一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒(一步法无内毒素质粒DNAout)
One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面),从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触,从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术,操作快捷,只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高,一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成:
储存条件:常温运输及保存(溶液A最好4℃保存),有效期一年。
使用方法:
一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次,得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。
二:一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀),充分吹打或振荡30秒裂解细菌,直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法,故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱:在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化,质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中,室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意:必须静止2分钟,否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液,丌是通用洗柱液,丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀,用前需要加热到60℃左右使之融化,混匀后再用),室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
11.室温12000~15000g离心半分钟,甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中,加入30-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。
13. 12000~15000g离心半分钟,离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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企业名称
上海泽叶生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
91310116MAJ8N934E
成立日期
2016-08-09
注册资本
100
经营范围
生物科技
上海泽叶生物科技有限公司
公司地址
上海市松江区国家经济开发区北松公路5629号聚科生物松江园区
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