待用。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！