Ar.Qual化转感受态细胞
Ar.Qual Chemically Competent Cell
Ar.Qual化转感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1060)
Ar.Qual: 100μl/支
pCAMBIA2301(control vector,10ng/μl ) 10μl
保存条件(保质期): -80℃(12个月)
![2015092881872913.jpg 2015092881872913.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/6dbffe32-0fa1-434f-93b6-26a97abfbb67.jpg)
基因型
Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR ) Ar Qual Ri (agropine type)
Ar.Qual化转感受态细胞产品说明
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大
多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.Qual发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,具有
广泛的宿主范围(玉米,烟草,番茄,柑橘等),同时具有链霉素,氯霉素抗性。本公司生产的Ar.Qual化学
转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测,转化效率>104 cfu/μg DNA。
Ar.Qual化转感受态细胞操作方法
1.取-80℃保存的Ar qual发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量)
,用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、
冰浴5分钟。
3. 冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2小时。
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,
倒置放于28℃培养箱培养2-3 天
![图片17.png 图片17.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/4b54e9f7-8fe6-4db3-abc6-d85c595b6657.jpg)
Ar.Qual化转感受态细胞注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转
化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,
与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获
得大的菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。
4. Ar.Qual具有链霉素、氯霉素抗性,不可用于具有链霉素抗性或氯霉素抗性质粒的转化。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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