BL21 Star(DE3)感受态细胞
BL21 Star(DE3) Chemically Competent Cell
BL21 Star(DE3)感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1005)
BL21 Star(DE3): 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)
BL21 Star(DE3)感受态细胞产品说明
BL21 Star(DE3)菌株源于BL21(DE3)菌株,含有rne131突变(RNaseE基因),RNaseE基因的突变降低了內源RNase的积累,增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而提高异源蛋白的表达水平。主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达,同时含有大肠杆菌RNA聚合酶,也可用于非T7启动子表达载体(pGEX,pMAL等)的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高,所以不适合毒性蛋白的表达。BL21 Star(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg DNA。
BL21 Star(DE3)感受态细胞操作方法
1. BL21 Star(DE3) 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
BL21 Star(DE3)感受态细胞注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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企业名称
上海泽叶生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
91310116MAJ8N934E
成立日期
2016-08-09
注册资本
100
经营范围
生物科技
上海泽叶生物科技有限公司
公司地址
上海市松江区国家经济开发区北松公路5629号聚科生物松江园区
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